一种控制结直肠癌细胞基因组由MSS转变为MSI的分子开关、抑制剂及其应用

本发明属于生物，特别涉及一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为msi的分子开关、抑制剂及其应用。

背景技术：

1、结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一，其发病率逐年增高。由于结直肠癌起病隐匿，近一半的患者初诊时已处于中晚期，治疗手段有限、效果不佳。错配修复系统(mmr)对于基因组的稳定性十分重要，如果编码错配修复系统主要蛋白msh6,msh2,pms2,mlh1的基因发生突变，将导致微卫星不稳定(msi)的发生。近年来，以免疫检查点抑制剂为代表的免疫靶向治疗对于具有高度微卫星不稳定或者错配修复基因缺陷(dmmr)的晚期结直肠癌患者而言，可以获得相对较好的疗效。但在晚期癌症患者的体内，具有错配修复基因缺陷的患者仅约5％，95％的晚期癌症患者均为微卫星稳定分型(mss)，该类患者的免疫靶向治疗效果不佳。因此，如何将微卫星稳定的“冷肿瘤”变为免疫应答型“热肿瘤”一直是基础医学研究和药物转化研究的热点。目前大量的研究集中于改变结直肠肿瘤微环境和增加肿瘤免疫浸润以提高对免疫治疗的响应，仍未找到控制mss转变为msi的分子开关。

技术实现思路

1、为了诱导结直肠癌细胞基因组由mss转变为msi，本发明提供了一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为msi的分子开关，通过对所述分子开关进行抑制，或使所述分子开关失活，能够诱导结直肠癌细胞基因组发生微卫星不稳定，进而提升结直肠癌免疫靶向治疗的疗效，为结直肠癌的治疗提供一种新的选择。

2、本发明还提供了一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为msi的分子开关的抑制剂及其应用。

3、本发明通过以下技术方案实现：

4、本发明提供一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为msi的分子开关，所述分子开关包括tead蛋白或yap/taz-tead复合体蛋白。

5、基于同一发明构思，本发明提供一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为ms i的分子开关的抑制剂，所述抑制剂包括以下a～e中的至少一种：

6、a.抑制yap/taz蛋白和tead蛋白结合的试剂；

7、b.诱导yap蛋白与tead蛋白间产生变构作用的试剂；

8、c.yap/taz蛋白拮抗剂；

9、d.对tead蛋白进行棕榈酰化修饰的试剂；

10、e.对yap1基因、wwtr1/taz基因和tead基因中的任意一种进行rna干扰的分子试剂，或对yap1基因、wwtr1/taz基因和tead基因中的任意一种进行基因敲除或敲低的分子试剂。

11、可选的，所述对yap1基因、wwtr1/taz基因和tead基因进行rna干扰的分子试剂包括1)～4)中的至少一种：

12、1)靶向yap1基因、wwtr1/taz基因和tead基因中的任意一种的shrna；

13、2)靶向yap1基因、wwtr1/taz基因和tead基因中的任意一种的s irna；

14、3)靶向yap1基因、wwtr1/taz基因和tead基因中的任意一种的mirna；

15、4)靶向递送1)～3)中任意一项的脂质体或外泌体纳米颗粒；

16、所述对yap1基因、wwtr1/taz基因和tead基因中的任意一种进行基因敲除或敲低的分子试剂包括靶向yap1基因、wwtr1/taz基因和teads基因中的任意一种基因序列设计的基因编辑药物，包括但不限于crisper。

17、基于同一发明构思，本发明提供一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为ms i的分子开关的抑制剂在诱导结直肠癌细胞基因组发生微卫星不稳定中的应用。

18、基于同一发明构思，本发明提供一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为ms i的分子开关的抑制剂在抑制错配修复蛋白表达中的应用。

19、进一步的，所述错配修复蛋白包括msh6、msh2、pms2和mlh1中的至少一种。

20、基于同一发明构思，本发明提供一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为ms i的分子开关的抑制剂在增加肿瘤细胞突变负荷或增加肿瘤细胞新抗原负荷中的应用。

21、基于同一发明构思，本发明提供一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为ms i的分子开关的抑制剂在制备诱导结直肠癌细胞基因组发生微卫星不稳定的药物中的应用。

22、基于同一发明构思，本发明提供一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为ms i的分子开关的抑制剂在制备治疗结直肠癌药物中的应用。

23、基于同一发明构思，本发明提供一种控制结直肠癌细胞发生微卫星不稳定的药物，所述药物的有效成分包括上述一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为msi的分子开关的抑制剂。

24、基于同一发明构思，本发明提供一种治疗结直肠癌的药物，所述药物的有效成分包括上述一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为msi的分子开关的抑制剂。

25、基于同一发明构思，本发明提供一种控制结直肠癌细胞基因组发生微卫星不稳定的方法，所述方法包括抑制上述一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为msi的分子开关的表达，和/或抑制yap/taz蛋白与tead蛋白的结合。

26、进一步的，所述方法包括以下a～e中的至少一种：

27、a.抑制yap/taz蛋白和tead蛋白结合；

28、b.诱导yap蛋白与tead蛋白间产生变构作用；

29、c.通过拮抗剂阻断yap蛋白与taz蛋白结合；

30、d.对tead蛋白进行棕榈酰化修饰；

31、e.对yap1基因、wwtr1/taz基因和tead基因中的任意一种进行rna干扰，或对yap1基因、wwtr1/taz基因和tead基因中的任意一种进行基因敲除或敲低。

32、本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：

33、1.本发明一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为msi的分子开关，包括tead蛋白或yap/taz-tead复合体蛋白，通过对所述分子开关进行抑制，或使所述分子开关失活，能够诱导结直肠癌细胞基因组发生微卫星不稳定，基因组不稳定可在结直肠癌细胞中累积大量突变，促进肿瘤新抗原的产生，进而提升结直肠癌免疫靶向治疗的疗效，为临床上微卫星稳定人群的结直肠癌治疗提供新的选择。

34、2.本发明一种控制结直肠癌细胞基因组由mss转变为msi的分子开关的抑制剂在诱导结直肠癌细胞基因组发生微卫星不稳定中的应用，本发明以小鼠结直肠癌细胞系ct26为研究对象，通过分子生物学手段敲除tead1/4基因，或者采用靶向yap/taz-tead的抑制剂处理，可将结直肠癌细胞基因组微卫星稳定状态转变为微卫星不稳定状态，诱导发生微卫星不稳定的肿瘤细胞表现出错配修复蛋白表达降低，突变负荷增加和新抗原负荷增加，该应用能够提高肿瘤细胞突变频率，刺激肿瘤新生抗原肽的产生，实现从无法响应免疫治疗的“冷”肿瘤细胞到“热”肿瘤细胞的变身，为针对微卫星稳定消化道肿瘤药物研发以及临床靶向yap/taz-tead联合免疫治疗的微卫星稳定肿瘤治疗策略提供理论基础。