功能性环肽及其制备方法及应用与流程

本发明属于环肽的合成及应用，具体涉及功能性环肽及其制备方法及应用。

背景技术：

1、多肽是由氨基酸通过脱水缩合组成的，这些氨基酸本身都带有羧基和氨基，一般都是亲水性化合物，其组成的多肽一般都具有明显的亲水性和离子性，尤其是一些小分子多肽由于无毒、易被皮肤吸收、吸收后所具有的特殊生理活性作用，能由表及里在本质上改善皮肤的某些问题，现已被广泛应用于美容化妆品配方中。目前市面上具有各种各样的化妆品或护肤品，但大多数护肤品只添加某一类功效的多肽作为护肤品的功效活性物，因此皮肤获得的效果较单一，且见效慢；再者，目前市面上的大部分以多肽为活性功效物的护肤品，都是将多肽或者多肽原液直接添加在常规护肤品基质中，基于对整个配方的制作和稳定性考虑，多肽的添加量会受到局限。

2、在常规的多肽修饰中，都会采用棕榈酰修饰或者是肉豆蔻等修饰的方法来完成，这种用棕榈酰来修饰或肉豆蔻来修饰的多肽一般都会具有亲水性和亲油性，往往在分离纯化过程中会大大增加溶剂的耗用，增加成本。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种保湿效果好、抗皱效果好、紧致效果好、舒缓效果好、抑制神经递质释放效果好、美白效果好的功能性环肽及其制备方法及应用。

2、采用多肽环化的方式，将线性多肽进行环化，从而得到环化后的多肽。而这种多肽的环化就将本属于多肽的羧基和氨基脱水缩合形成了新的酰胺键，增加了多肽的脂溶性，又不会明显的增加溶剂耗用。环化的多肽相对比线性肽具有更好的稳定性，同时，将羧基和氨基或羟基进行缩合，得到的多肽具有更好的脂溶性，具备更好的皮肤渗透性。

3、本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

4、功能性环肽在保湿产品和/或抗皱产品和/或紧致产品和/或舒缓产品和/或抑制神经递质释放产品和/或美白产品和/或抗糖化产品和/或抗氧化产品中的用途，功能性环肽具有下式结构：

5、，其中，1≤n，rm的数目为n个，r1、r2、r3或rm选自h、脂肪烃、取代脂肪烃、芳基、取代芳基、咪唑基、取代咪唑基、吲哚基、取代吲哚基、胍基、取代胍基、金属烷基或与邻近氮原子形成环状结构的烷基。

6、优选地，n≤6；或，1≤n≤6；或，n=2；或，n=3；或，n=4；或，n=5。

7、优选地，r1、r2、r3和rm中任2个以上的基团相同；或，r1、r2、r3和rm中任意相邻的基团相同；当r1、r2、r3或rm选自-ch2-ch2-ch2-基团时，r1、r2、r3或rm与相邻的n相连而成环；或，r1、r2、r3或rm选自氢原子基团、甲基、-ch2-ch2-ch2-基团、丙基、丁基、羟甲基、羟乙基、乙酰胺基、丙酰胺基、ch3-s-ch2-ch2-基团、hs-ch2-基团、ph-ch2-基团、对羟苯甲基、乙酸基、丙酸基、se-ch2-基团、丁胺基、吲哚基、咪唑甲基和取代胍基中任1种。

8、优选地，功能性环肽为如下任一种：

9、。

10、功能性环肽的制备方法，包括：将线性肽与环化试剂混合于溶剂中进行环化反应，后处理制备得到功能性环肽；功能性环肽具有下式结构：

11、，其中，1≤n，rm的数目为n个，r1、r2、r3或rm选自h、脂肪烃、取代脂肪烃、芳基、取代芳基、咪唑基、取代咪唑基、吲哚基、取代吲哚基、胍基、取代胍基、金属烷基或与邻近氮原子形成环状结构的烷基。

12、优选地，功能性环肽为如下任一种：

13、。

14、优选地，线性肽的制备方法为固相合成法；或，环化试剂为hbtu；或，溶剂为dmf、dcm和diea中至少1种；或，后处理包括环化后处理、切割处理和切割后处理。

15、更优选地，环化后处理中，向环化反应完成的试液中加入冰水或dcm，分离得到具有保护基团的环肽；或，切割处理中的切割液包括e液或f液，e液由tfa、茴香硫醚、edt、phoh和水混合而成，tfa、茴香硫醚、edt、phoh和水以体积比为75-95：2-10：1-5：1-5：1-5的比例混合，f液由tfa、tis和水混合而成，tfa、tis和水以体积比为80-96：2-10：2-10的比例混合；或，切割后处理中，将切割处理完成的试液加入冰乙醚中，分离纯化得到功能性环肽。

16、更优选地，后处理中包括液相色谱法纯化功能性环肽；或，环化反应中，将线性肽加入溶剂中混合得到线性肽溶液，然后将线性肽溶液与环化试剂混合，在30-50℃下进行环化反应；或，后处理中，环化反应完成后，进行环化后处理，得到具有保护基团的环肽，加入切割液处理，最后进行切割后处理，得到环肽。

17、更优选地，环化后处理中，向环化反应完成的试液中加入冰水，析出固体，搅拌过滤，固体采用ea溶解，然后依次采用饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，得到具有保护基团的环肽；或，环化后处理中，向环化反应完成的试液中加入dcm，分层萃取，然后依次采用饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，得到具有保护基团的环肽；或，切割后处理中，将切割处理完成的试液加入冰乙醚中，析出固体，离心洗涤，固体蒸干，纯化，得到环肽；或，环化反应中采用lc-ms监测；或，溶剂为dmf、dcm和diea中至少1种，溶剂以其中dmf为计量基准，线性肽与dmf的使用量的关系为0.1-30mg/ml。

18、优选地，氨基酸活化液的制备中，将氨基酸试剂和hobt混合，在2-8℃的温度下加入dmf和dic，静置反应10-30min，得到氨基酸活化液。

19、更优选地，氨基酸活化液的制备中，hobt的使用摩尔量为氨基酸试剂的使用摩尔量的50-200%。

20、更优选地，氨基酸活化液的制备中，dic的使用摩尔量为氨基酸试剂的使用摩尔量的50-200%，dmf与氨基酸试剂的使用量的关系为0.1-4.5ml/mmol。

21、更优选地，氨基酸活化液的制备中，氨基酸试剂包括如下试剂中任1种：fmoc-pro-oh、fmoc-tyr（tbu）-oh、fmoc-phe-oh、fmoc-lys（boc）-oh、fmoc-val-oh、fmoc-asp（otbu）-oh、fmoc-ser（tbu）-oh、fmoc-thr（tbu）-oh、fmoc-arg（pbf）-oh、fmoc-met-oh、fmoc-glu（otbu）-oh、fmoc-gln（trt）-oh、fmoc-ala-oh、fmoc-d-trp（boc）-oh、fmoc-d-phe-oh。

22、优选地，线性肽的制备中，将首个氨基酸试剂与ctc树脂混合，然后加入二氯甲烷（dcm）和diea，在20-40℃下反应2-5h，然后加入甲醇，反应3-30min，反应完成后过滤，洗涤，加入脱保护液处理；依次按线性肽的顺序将氨基酸活化液与键合首个氨基酸的ctc树脂混合，反应0.5-3h，每次氨基酸活化液反应后脱保护液处理，最后一个氨基酸试剂反应完后，加入切割液处理，得到线性肽。

23、更优选地，线性肽的制备中，ctc树脂中总取代度为取代度与ctc树脂质量的积，即总取代度为ctc树脂的总活性反应位点的摩尔量，首个氨基酸试剂的使用摩尔量为ctc树脂中总取代度的50-250%。

24、更优选地，线性肽的制备中，二氯甲烷与首个氨基酸试剂的使用量的关系为1-65ml/mmol。

25、更优选地，线性肽的制备中，diea与首个氨基酸试剂的使用量的关系为0.1-5ml/mmol。

26、更优选地，线性肽的制备中，甲醇与首个氨基酸试剂的使用量的关系为0.1-6.5ml/mmol。

27、更优选地，线性肽的制备中，氨基酸活化液的使用量以其中氨基酸试剂的摩尔量为计量基准，则氨基酸试剂的使用摩尔量为ctc树脂中总取代度的100-350%。

28、更优选地，线性肽的制备中，首个氨基酸试剂包括如下任1种：fmoc-pro-oh、fmoc-tyr（tbu）-oh、fmoc-ser（tbu）-oh、fmoc-arg（pbf）-oh、fmoc-met-oh。脱保护液为10-30%pip/dmf溶液。切割液为30%tfe/dcm溶液。

29、线性肽包括h-phe-phe-tyr（tbu）-pro-oh、h-asp（otbu）-val-lys（boc）-tyr（tbu）-oh、h-lys（boc）-thr（tbu）-thr（tbu）-lys（boc）-ser（tbu）-oh、h-arg（pbf）-lys（boc）-asp（otbu）-val-tyr（tbu）-oh、h-thr（tbu）-ser（tbu）-val-val-val-arg（pbf）-oh、h-gln（trt）-arg（pbf）-arg（pbf）-glu（otbu）-glu（otbu）-met-oh、h-gln（trt）-arg（pbf）-arg（pbf）-ala-glu（otbu）-glu（otbu）-met-oh、h-gln（trt）-arg（pbf）-arg（pbf）-ala-asp（otbu）-glu（otbu）-glu（otbu）-met-oh和h-val-met-pro-{d-phe}-arg（pbf）-{d-trp}（boc）-phe-lys（boc）-pro-oh中任1种。

30、更优选地，线性肽的制备中，首个氨基酸与ctc树脂反应后的洗涤中，依次采用二氯甲烷（dcm）、甲醇和dmf洗涤。

31、更优选地，线性肽的制备中，按环肽的线性肽的顺序加入氨基酸活化液反应时，在每次氨基酸活化液反应后洗涤中，采用dmf洗涤。

32、更优选地，线性肽的制备中，脱保护液处理中，将键合氨基酸试剂后的ctc树脂采用dmf洗涤，然后加入脱保护液，搅拌处理10-60min，处理完成后抽滤除去脱保护液，dmf洗涤，抽干。脱保护液适量使用。

33、更优选地，线性肽的制备中，切割液处理中，将切割液加入键合完氨基酸试剂的ctc树脂中，在20-40℃下处理0.5-5h，处理完成后过滤，除去树脂，得到滤液，滤液拉干得到线性肽。切割液适量使用。

34、优选地，环肽的制备中，将线性肽加入溶剂中混合得到线性肽溶液，然后将线性肽溶液与环化试剂混合，在30-50℃下反应，lc-ms监测反应，反应完成后，进行环化后处理，得到具有保护基团的环肽，加入切割液处理，最后进行切割后处理，得到环肽。

35、更优选地，环肽的制备中，溶剂含有dmf，还可含有dcm和diea中至少1种，溶剂以其中dmf为计量基准，线性肽与dmf的使用量的关系为0.1-30mg/ml，dcm与dmf的使用量的关系为0.1-10ml/ml，diea与dmf的使用量的关系为0.1-5mg/ml，切割液为e液或f液，切割液适量使用。环化试剂为hbtu，hbtu与dmf的使用量的关系为0.1-5mg/ml。

36、更优选地，环肽的制备中，e液由tfa、茴香硫醚、edt、phoh和水混合而成，tfa、茴香硫醚、edt、phoh和水以体积比为87.5：5：2.5：2.5：2.5的比例混合。

37、更优选地，环肽的制备中，f液由tfa、tis和水，tfa、tis和水以体积比为90：5：5的比例混合；pr100、

38、优选地，环化后处理中，将dmf拉干，并向环化反应完成的试液中加入冰水，析出固体，搅拌过滤，固体采用ea溶解，然后依次采用饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，得到具有保护基团的环肽。

39、优选地，环化后处理中，将dmf拉干，向环化反应完成的试液中加入dcm，分层萃取，然后依次采用饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干，得到具有保护基团的环肽。

40、优选地，切割后处理中，将切割处理完成的试液加入冰乙醚中，析出固体，离心洗涤，固体蒸干，纯化，得到环肽。

41、纯化采用液相色谱法。

42、本发明由于采用了氨基酸试剂经活化后制备得到含有保护基的线性肽，然后通过环化处理制备、切割处理得到具有环状结构的功能性环肽，因而具有如下有益效果：本发明制备得到的功能性环肽的保湿效果好、抗皱效果好、紧致效果好、舒缓效果好、抑制神经递质释放效果好、美白效果好、抗糖化效果好、抗氧化效果好。因此，本发明是一种保湿效果好、抗皱效果好、紧致效果好、舒缓效果好、抑制神经递质释放效果好、美白效果好的功能性环肽及其制备方法及应用。