细胞表面受体的表位工程的制作方法

本文提供了具有一个或多个遗传编辑的细胞表面蛋白基因的遗传工程化的造血细胞(诸如造血干细胞)，其可与免疫疗法(即细胞毒性剂，诸如嵌合抗原受体t细胞)组合使用，及其治疗用途。

背景技术：

1、基因转移技术的创新使得重新编程免疫细胞以靶向癌细胞上表达的分子成为可能。极其有希望的结果促使fda批准了用于治疗b淋巴母细胞白血病的首个过继性细胞免疫疗法，称为cd19 car-t细胞。尽管这些成功有望彻底改变肿瘤学领域，但它们的应用受到了阻碍，因为大多数适合的候选者通常与健康的骨髓细胞共享，从而导致免疫抑制和严重的造血毒性。抗髓系/干细胞car-t诱导的毒性限制了它们在hsct之前有限时间窗口内对挽救疗法的适用性，这可能不足以根除疾病。因此，有效靶向感兴趣的细胞(例如癌细胞)而不靶向或伤害正常细胞群仍是一个尚未满足的需求。

技术实现思路

1、本公开一般涉及具有一个或多个遗传编辑的细胞表面蛋白基因的遗传工程化的造血细胞诸如造血干细胞，以及能够靶向相同细胞表面蛋白的嵌合抗原受体。

2、在一个实施方案中，提供了一种遗传工程化的造血干细胞(hspc)，其包含遗传工程化的flt3基因，其中遗传工程化的flt3基因被工程化使得其经编码的蛋白质与治疗抗flt3抗体的结合降低。在一个实施方案中，遗传工程化的flt3基因包含flt3基因的外显子9中的至少一个突变。在一个实施方案中，遗传工程化的flt3基因的外显子9中的至少一个突变导致在位置n399处带有突变的多肽。在一个实施方案中，在位置n399处的突变是n399d或n399g。在一个实施方案中，治疗抗flt3抗体是抗flt3克隆4g8抗体。在一个实施方案中，治疗抗flt3抗体是具有与4g8抗体相同的六个cdr或与4g8抗体竞争的抗体。在一个实施方案中，遗传工程化的hspc是使用包含引导核酸和核酸酶的crispr系统进行遗传工程化的。在一个实施方案中，核酸酶是化脓性链球菌(streptococcus pyogenes)cas9(spcas9)、金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)(sacas9)、毛螺菌科细菌(lachnospiraceaebacterium)cas12a(lbcas12a)，或氨基酸球菌属某种(acidaminococcus sp.)bv3l6(ascas12a)。在一个实施方案中，crispr系统包含spcas9。在一个实施方案中，引导核酸选自由seq id no：13、seq id no：14、seq id no：15和seq id no：16组成的组。在一个实施方案中，crispr系统还包含模板dna。在一个实施方案中，模板dna选自由seq id no：40、seqid no：41、seq id no：42和seq id no：43组成的组。在一个实施方案中，核酸酶是与碱基编辑器酶连接的催化受损的spcas9。在一个实施方案中，碱基编辑器酶是核苷酸脱氨酶。在一个实施方案中，核苷酸脱氨酶是胞嘧啶脱氨酶或腺苷脱氨酶。在另一个实施方案中，催化受损的spcas9是ng-spcas9或spry-spcas9。在一个实施方案中，催化受损的spcas9包含在位置d10a处的突变。在一个实施方案中，催化受损的spcas9还包含在位置k918n处的突变。在一个实施方案中，引导rna选自由seq id no：17、seq id no：18、seq id no：19、seq id no：20和seq id no：23组成的组。在一个实施方案中，遗传工程化的flt3基因编码包含氨基酸序列seq id no：51或seq id no：52的多肽。还提供了遗传工程化的造血干细胞(hspc)群，其包含如上所述的遗传工程化的hspc。在一些实施方案中，提供了一种治疗造血系统恶性肿瘤的方法，所述方法包括向人受试者施用：(a)如上所述的遗传工程化的造血干细胞群，和(b)治疗有效量的包含有抗flt3抗体结合结构域或包含抗flt3结合结构域的抗体或抗体片段的至少一种剂。在一个实施方案中，至少一种剂包含有包含抗flt3抗体结合结构域的嵌合抗原受体-t(car-t)细胞。在一个实施方案中，造血系统恶性肿瘤是b淋巴母细胞白血病(bll)、急性髓系白血病(aml)或t细胞急性淋巴母细胞白血病(t-all)。在一个实施方案中，所述方法还包括从来自人受试者的生物样品中获得hspc以及对来自人受试者的生物样品中的hspc进行遗传工程化，从而形成遗传工程化的hspc群。在一个实施方案中，生物样品是骨髓细胞、血液、脐带血细胞、或动员的外周血衍生的cd34+造血干细胞和祖细胞。

3、在一个实施方案中，还提供了一种遗传工程化的造血干细胞(hspc)，其包含遗传工程化的cd123基因，其中遗传工程化的cd123基因被工程化使得其经编码的蛋白质与治疗抗cd123抗体的结合降低。在一个实施方案中，治疗抗cd123抗体是克隆7g3抗体或其人源化对应物csl362。在一个实施方案中，遗传工程化的cd123基因包含cd123基因的外显子2中的至少一个突变。在一个实施方案中，遗传工程化的cd123基因的外显子2中的至少一个突变导致在位置s59处带有突变的多肽。在一个实施方案中，在s59处的突变是s59p或s59f。在一个实施方案中，治疗抗cd123抗体是抗cd123克隆6h6抗体或抗cd123克隆s18016f抗体。在一个实施方案中，遗传工程化的cd123基因包含cd123基因的外显子3中的至少一个突变。在一个实施方案中，遗传工程化的cd123基因的外显子3中的至少一个突变导致在位置p88处带有突变的多肽。在一个实施方案中，在p88处的突变是p88l或p88s。在一个实施方案中，遗传工程化的hspc是使用包含引导核酸和核酸酶的crispr系统进行遗传工程化的。在一个实施方案中，引导核酸选自由seq id no：24、seq id no：27、seq id no：30、seq id no：32、seqid no：33和seq id no：34组成的组。在一个实施方案中，核酸酶是与碱基编辑器酶连接的催化受损的spcas9。在一个实施方案中，碱基编辑器酶是核苷酸脱氨酶。在一个实施方案中，碱基编辑器酶是胞嘧啶脱氨酶或腺苷脱氨酶。在一个实施方案中，催化受损的spcas9是ng-spcas9或spry-spcas9。在一个实施方案中，催化受损的spcas9包含在位置d10a处的突变。在一个实施方案中，催化受损的spcas9还包含在位置k918n处的突变。在一个实施方案中，遗传工程化的cd123基因编码包含氨基酸序列seq id no：54、seq id no：55、seq idno：56、seq id no：57或seq id no：58的多肽。本文还提供了遗传工程化的造血干细胞(hspc)群，其包含如上所述的遗传工程化的hspc。还提供了一种治疗造血系统恶性肿瘤的方法，所述方法包括向人受试者施用：(a)如上所述的遗传工程化的造血干细胞群，和(b)治疗有效量的包含有抗cd123抗体结合结构域或包含抗cd123结合结构域的抗体或抗体片段的至少一种剂。在一个实施方案中，至少一种剂包含有包含抗cd123抗体结合结构域的嵌合抗原受体-t(car-t)细胞。在一个实施方案中，造血系统恶性肿瘤是b淋巴母细胞白血病(bll)、急性髓系白血病(aml)、t细胞急性淋巴母细胞白血病(t-all)或母细胞性浆细胞样树突状细胞白血病(bpcdn)。在一个实施方案中，所述方法还包括从来自人受试者的生物样品中获得hspc以及对来自人受试者的生物样品中的hspc进行遗传工程化，从而形成遗传工程化的hspc群。在一个实施方案中，生物样品是骨髓细胞、血液、脐带血细胞、或动员的外周血衍生的cd34+造血干细胞和祖细胞。

4、在一些实施方案中，提供了一种遗传工程化的造血干细胞(hspc)群，其包含：(i)遗传工程化的flt3基因，其中遗传工程化的flt3基因编码与治疗抗flt3抗体的结合降低的蛋白质，和(ii)遗传工程化的cd123基因，其中遗传工程化的cd123基因编码与治疗抗cd123抗体的结合降低的蛋白质。在一个实施方案中，遗传工程化的flt3基因包含flt3基因的外显子9中的至少一个突变。在一个实施方案中，遗传工程化的flt3基因的外显子9中的至少一个突变导致在位置n399处带有突变的多肽。在一个实施方案中，遗传工程化的cd123基因包含cd123基因的外显子2中的至少一个突变。在一个实施方案中，遗传工程化的cd123基因的外显子2中的至少一个突变导致在位置s59处带有突变的多肽。在一个实施方案中，治疗抗flt3抗体是抗flt3克隆4g8抗体。在一个实施方案中，治疗抗cd123抗体是抗cd123克隆7g3抗体或csl362抗体。在一个实施方案中，使用包含至少两种引导核酸和一种核酸酶的crispr系统对hspc群进行遗传工程化。在一个实施方案中，至少两种引导核酸是1)seq idno：18或seq id no：20和2)seq id no：seq id no：24或seq id no：27。在一个实施方案中，至少两种引导核酸是seq id no：20和seq id no：27。在一个实施方案中，核酸酶是与碱基编辑器酶连接的催化受损的spcas9。在一个实施方案中，碱基编辑器酶是核苷酸脱氨酶。在一个实施方案中，碱基编辑器酶是胞嘧啶脱氨酶或腺苷脱氨酶。在一个实施方案中，催化受损的spcas9是ng-spcas9或spry-spcas9。在一个实施方案中，催化受损的spcas9包含在位置d10a处的突变。在一个实施方案中，spcas9还包含在位置k918n处的突变。还提供了一种治疗造血系统恶性肿瘤的方法，所述方法包括向人受试者施用：(a)如上所述的hspc群，和(b)治疗有效量的至少一种剂，其包含以下中的一者或两者：(1)抗flt3抗体结合结构域或包含抗flt3结合结构域的抗体或抗体片段，和/或(2)抗cd123抗体结合结构域或包含抗cd123结合结构域的抗体或抗体片段。在一个实施方案中，至少一种剂包含有包含抗flt3抗体结合结构域和/或抗cd123抗体结合结构域的嵌合抗原受体-t(car-t)细胞。在一个实施方案中，造血系统恶性肿瘤是b淋巴母细胞白血病(bll)、急性髓系白血病(aml)、t细胞急性淋巴母细胞白血病(t-all)或母细胞性浆细胞样树突状细胞白血病(bpcdn)。在一个实施方案中，所述方法还包括从来自人受试者的生物样品中获得hspc以及对来自人受试者的生物样品中的hspc进行遗传工程化，从而形成遗传工程化的hspc群。在一个实施方案中，生物样品是骨髓细胞、血液、脐带血细胞、或动员的外周血衍生的cd34+造血干细胞和祖细胞。

5、在一个实施方案中，还提供了一种遗传工程化的造血干细胞(hspc)，其包含遗传工程化的kit基因，其中遗传工程化的kit基因被工程化使得其经编码的蛋白质与治疗抗kit抗体的结合降低。在一个实施方案中，遗传工程化的kit基因包含kit基因的外显子7中的至少一个突变。在一个实施方案中，遗传工程化的kit基因的外显子7中的至少一个突变导致在位置h378处带有突变的多肽。在一个实施方案中，在位置h378处的突变是h378r。在一个实施方案中，治疗抗kit抗体是抗kit克隆fab79d抗体。在一个实施方案中，遗传工程化的hspc是使用包含引导核酸和核酸酶的crispr系统进行遗传工程化的。在一个实施方案中，引导核酸选自由seq id no：36、seq id no：37、seq id no：38和seq id no：39组成的组。在一个实施方案中，核酸酶是与碱基编辑器酶连接的催化受损的spcas9。在一个实施方案中，其中碱基编辑器酶是核苷酸脱氨酶。在一个实施方案中，碱基编辑器酶是胞嘧啶脱氨酶或腺苷脱氨酶。在一个实施方案中，催化受损的spcas9是ng-spcas9或spry-spcas9。在一个实施方案中，催化受损的spcas9包含在位置d10a处的突变。在一个实施方案中，spcas9还包含在位置k918n处的突变。还提供了遗传工程化的造血干细胞(hspc)群，其包含如上所述的遗传工程化的hspc。还提供了一种治疗造血系统恶性肿瘤的方法，所述方法包括向人受试者施用：(a)如上所述的遗传工程化的造血干细胞群，和(b)治疗有效量的包含有抗kit抗体结合结构域或包含抗kit结合结构域的抗体或抗体片段的至少一种剂。在一个实施方案中，至少一种剂包含有包含抗kit抗体结合结构域的嵌合抗原受体-t(car-t)细胞。在一个实施方案中，造血系统恶性肿瘤是b淋巴母细胞白血病(bll)、急性髓系白血病(aml)或t急性淋巴母细胞白血病(t-all)。在一个实施方案中，所述方法还包括从来自人受试者的生物样品中获得hspc以及对来自人受试者的生物样品中的hspc进行遗传工程化，从而形成遗传工程化的hspc群。在一个实施方案中，生物样品是骨髓细胞、血液、脐带血细胞、或动员的外周血衍生的cd34+造血干细胞和祖细胞。

6、在一些实施方案中，还提供了一种遗传工程化的造血干细胞(hspc)群，其包含：(i)遗传工程化的kit基因，其中遗传工程化的kit基因编码与治疗抗kit抗体的结合降低的蛋白质，和(ii)遗传工程化的cd123基因，其中遗传工程化的cd123基因编码与治疗抗cd123抗体的结合降低的蛋白质。在一个实施方案中，遗传工程化的kit基因包含kit基因的外显子7中的至少一个突变。在一个实施方案中，遗传工程化的kit基因的外显子7中的至少一个突变导致在位置h378处带有突变的多肽。在一个实施方案中，遗传工程化的cd123基因包含cd123基因的外显子2中的至少一个突变。在一个实施方案中，遗传工程化的cd123基因的外显子2中的至少一个突变导致在位置s59处带有突变的多肽。在一个实施方案中，治疗抗kit抗体是抗kit克隆fab79d抗体。在一个实施方案中，治疗抗cd123抗体是抗cd123克隆7g3抗体或csl362抗体。在一个实施方案中，使用包含至少两种引导核酸和一种核酸酶的crispr系统对hspc群进行遗传工程化。在一个实施方案中，至少两种引导核酸是1)seq id no：36、seq id no：37、seq id no：38或seq id no：39和2)seq id no：24或seq id no：27。在一个实施方案中，至少两种引导核酸是seq id no：37和seq id no：27。在一个实施方案中，核酸酶是与碱基编辑器酶连接的催化受损的spcas9。在一个实施方案中，碱基编辑器酶是核苷酸脱氨酶。在一个实施方案中，碱基编辑器酶是胞嘧啶脱氨酶或腺苷脱氨酶。在一个实施方案中，催化受损的spcas9是ng-spcas9或spry-spcas9。在一个实施方案中，催化受损的spcas9包含在位置d10a处的突变。在一个实施方案中，spcas9还包含在位置k918n处的突变。还提供了一种治疗造血系统恶性肿瘤的方法，所述方法包括向人受试者施用：(a)如上所述的hspc群，和(b)治疗有效量的至少一种剂，其包含以下中的一者或两者：(1)抗kit抗体结合结构域或包含抗kit结合结构域的抗体或抗体片段，和/或(2)抗cd123抗体结合结构域或包含抗cd123结合结构域的抗体或抗体片段。在一个实施方案中，至少一种剂包含有包含抗kit抗体结合结构域和/或抗cd123抗体结合结构域的嵌合抗原受体-t(car-t)细胞。在一个实施方案中，造血系统恶性肿瘤是b淋巴母细胞白血病(bll)、急性髓系白血病(aml)、t细胞急性淋巴母细胞白血病(t-all)或母细胞性浆细胞样树突状细胞白血病(bpcdn)。在一个实施方案中，所述方法还包括从来自人受试者的生物样品中获得hspc以及对来自人受试者的生物样品中的hspc进行遗传工程化，从而形成遗传工程化的hspc群。在一个实施方案中，生物样品是骨髓细胞、血液、脐带血细胞、或动员的外周血衍生的cd34+造血干细胞和祖细胞。

7、本文还提供了一种遗传工程化的造血干细胞(hspc)群，其包含：(i)遗传工程化的flt3基因，其中遗传工程化的flt3基因编码与治疗抗flt3抗体的结合降低的蛋白质，和(ii)遗传工程化的kit基因，其中遗传工程化的kit基因编码与治疗抗kit抗体的结合降低的蛋白质。在一个实施方案中，遗传工程化的flt3基因包含flt3基因的外显子9中的至少一个突变。在一个实施方案中，遗传工程化的flt3基因的外显子9中的至少一个突变导致在位置n399处带有突变的多肽。在一个实施方案中，遗传工程化的kit基因包含kit基因的外显子7中的至少一个突变。在一个实施方案中，遗传工程化的kit基因的外显子7中的至少一个突变导致在位置h378处带有突变的多肽。在一个实施方案中，治疗抗flt3抗体是抗flt3克隆4g8抗体。在一个实施方案中，治疗抗kit抗体是抗kit克隆fab79d抗体。在一个实施方案中，使用包含至少两种引导核酸和一种核酸酶的crispr系统对hspc群进行遗传工程化。在一个实施方案中，至少两种引导核酸是1)seq id no：18或seq id no：20和2)seq id no：36、seq id no：37，seq id no：38或seq id no：39。在一个实施方案中，至少两种引导核酸是seq id no：20和seq id no：37。在一个实施方案中，核酸酶是与碱基编辑器酶连接的催化受损的spcas9。在一个实施方案中，碱基编辑器酶是核苷酸脱氨酶。在一个实施方案中，碱基编辑器酶是胞嘧啶脱氨酶或腺苷脱氨酶。在一个实施方案中，催化受损的spcas9是ng-spcas9或spry-spcas9。在一个实施方案中，催化受损的spcas9包含在位置d10a处的突变。在一个实施方案中，spcas9还包含在位置k918n处的突变。还提供了一种治疗造血系统恶性肿瘤的方法，所述方法包括向人受试者施用：(a)如上所述的hspc群，和(b)治疗有效量的至少一种剂，其包含以下中的一者或两者：(1)抗flt3抗体结合结构域或包含抗flt3结合结构域的抗体或抗体片段，和/或(2)抗kit抗体结合结构域或包含抗kit结合结构域的抗体或抗体片段。在一个实施方案中，至少一种剂包含有包含抗flt3抗体结合结构域和/或抗kit抗体结合结构域的嵌合抗原受体-t(car-t)细胞。在一个实施方案中，造血系统恶性肿瘤是b淋巴母细胞白血病(bll)、急性髓系白血病(aml)、t细胞急性淋巴母细胞白血病(t-all)或母细胞性浆细胞样树突状细胞白血病(bpcdn)。在一个实施方案中，所述方法还包括从来自人受试者的生物样品中获得hspc以及对来自人受试者的生物样品中的hspc进行遗传工程化，从而形成遗传工程化的hspc群。在一个实施方案中，生物样品是骨髓细胞、血液、脐带血细胞、或动员的外周血衍生的cd34+造血干细胞和祖细胞。

8、在一些实施方案中，还提供了一种包含多肽的嵌合抗原受体(car)，所述多肽包含：(a)与一个或多个细胞表面谱系特异性蛋白的表位结合的一个或多个表位结合片段、(b)铰链结构域、(c)跨膜结构域、(d)共刺激结构域，和(e)细胞质信号传导结构域，其中一个或多个细胞表面谱系特异性蛋白选自flt3、cd123和/或kit。

9、在一些实施方案中，细胞表面谱系特异性蛋白是flt3，并且car包含氨基酸序列seq id no：73。在一些实施方案中，细胞表面谱系特异性蛋白是flt3，并且一个或多个表位结合片段包括来自seq id no：73的一个或多个表位结合片段。在一些实施方案中，细胞表面谱系特异性蛋白是flt3，并且一个或多个表位结合片段包含以下cdr序列：gytftsywmh(seq id no：96)、eidpsdsykdynqkfk(seq id no：97)、raitttpfdf(seq id no：98)、rasqsisnnlh(seq id no：99)、yasqsis(seq id no：100)和qqsntwpyt(seq id no：101)。在一些实施方案中，细胞表面谱系特异性蛋白是cd123，并且car包含氨基酸序列seq id no：75、seq id no：86或seq id no：87。在一些实施方案中，细胞表面谱系特异性蛋白是cd123，并且一个或多个表位结合片段包括来自seq id no：75、seq id no：86或seq id no：87的一个或多个表位结合片段。在一些实施方案中，细胞表面谱系特异性蛋白是cd123，并且一个或多个表位结合片段包含以下cdr序列：gysftdyymk(seq id no：104)、diipsngatfynqkfkg(seq id no：105)、arshllraswfay(seq id no：106)、sqsllnsgnqknylt(seq id no：107)、wastres(seq id no：108)和qndysypyt(seq id no：109)。在一些实施方案中，细胞表面谱系特异性蛋白是cd123，并且一个或多个表位结合片段包含以下cdr序列：diipsngatfynqkfkg(seq id no：105)、sqsllnsgnqknylt(seq id no：107)、wastres(seqid no：108)和qndysypyt(seq id no：109)。在一些实施方案中，细胞表面谱系特异性蛋白是kit，并且car包含氨基酸序列seq id no：69或seq id no：71。在一些实施方案中，细胞表面谱系特异性蛋白是kit，并且一个或多个表位结合片段包括来自seq id no：69或seq idno：71的一个或多个表位结合片段。在一些实施方案中，细胞表面谱系特异性蛋白是kit，并且一个或多个表位结合片段包含以下cdr序列：gfnisvymmh(seq id no：88)、siypysgytyyadsvkg(seq id no：89)、aryvyhaldy(seq id no：90)、rasqrglrnvava(seq idno：91)、sasslys(seq id no：92)和qqwavhslit(seq id no：93)。在一些实施方案中，一个或多个细胞表面谱系特异性蛋白是flt3和cd123，并且car包含氨基酸序列seq id no：77或seq id no：79。在一些实施方案中，一个或多个细胞表面谱系特异性蛋白是flt3和cd123，并且一个或多个表位结合片段包括来自seq id no：77或seq id no：79的一个或多个表位结合片段。在一些实施方案中，一个或多个细胞表面谱系特异性蛋白是flt3和cd123，并且一个或多个表位结合片段包含以下cdr序列：gytftsywmh(seq id no：96)、eidpsdsykdynqkfk(seq id no：97)、raitttpfdf(seq id no：98)、rasqsisnnlh(seq idno：99)、yasqsis(seq id no：100)、qqsntwpyt(seq id no：101)、gysftdyymk(seq id no：104)、diipsngatfynqkfkg(seq id no：105)、arshllraswfay(seq id no：106)、sqsllnsgnqknylt(seq id no：107)、wastres(seq id no：108)和qndysypyt(seq id no：109)。在上述任何car的一些实施方案中，铰链结构域是cd28铰链、igg4铰链或cd8α铰链。在上述任何car的一些实施方案中，跨膜结构域是cd28 tm、cd8α tm或4-1bb tm。在上述任何car的一些实施方案中，共刺激结构域是cd28z、4-1bb、icos或ox40。在上述任何car的一些实施方案中，其中细胞质信号传导结构域是cd3z。

10、本文还提供了表达任何上述car的细胞。在一些实施方案中，所述细胞是免疫细胞。在一些实施方案中，所述免疫细胞是t细胞。

11、本文还提供了一种治疗造血系统恶性肿瘤的方法，所述方法包括向人受试者施用：(a)遗传工程化的造血干细胞群(诸如上述那些中的任一种)，和(b)表达任何上述car的细胞(诸如免疫细胞)。

12、本文还提供了一种包含与seq id no：51中所示的序列至少80％同一的多肽序列的多肽序列，其中多肽序列包含在n399d处的突变，并且其中多肽序列与治疗抗flt3抗体的结合降低。

13、本文还提供了一种包含与seq id no：52中所示的序列至少80％同一的多肽序列的多肽序列，其中多肽序列包含在n399g处的突变，并且其中多肽序列与治疗抗flt3抗体的结合降低。

14、本文还提供了一种包含与seq id no：54中所示的序列至少80％同一的多肽序列的多肽序列，其中多肽序列包含在s59p处的突变，并且其中多肽序列与治疗抗cd123抗体的结合降低。

15、本文还提供了一种包含与seq id no：55中所示的序列至少80％同一的多肽序列的多肽序列，其中多肽序列包含在y58h和s59p处的突变，并且其中多肽序列与治疗抗cd123抗体的结合降低。

16、本文还提供了一种包含与seq id no：56中所示的序列至少80％同一的多肽序列的多肽序列，其中多肽序列包含在s59f处的突变，并且其中多肽序列与治疗抗cd123抗体的结合降低。

17、本文还提供了一种包含与seq id no：57中所示的序列至少80％同一的多肽序列的多肽序列，其中多肽序列包含在p88s处的突变，并且其中多肽序列与治疗抗cd123抗体的结合降低。

18、本文还提供了一种包含与seq id no：58中所示的序列至少80％同一的多肽序列的多肽序列，其中多肽序列包含在p88l处的突变，并且其中多肽序列与治疗抗cd123抗体的结合降低。

19、本文还提供了一种包含与seq id no：67中所示的序列至少80％同一的多肽序列的多肽序列，其中多肽序列包含在f316s、m318v、i319k、v323i、i334v、e360k、p363v、e366d、e376q和h378r处的突变，并且其中多肽序列与治疗抗kit抗体的结合降低。

20、本文还提供了一种包含与seq id no：68中所示的序列至少80％同一的多肽序列的多肽序列，其中多肽序列包含在h378r处的突变，并且其中多肽序列与治疗抗kit抗体的结合降低。

21、本文还提供了编码任何上述多肽的核酸。

22、除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。本文描述了用于本发明的方法和材料；也可以使用本领域已知的其他适合的方法和材料。所述材料、方法和实例仅是说明性的而不是旨在限制。本文提到的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其他参考文献均通过引用整体并入。如有冲突，以本说明书(包括定义)为准。

23、本发明的其他特征和优势将从以下具体实施方式和附图以及权利要求书中显而易见。