一种融合蛋白及其制备方法与流程
技术特征:
1.一种重组融合蛋白,其特征在于,包含以下任一种单体蛋白:
2.根据权利要求1所述的重组融合蛋白,其特征在于,所述smut1、smut2或smut3的c端连接6×his标签,分别得到重组融合蛋白rsmut1-his、rsmut2-his、rsmut3-his。
3.根据权利要求2所述的重组融合蛋白,其特征在于,所述重组融合蛋白rsmut1-his、rsmut2-his、rsmut3-his的氨基酸序列分别如seq id no.6-seq id no.8所示。
4.一种如权利要求1-3中任一项所述重组融合蛋白的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤s1中,所述重组融合蛋白编码的基因序列如seq id no.10-seq id no.12中任一序列所示。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤s1中,所述真核表达载体为哺乳动物细胞表达载体。
7.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤s2中,所示细胞株为cho细胞株。
8.一种cho细胞株,为中国仓鼠卵巢细胞slpcb07,保藏编号为cctccno:c2024299。
9.一种如权利要求1-3中任一项所述重组融合蛋白或如权利要求8所述cho细胞株在制备预防病毒性疾病猪流行性腹泻的疫苗中的应用。
10.一种如权利要求1-3中任一项所述重组融合蛋白或如权利要求8所述cho细胞株在制备预防和/或治疗病毒性疾病猪流行性腹泻的药物中的应用。
技术总结
本发明涉及一种融合蛋白及其制备方法。所述融合蛋白为含有猪流行性腹泻病毒全长的突变型SMut1单体蛋白,或为含有猪流行性腹泻病毒全长的突变型SMut2单体蛋白,或为含有猪流行性腹泻病毒全长的突变型SMut3单体蛋白。本发明构建了融合蛋白突变体,且本突变体相对于野生型的融合蛋白,免疫原性显著提高、Tm值显著提高,其形成的三聚体蛋白比例高达95.2%。构建并筛选了重组亚单位融合蛋白的CHO细胞株,该细胞株表达重组亚单位融合蛋白的产量高达1.6g/L、易于纯化,细胞培养上清中的目的蛋白纯度都能达到85%以上,只需一步亲和层析就能使目的蛋白纯度达到95%以上,远远满足亚单位疫苗和诊断试剂的需求,易于大规模生产。
技术研发人员:翟伟锋,宗宇雨,殷波
受保护的技术使用者:申联生物医药(上海)股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/12/19
文档序号 :
【 40404289 】
技术研发人员:翟伟锋,宗宇雨,殷波
技术所有人:申联生物医药(上海)股份有限公司
备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
声 明 :此信息收集于网络,如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们,我们会在第一时间删除
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