一种抑制PNO1基因表达的核酸分子及相关产品和用途

本发明属于生物医药，具体涉及一种抑制pno1基因表达的核酸分子及相关产品和用途。

背景技术：

1、高血压是全球普遍存在的慢性非传染性疾病，是心血管疾病的主要危险因素之一，严重影响着人类的健康安全。据世界卫生组织的数据，在过去30年中，全球30～79岁高血压患者人数从6.5亿增加到12.8亿。我国高血压患病率也呈上升趋势，最新疾病预防控制中心显示我国患病人数2.45亿，随着国内老龄化的到来，对高血压的防治工作也提出了巨大挑战。长期持续的高血压状态会对肾、心、脑等靶器官产生严重损害。高血压防控亟待寻找更加安全、有效的防治策略。

2、nob1同源物的伴侣(pno1)是一种高度保守的蛋白质，其c末端有一个k同源(kh)结构域，n末端有两个假定的核定位信号。pno1基因定位于人类染色体2p14区域，基因组序列约为18kb，其在核糖体生物发生和促进核糖体小亚基的成熟过程中发挥重要作用。pno1编码生成的一种核仁蛋白是20srrna到18srrna成熟所需的六个组装因子之一，它与nob1直接结合并增强nob1对rna的亲和力，驱动nob1在前体18srrna的3’端切割，pno1的缺失导致18srrna的减少和前40s核糖体亚单位的组装失调，而核糖体生物合成过程失衡与肿瘤密切相关。

3、申请人课题组在前期研究中发现敲入pno1导致小鼠的血压升高、心脏射血分数降低、心脏短轴缩短、腹主动脉血管壁厚度增厚、腹主动脉脉冲波传播速度升高、肠系膜动脉的阻力指数升高、肠系膜动脉搏动指数升高、肾动脉的阻力指数升高、肾动脉的搏动指数升高，并pno1敲入在ang ii诱导高血压小鼠后的血压升高幅度更明显，并基于pno1敲入构建了高血压小鼠模型。因此，抑制pno1表达可成为预防和治疗高血压疾病的重要途径。

4、目前已有多种rnai药物处于研发阶段或已获批上市，且显示出很好的治疗效果，研制针对高血压靶基因表达的rnai药物已成为治疗这类疾病的重要途径。

技术实现思路

1、鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种抑制pno1基因表达的核酸分子及相关产品和用途，进而解决现有技术中的问题。

2、为实现上述目的及其他相关目的，本发明是通过以下技术方案获得的。

3、本发明的第一方面保护一种用于抑制pno1基因表达的核酸分子，所述核酸分子包含双链rna或shrna，所述双链rna或shrna含有能够与pno1基因杂交的核苷酸序列，所述双链rna或shrna的靶序列包含seq id no：1～3任一项所示序列。

4、本发明的第二方面保护一种核酸构建体，含有编码如上文所述核酸分子的核苷酸。

5、本发明的第三方面保护一种病毒颗粒，由如上文所述核酸构建体感染宿主细胞后包装获得。

6、本发明的第四方面保护一种细胞，包含如上文所述核酸构建体或基因组中整合有编码如上文所述核酸分子的核苷酸。

7、本发明的第五方面保护如上文所述核酸分子；和/或，如上文所述核酸构建体；和/或，如上文所述病毒颗粒；和/或，如上文所述细胞的用途，所述用途包含a1)-a2)中的至少一项为：a1)用于制备预防或治疗高血压的药物；a2)用于制备抑制细胞中pno1基因表达的产品。

8、本发明的第六方面保护一种用于预防或治疗高血压的组合物，其有效物质含有：如上文所述核酸分子；和/或，如上文所述核酸构建体；和/或，如上文所述病毒颗粒；和/或，如上文所述细胞，以及药学上可接受的载体或辅料。

9、本发明的技术方案具有以下有益效果：

10、1)本申请针对目的基因pno1设计了合适的rnai靶点序列，通过合成oligo dna双链序列，并构建了包含上述oligo dna双链序列的慢病毒载体；慢病毒可有效降低目的基因pno1的mrna、蛋白表达量，敲减作用非常明显。

11、2)本申请进一步将包含shrna的核酸构建体包装成腺相关病毒，将其给予shr大鼠后发现，能显著降低腹主动脉的收缩压、舒张压、平均动脉压、脉冲波传播速度、血管壁厚度，从而可以起到预防和/或治疗高血压以及改善高血压所致的血管功能降低或血管壁增厚的症状的效果，可用于治疗高血压的药物中。

1.一种抑制pno1基因表达的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包含双链rna或shrna，所述双链rna或shrna含有能够与pno1基因杂交的核苷酸序列，所述双链rna或shrna的靶序列包含seq id no：1～3任一项所示序列。

2.如权利要求1所述核酸分子，其特征在于，所述双链rna包含第一链和第二链，所述第一链和所述第二链互补共同形成rna二聚体，编码所述第一链的核苷酸序列包含seq idno：1～3任一项所示序列；

3.如权利要求2所述核酸分子，其特征在于，所述双链rna为sirna。

4.一种核酸构建体，其特征在于，含有编码如权利要求1-3任一项所述核酸分子的核苷酸。

5.如权利要求4所述核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体为病毒载体，所述病毒载体选自慢病毒载体、腺相关病毒载体和腺病毒载体中的一种或多种。

6.一种病毒颗粒，其特征在于，由如权利要求4或5所述核酸构建体感染宿主细胞后包装获得。

7.一种细胞，其特征在于，包含如权利要求4或5所述核酸构建体或基因组中整合有编码如权利要求1-3任一项所述核酸分子的核苷酸。

8.如权利要求1-3任一项所述的核酸分子；和/或，如权利要求4或5所述核酸构建体；和/或，如权利要求6所述病毒颗粒；和/或，如权利要求7所述细胞的用途，所述用途包含a1)-a2)中的至少一项：a1)用于制备预防或治疗高血压的药物；a2)用于制备抑制细胞中pno1基因表达的产品。

9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述药物具有如下功效之一项或多项：

10.一种用于预防或治疗高血压的组合物，其特征在于，其有效物质含有：如权利要求1-3任一项所述核酸分子；和/或，如权利要求4或5所述核酸构建体；和/或，如权利要求6所述病毒颗粒；和/或，如权利要求7所述细胞，以及药学上可接受的载体或辅料。