一种华西牛骨骼肌相关环状RNAcircCOQ3及其应用

本发明属于动物学，尤其涉及一种华西牛骨骼肌相关环状rna circcoq3及其应用。

背景技术：

1、“华西牛”是拥有产业核心竞争力和国际市场竞争力的专门化肉牛新品种，具有生长速度快，屠宰率、净肉率高，繁殖性能好，抗逆性强等特点，且具有较高的市场份额。在肉牛生产中，生长发育速度是最为重要的经济性状之一。骨骼肌是机体最重要的组成部分，骨骼肌的生长发育直接影响牛肉的产量和质量。因此，探究华西牛骨骼肌发育规律，解析调控其发育的分子机制，将为肉牛品种改良提供理论支持和技术支撑，推动畜牧业高质量发展。

2、骨骼肌作为机体的重要组成部分，在维持机体平衡和基础代谢方面起着关键作用。骨骼肌的生成在出生后依赖于肌发生，是一个高度协调的过程，包括多电位中胚层细胞的确定、成肌细胞的增殖和迁移、肌细胞融合成多核肌纤维以及肌纤维的成熟。这一过程受多基因控制，如mrfs(myogenic regulator factors)、mef2(myocyte enhance factor 2)、和pax(paired box)基因家族等。同时，非编码rna(ncrnas)，如micrornas(mirnas)、longnoncoding rnas(lncrnas)和circular rna(circrna)被认为是骨骼肌发育和再生的重要调控因子。目前，研究人员在不同的牛品种中鉴定到了大量调控骨骼肌生长发育的circrna，并解析了部分circrna调控肌肉发育的分子机制。值得注意的是，不同品种间调控肌肉生长发育的circrna不尽相同，存在一定的品种特异性。华西牛作为我国自主培育的肉牛新品种，以其为素材开展circrna调控肌肉发育的研究鲜有报道。因此，探索华西牛肌肉发育中的差异表达的circrna将为华西牛的生物育种提供新的靶点。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种华西牛骨骼肌相关环状rna circcoq3及其应用。，从而为华西牛的生物育种提供新的靶点。为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

2、首先，本发明提供了一种与华西牛骨骼肌发育相关的环状rna，所述环状rna为circcoq3，所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq id no.2所示。

3、其次，本发明提供了检测环状rna circcoq3表达的引物在制备检测华西牛骨骼肌发育阶段的试剂盒中的应用，所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq id no.2所示；

4、所述引物的序列如seq id no.3和seq id no.4所示。

5、优选地，所述华西牛骨骼肌为华西牛背最长肌。

6、优选地，初生华西牛的骨骼肌中环状rna circcoq3的表达水平最高，成年华西牛的骨骼肌中环状rna circcoq3的表达水平最低。

7、其次，本发明提供了干扰环状rna circcoq3表达的抑制剂在制备华西牛骨骼肌改良育种调节剂中的应用，所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq id no.2所示。

8、优选地，所述抑制剂为sirna，所述sirna的正义链序列如seq id no.11所示，所述sirna的反义链如seq id no.12所示。

9、优选地，所述抑制剂通过调控华西牛骨骼肌细胞的增殖来调节华西牛骨骼肌改良育种。

10、其次，本发明提供了干扰环状rna circcoq3表达的抑制剂在制备抑制华西牛骨骼肌细胞增殖的抑制剂中的应用，所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq id no.2所示；

11、所述抑制剂为sirna，所述sirna的正义链序列如seq id no.11所示，所述sirna的反义链如seq id no.12所示。

12、其次，本发明提供了干扰环状rna circcoq3表达的抑制剂在制备调节华西牛骨骼肌细胞的细胞周期的制剂中的应用，所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq id no.2所示；

13、所述抑制剂为sirna，所述sirna的正义链序列如seq id no.11所示，所述sirna的反义链如seq id no.12所示；

14、所述细胞周期抑制剂导致细胞周期抑制基因cdkn1a明显上调，细胞周期促进基因cyclin d1和pcna明显下调。

15、其次，本发明提供了一种抑制华西牛骨骼肌细胞增殖的方法，所述方法包括如下步骤：

16、(1)将华西牛骨骼肌细胞接种到细胞培养装置中，置于细胞培养箱中，培养至贴壁；

17、(2)将环状rna circcoq3的sirna转染到细胞中，置于细胞培养箱中继续培养，即可实现抑制华西牛骨骼肌细胞增殖；

18、所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq id no.2所示；

19、所述sirna的正义链序列如seq id no.11所示，所述sirna的反义链如seq idno.12所示。

20、本发明的有益效果在于：

21、本发明成功鉴定出来源于coq3基因的华西牛环状rna circcoq3，为骨骼肌发育研究提供了创新性靶点，推动肉牛品种的改良。功能研究表明，circcoq3能有效调控牛骨骼肌细胞的增殖，干扰circcoq3将显著降低牛骨骼肌原代细胞的增殖效率。这一发现为调控华西牛骨骼肌细胞的增殖及细胞周期提供了新的研究方向，并为育种调节剂的研发开辟了新思路。同时，本发明为circcoq3在提升华西牛的牛肉品质中的应用提供了坚实的理论基础，使其在肉牛生物育种中成为潜在的新靶点。

1.一种与华西牛骨骼肌发育相关的环状rna，其特征在于，所述环状rna为circcoq3，所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq idno.2所示。

2.检测环状rna circcoq3表达的引物在制备检测华西牛骨骼肌发育阶段的试剂盒中的应用，其特征在于，所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq id no.2所示；

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述华西牛骨骼肌为华西牛背最长肌。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，初生华西牛的骨骼肌中环状rna circcoq3的表达水平最高，成年华西牛的骨骼肌中环状rna circcoq3的表达水平最低。

5.干扰环状rna circcoq3表达的抑制剂在制备华西牛骨骼肌改良育种调节剂中的应用，其特征在于，所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq id no.2所示。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述抑制剂为sirna，所述sirna的正义链序列如seq id no.11所示，所述sirna的反义链如seq id no.12所示。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述抑制剂通过调控华西牛骨骼肌细胞的增殖来调节华西牛骨骼肌改良育种。

8.干扰环状rna circcoq3表达的抑制剂在制备抑制华西牛骨骼肌细胞增殖的抑制剂中的应用，其特征在于，所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq id no.2所示；

9.干扰环状rna circcoq3表达的抑制剂在制备调节华西牛骨骼肌细胞的细胞周期的制剂中的应用，其特征在于，所述circcoq3的转录本序列如seq id no.1所示，所述circcoq3的连接基因序列如seq id no.2所示；

10.一种抑制华西牛骨骼肌细胞增殖的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：