一株具有缓解塑化剂毒性作用的肠膜明串珠菌及其应用

本发明属于塑化剂毒性作用缓解菌株及生物制剂，具体涉及一株具有缓解塑化剂毒性作用的肠膜明串珠菌及其应用。

背景技术：

1、随着产业化进程加速，塑化剂的市场需求不断增加，被广泛用于塑料添加剂、家用产品、食品包装等。邻苯二甲酸二丁酯(dibutylphthalate，dbp)是塑化剂的一种，也是食品中常见的污染物，可以从被污染食品、食品包装材料中通过消化道、皮肤等途径进入人体，对人体健康产生影响。长期处在邻苯二甲酸二丁酯暴露的环境下会产生氧化损伤、神经毒性、肝脏毒性、生殖毒性和胚胎毒性等危害。因此，如何促进体内邻苯二甲酸二丁酯的排出，减少因邻苯二甲酸二丁酯引起的损伤成为研究热点。

2、乳酸菌是一组可以将乳糖发酵成乳酸的革兰氏阳性微生物，具有促进动物生长、调节肠道菌群、改善胃肠道功能、提高食物消化率和生物效价等益生功能。肠膜明串珠菌作为乳酸菌中明串珠菌属的重要菌种，不仅能发酵糖类产生多种酸和醇，还有高产酸、抗氧化和拮抗致病菌等能力。肠膜明串珠菌可以定植于小鼠肠道中，且对邻苯二甲酸二丁酯具有较好的吸附效果。因此，采用肠膜明串珠菌来缓解邻苯二甲酸二丁酯引起的生物毒性具有可行性，对调节人体肠道菌群，清除塑化剂有害物质，维持机体健康具有重大意义，目前尚没有该方面的相关报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一株具有缓解塑化剂毒性作用的肠膜明串珠菌及其应用，其中肠膜明串珠菌dm12可以较长时间定植在肠道，具有良好的益生特性，能够吸附邻苯二甲酸二丁酯等塑化剂，促进邻苯二甲酸二丁酯等塑化剂随粪便排出，从而预防或缓解因邻苯二甲酸二丁酯等塑化剂在体内积累过多而引起的机体损伤，对维持宿主健康具有重要意义。

2、本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案：一株具有缓解塑化剂毒性作用的肠膜明串珠菌，其分类命名为肠膜明串珠菌leuconostocmesenteroides，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：cgmccno.30178。

3、进一步地，所述肠膜明串珠菌从泡菜中分离纯化获得，其16srdna序列如序列表中seq id no.1所示。

4、进一步地，所述肠膜明串珠菌能够在mrs琼脂培养基上生长，该肠膜明串珠菌为革兰氏阳性菌，菌落形态呈圆形，表面光滑，乳白色，最适生长温度为37℃，培养时间为12h。

5、本发明所述的肠膜明串珠菌在制备预防或缓解由塑化剂引起生物毒性的生物制剂中的应用，该肠膜明串珠菌能够在体内长时间定植，用于吸附体内塑化剂，促进体内塑化剂排出，减少塑化剂在体内的蓄积，进而缓解塑化剂的生物毒性。

6、进一步地，所述肠膜明串珠菌能够促进塑化剂从体内排出，减少血清中塑化剂的含量，显著减轻塑化剂对生殖器官和肝脏的损害，用于修复塑化剂引起的机体损伤。

7、进一步地，所述塑化剂为邻苯二甲酸二丁酯(di-butyl phthalate，dbp)、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate，dehp)、邻苯二甲酸二甲酯(dimethyl phthalate，dmp)、邻苯二甲酸二异丁酯(diisobutyl phthalate，dibp)、邻苯二甲酸二辛酯(dioctyl phthalate，dop)、邻苯二甲酸丁苄酯(benzyl butyl phthalate，bbp)；邻苯二甲酸二异壬酯(diisononyl phthalate，dinp)或邻苯二甲酸二乙酯(di-ethylphthalate，dep)中的一种或多种。

8、进一步地，所述塑化剂从食品中摄取。

9、进一步地，所述肠膜明串珠菌有效作用的邻苯二甲酸二丁酯剂量为6mg/kg/d。

10、进一步地，所述肠膜明串珠菌使用的活菌数为5×1011cfu/ml。

11、一种益生菌制剂，该益生菌制剂中包含上述肠膜明串珠菌的活菌和/或其发酵产物。

12、进一步地，所述益生菌制剂中还包含嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、嗜热链球菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳酪杆菌、唾液乳杆菌、柠檬明串珠菌、短乳杆菌、长双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、短双歧杆菌、两歧双歧杆菌、凝结芽孢杆菌、乳球菌、卷曲乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、干酪乳酪杆菌、戊糖片球菌、保加利亚乳杆菌、格氏乳杆菌或嗜热链球菌中的一种或多种。

13、本发明具有以下优点和有益效果：

14、本发明以肠膜明串珠菌dm12为研究对象，将实验动物暴露于低剂量的邻苯二甲酸二丁酯，构建小鼠模型，并进行干预治疗，旨在为益生菌的应用以及预防和缓解人体内因塑化剂等有害物质引起的生物毒性而提供新思路。结果显示：本发明提供的肠膜明串珠菌dm12可以使小鼠的体重恢复正常水平，促进邻苯二甲酸二丁酯随粪便的排出(排出率为43.1％)，减少在体内的蓄积，从而缓解邻苯二甲酸二丁酯引起的小鼠生殖器官和肝脏毒性。本发明筛选的肠膜明串珠菌dm12是一株安全且能够有效缓解塑化剂暴露引起的生物毒性，具有较高的研究价值和应用价值。

1.一株具有缓解塑化剂毒性作用的肠膜明串珠菌，其特征在于：其分类命名为肠膜明串珠菌leuconostoc mesenteroides，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：cgmcc no.30178。

2. 根据权利要求1所述的具有缓解塑化剂毒性作用的肠膜明串珠菌，其特征在于：所述肠膜明串珠菌从泡菜中分离纯化获得，其16s rdna序列如序列表中seq id no.1所示。

3.根据权利要求1所述的具有缓解塑化剂毒性作用的肠膜明串珠菌，其特征在于：所述肠膜明串珠菌能够在mrs琼脂培养基上生长，该肠膜明串珠菌为革兰氏阳性菌，菌落形态呈圆形，表面光滑，乳白色，最适生长温度为37℃，培养时间为12h。

4.权利要求1-3中任意一项所述的肠膜明串珠菌在制备预防或缓解由塑化剂引起生物毒性的生物制剂中的应用，该肠膜明串珠菌能够在体内长时间定植，用于吸附体内塑化剂，促进体内塑化剂排出，减少塑化剂在体内的蓄积，进而缓解塑化剂的生物毒性。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述肠膜明串珠菌能够促进塑化剂从体内排出，减少血清中塑化剂的含量，显著减轻塑化剂对生殖器官和肝脏的损害，用于修复塑化剂引起的机体损伤。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述塑化剂为邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二辛酯、邻苯二甲酸丁苄酯；邻苯二甲酸二异壬酯或邻苯二甲酸二乙酯中的一种或多种。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述塑化剂从食品中摄取。

8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述肠膜明串珠菌有效作用的邻苯二甲酸二丁酯剂量为6mg/kg/d；所述肠膜明串珠菌使用的活菌数为5×1011cfu/ml。

9.一种益生菌制剂，其特征在于：该益生菌制剂中包含权利要求1-3中任意一项所述的肠膜明串珠菌的活菌和/或其发酵产物。

10.根据权利要求9所述的益生菌制剂，其特征在于：所述益生菌制剂中还包含嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、嗜热链球菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳酪杆菌、唾液乳杆菌、柠檬明串珠菌、短乳杆菌、长双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、短双歧杆菌、两歧双歧杆菌、凝结芽孢杆菌、乳球菌、卷曲乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、干酪乳酪杆菌、戊糖片球菌、保加利亚乳杆菌、格氏乳杆菌或嗜热链球菌中的一种或多种。