一种母液糖中甜菊糖苷的分离方法和甜味剂与流程

本发明涉及食品添加剂制备，特别涉及一种母液糖中甜菊糖苷的分离方法和一种甜味剂。

背景技术：

1、甜菊糖苷是从菊科草本植物甜叶菊中提取的天然甜味剂，它具有高甜度、低热量的功能特点，甜菊糖拥有多种单体，莱鲍迪苷f(rebaudioside-f，rf)与杜克苷a(dukeside-a，da)是甜菊糖中含量较低的两种单体，其中莱鲍迪苷f(rebaudioside-f，rf)的口感是蔗糖的200-300倍，杜克苷a(dukeside-a，da)的甜度是蔗糖的200-300倍。

2、溶剂浸提是目前商业甜菊糖提取的主要工艺，该工艺最后经过结晶回收高纯度莱鲍迪苷a(ra)和甜菊苷(st)之后，剩余母液通常经过喷干后成为粉末固体，称为母液糖(mls)，一般作为低价甜味剂销售。母液糖中含有约60％的甜菊糖苷和一些残余的多酚、黄酮类杂质。因甜菊糖提取的原料不同，提取的方法不同，母液糖中单苷的含量也有不同，提取的方法和难点也略有不同。

3、现有的针对母液糖中甜菊糖苷的分离提纯的方法主要有高速逆流色谱(hsccc)、制备色谱法和大孔吸附树脂吸附法。莱鲍迪苷a(rebaudioside-a)、甜菊苷(st)、莱鲍迪苷c(rebaudioside-c)等单苷在母液糖中含量较高，属于常见苷，其分离研究较为深入；除此类单苷之外的苷含量较少，比如莱鲍迪苷f(2-6％)与杜克苷a(1-2％)，现有技术中并未记载如何有效从母液糖中分离得到rf和da的方法。

4、因此，现有技术中亟待寻求一种从母液糖中将各单苷有效分离，尤其是从母液糖中分离得到rf和da的方法。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种母液糖中甜菊糖苷的分离方法和甜味剂，用于从母液糖中将包括rf和da在内的各单苷分离，填补现有技术中没有针对母液糖中rf和da分离的技术空白，同时提供一种具备增甜增香特质的复配型甜味剂。

2、为了实现上述目的，本发明提供一种母液糖中甜菊糖苷的分离方法，包括以下步骤：

3、将母液糖加入结晶溶液1中，经第一结晶并过滤得到结晶滤饼1和结晶母液1；

4、将所述结晶母液1经大孔吸附树脂进行吸附；

5、将所述吸附后的大孔吸附树脂依次经多级乙醇溶液进行梯度洗脱，收集得到前段洗脱液、中段洗脱液和后段洗脱液；

6、将所述中段洗脱液加入结晶溶液2中，经第二结晶并过滤得到结晶滤饼2和结晶母液2；

7、将所述结晶母液2经正相硅胶填料进行吸附；

8、将所述吸附后的正相硅胶填料经洗脱溶剂进行洗脱，分段收集得到da富集段、rf富集段、stv富集段和ra与rc混合富集段。

9、本发明公开一种母液糖中甜菊糖苷的分离方法，包括以下步骤：将母液糖溶解并结晶，得到的结晶母液经大孔树脂吸附，吸附后的树脂经多级乙醇溶液梯度洗脱，取中段洗脱液进行结晶，所得结晶母液经正相填料吸附，吸附后的正相填料经洗脱溶剂洗脱，分段收集得到da富集段、rf富集段、stv富集段和ra与rc混合富集段。本发明先将母液糖进行溶解并结晶，去除部分stv与ra得到结晶母液；得到的结晶母液经大孔树脂吸附，吸附后的树脂经多级乙醇溶液梯度洗脱，利用树脂的层析作用，进一步去除部分杂质以及其他非必要苷成分，实现待提取苷的进一步富集；洗脱后取中段洗脱液进行结晶，进一步去除部分rc，所得结晶母液经正相填料吸附，正相硅胶填料表面可以键合-oh，-nh或-sh官能团，利用各单苷与官能团之间相互作用力的大小造成的在吸附柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离；将吸附后的正相填料经洗脱溶剂洗脱，分段收集得到da富集段、rf富集段、stv富集段和ra与rc混合富集段，再经正相硅胶填料吸附后，本发明对该填料进行等度或梯度洗脱，利用洗脱剂极性的调整和分子筛作用，从而实现了母液糖中甜菊糖苷单苷的分离，尤其是将含量较低的rf和da进行了有效的提纯和分离；本发明还包括将上述分离得到的ra与rc混合富集段进一步用于制备甜味剂，ra和rc的搭配掩盖了ra的苦涩味与甘草味，发挥了rc增甜增香的特质，得到了的甜味剂具备增甜增香特质，为母液糖的利用提供了新的技术途径。实验结果表明，采用本发明所述分离方法得到的da富集段中da含量可达69-75％，rf富集段中rf含量可达79-85％，stv富集段中stv含量可达79-85％，ra和rc富集段中ra含量可达34-45％，rc含量可达37-45％。

1.一种母液糖中甜菊糖苷的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述母液糖与结晶溶液1的用量比为1：(1.5-2.5)(w/v)；和/或，

3.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述结晶母液1的进料量为所述大孔吸附树脂体积的5-15％；和/或，

4.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述依次经多级乙醇溶液进行梯度洗脱包括：依次经三级乙醇溶液进行梯度洗脱；其中每级所述乙醇溶液的体积分数在[30％,70％]范围内逐渐升高；和/或，

5.根据权利要求1或4所述的分离方法，其特征在于，所述收集得到前段洗脱液、中段洗脱液和后段洗脱液包括：按洗脱顺序，依次收集每级所述乙醇溶液的洗脱液，先后得到前段洗脱液、中段洗脱液和后段洗脱液。

6.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述中段洗脱液与结晶溶液2的用量比为1：(1.5-2.5)(v/v)；和/或，

7.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述结晶母液2的进料量为所述正相硅胶填料体积的5-10％。

8.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述将所述吸附后的正相硅胶填料经洗脱溶剂进行洗脱，分段收集得到da富集段、rf富集段、stv富集段和ra与rc混合富集段包括：

9.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述将所述吸附后的正相硅胶填料经洗脱溶剂进行洗脱，分段收集得到da富集段、rf富集段、stv富集段和ra与rc混合富集段包括：

10.一种甜味剂，包含根据权利要求1-9中任一项分离方法制备得到的ra与rc混合富集段，其中ra与rc的质量比为(1-6)：1。