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一种基于自动荧光定量PCR算法的TaqMan探针法检测多种病原性真菌的方法与流程

2025-09-22 16:40:06 591次浏览

技术特征:

1.一种基于自动荧光定量pcr算法的taqman探针法检测多种病原性真菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.一种同时鉴定多种病原性真菌的引物和探针组合,其特征在于,所述引物包括:

3.一种同时鉴定多种病原性真菌的检测试剂,其特征在于,包括如权利要求2所述的引物和探针组合。

4.一种同时鉴定多种病原性真菌的检测试剂盒,其特征在于,包括如权利要求2所述的引物和探针组合。

5.根据权利要求4所述的同时鉴定多种病原性真菌的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中包括taqman探针法qpcr扩增反应体系:

6.根据权利要求5所述的同时鉴定多种病原性真菌的检测试剂盒,其特征在于,所述正向引物f1、反向引物r1和探针probe 1-mgb的浓度均为10pmol/μl。

7.如权利要求5所述的同时鉴定多种病原性真菌的检测试剂盒的应用,其特征在于,包括以下步骤:

8.根据权利要求7所述的同时鉴定多种病原性真菌的检测试剂盒的应用,其特征在于,所述(11)中的样本包括痰液样本、肺泡灌洗液样本和临床分离的真菌中的一种或者多种。

9.根据权利要求7所述的同时鉴定多种病原性真菌的检测试剂盒的应用,其特征在于,所述(2)taqman探针法qpcr扩增反应包括以下步骤:

10.根据权利要求7所述的同时鉴定多种病原性真菌的检测试剂盒的应用,其特征在于,


技术总结
本发明属于病原菌检测领域,具体公开了一种基于自动荧光定量PCR算法的TaqMan探针法检测多种病原性真菌的方法;并公开了用于检测的引物和探针的组合,其中所述引物包括:正向引物F1:5’‑GCGCGYTACACTGACRGRGC‑3’和反向引物R1:5’‑ACCTTGTTACGACTTTTASTTCCTCTAAATGACC‑3’;所述探针为Probe 1‑MGB:5’6‑FAM‑TCGTGCTGGGGATAGAGCAT‑MGB 3’;使用本发明所述的方法,结合本发明的引物和探针组合再结合算法,能在较短时间内(2~3小时)鉴定待测样本中是否存在病原性真菌,以及可能的真菌细胞数量;灵敏度高,最低可检测出10个菌/ml;特异性好,较少出现假阳性情况,检测的病原性真菌覆盖范围广,具有良好的应用前景。

技术研发人员:梁笑辉,虞文魁,王妍
受保护的技术使用者:南京鼓楼医院
技术研发日:
技术公布日:2024/11/28
文档序号 : 【 40164144 】

技术研发人员:梁笑辉,虞文魁,王妍
技术所有人:南京鼓楼医院

备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
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梁笑辉虞文魁王妍南京鼓楼医院
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