靶向免疫相关病症的抗BCMACAR、组合物及其方法与流程

1.一种嵌合抗原受体(car)分子，所述car包含：

2.根据权利要求1所述的car分子，其中所述至少一个靶结合结构域包含：(i)至少一个靶识别元件；和/或(ii)至少一种衔接子组分，所述至少一种衔接子组分识别并结合至少一种标记的靶识别元件。

3.根据权利要求1和2中任一项所述的car分子，其中所述靶识别结构域和/或元件包含对所述bcma或其任何抗原结合片段、部分或嵌合体具有特异性的至少一种抗体。

4.根据权利要求3所述的car分子，其中所述抗体的所述抗原结合片段、部分或嵌合体包含单链可变片段(scfv)和/或纳米抗体中的至少一者。

5.根据权利要求3至4中任一项所述的car分子，其中所述抗体特异性地识别并结合bcma蛋白或其任何片段，所述抗体包含免疫球蛋白重链(hc)和免疫球蛋白轻链(lc)，所述免疫球蛋白重链包含如seq id no:3所示的氨基酸序列及其任何衍生物和变体，所述免疫球蛋白轻链包含如seq id no:5所示的氨基酸序列及其任何衍生物和变体。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的car分子，其中所述至少一个靶结合结构域包含如seq id no:11所示的氨基酸序列及其任何变体和衍生物。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的car分子，其中所述铰链结构域和所述跨膜结构域包含如seq id no:6所示的氨基酸序列，及其任何变体和衍生物。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的car分子，其中以下项中的至少一者：所述至少一种肿瘤坏死因子(tnf)受体家族成员为4-1bb，并且其中所述tcr分子包含分化簇3(cd3)ζ链。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的car分子，其中所述至少一个细胞内t细胞信号转导结构域包含如seq id no:12所示的氨基酸序列及其任何衍生物和变体。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的car分子，其中所述car包含如seq id no:1所示的氨基酸序列，及其任何变体和衍生物。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的car分子，其中由t谱系的至少一个细胞表达所述car导致以下项中的至少一者：(i)增加的特异性；(ii)减少的强直信号传导；(iii)减少的脱靶活化；(iv)响应于特定刺激的增加的活化标记物表达；和(v)在体内和/或体外/离体环境中，响应于特定刺激的减少的耗竭标记物表达。

12.一种包含编码至少一种car分子的至少一种核酸序列的核酸分子，

13.根据权利要求12所述的核酸分子，其中所述car分子根据权利要求2至11中任一项所述。

14.根据权利要求12至13中任一项所述的核酸分子，其中所述核酸分子通过以下项中的至少一者侧接在其5'和3'末端中的至少一个末端:(i)同源臂，用于通过同源重组整合至基因组靶位点；和/或(ii)位点特异性核酸酶、位点特异性整合酶或位点特异性重组酶的识别位点。

15.一种基因编辑系统，所述基因编辑系统包含：

16.一种表达至少一种car分子的t细胞谱系的基因工程化细胞，或包含至少一种所述经基因修饰的细胞的任何细胞群体，所述car包含:

17.根据权利要求16所述的基因工程化细胞，其中所述car分子根据权利要求1至11中任一项所述。

18.根据权利要求16至17中任一项所述的基因工程化细胞，其中所述t谱系的所述细胞是至少一种t细胞和/或至少一种nk t细胞。

19.一种组合物，所述组合物包含以下项中的至少一者：至少一种car分子、包含编码所述car分子的至少一种核酸序列的任何核酸分子、或包含所述核酸分子的任何盒、载体、媒介物或基因编辑系统、和/或表达所述car的所述t谱系的任何基因工程化细胞或包含所述t谱系的至少一种所述基因工程化细胞的细胞群体以及它们的任何组合，所述car包含：

20.根据权利要求19所述的组合物，其中所述car分子根据权利要求1至11中任一项所述，所述核酸分子根据权利要求12至14中任一项所述，所述基因编辑系统根据权利要求15所述，并且所述细胞根据权利要求16至18中任一项所述。

21.一种用于治疗、预防、改善、抑制或延迟哺乳动物受试者中免疫相关病症的发作的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的以下项中的至少一者的步骤：

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述至少一个靶结合结构域包含：(i)至少一个靶识别元件；和/或(ii)至少一种衔接子组分，所述至少一种衔接子组分识别并结合至少一种标记的靶识别元件。

23.根据权利要求21和22中任一项所述的方法，其中所述靶识别结构域和/或元件包含对所述bcma或其任何抗原结合片段、部分或嵌合体具有特异性的至少一种抗体。

24.根据权利要求23所述的方法，其中所述抗体的所述抗原结合片段、部分或嵌合体包含scfv和/或纳米抗体中的至少一者。

25.根据权利要求23至24中任一项所述的方法，其中所述抗体特异性地识别并结合所述bcma蛋白，所述抗体包含免疫球蛋白hc和免疫球蛋白lc，所述免疫球蛋白hc包含如seqid no:3所示的氨基酸序列及其任何衍生物和变体，所述免疫球蛋白lc包含如seq id no:5所示的氨基酸序列及其任何衍生物和变体。

26.根据权利要求21至25中任一项所述的方法，其中所述至少一个靶结合结构域包含如seq id no:11所示的氨基酸序列，及其任何衍生物和变体。

27.根据权利要求21至26中任一项所述的方法，其中所述铰链结构域和所述跨膜结构域包含如seq id no:6所示的氨基酸序列，及其任何衍生物和变体。

28.根据权利要求21至27中任一项所述的方法，其中所述至少一个tnf受体家族成员是4-1bb，并且其中所述tcr分子包含cd3ζ链。

29.根据权利要求21至28中任一项所述的方法，其中所述至少一个细胞内t细胞信号转导结构域包含如seq id no:12所示的氨基酸序列。

30.根据权利要求21至29中任一项所述的方法，其中所述car包含如seq id no:1所示的氨基酸序列，或其任何变体和衍生物。

31.根据权利要求21至30中任一项所述的方法，其中由所述受试者的t谱系的至少一个细胞表达所述car导致以下项中的至少一者：(i)增加的特异性；(ii)减少的强直信号传导；(iii)减少的脱靶活化；

32.根据权利要求21至31中任一项所述的方法，其中所述核酸分子根据权利要求12至14中任一项所述，所述基因编辑系统根据权利要求15所述，所述细胞根据权利要求16至18中任一项所述，并且所述组合物根据权利要求19至20中任一项所述。

33.根据权利要求21至32中任一项所述的方法，其中向所述受试者施用表达所述car分子的所述t谱系的至少一个细胞，并且/或者所述受试者用所述至少一个核酸盒或包含所述盒的任何载体或媒介物或用所述细胞群体进行遗传工程化改造。

34.根据权利要求33所述的方法，其中所述细胞来自自体或同种异体来源。

35.根据权利要求21至32中任一项所述的方法，其中向所述受试者施用包含所述至少一个盒的核酸载体，所述载体是病毒载体、非病毒载体和裸dna载体中的任一者。

36.根据权利要求35所述的方法，其中将编码所述car的所述核酸序列插入到所述受试者的所述t谱系的细胞的基因组中是由位点特异性核酸酶介导的，所述核酸酶是至少一种pen，其中所述pen包含至少一种crispr/cas蛋白系统，并且其中所述方法还包括向所述受试者施用以下项中的至少一者的步骤：

37.根据权利要求21至36中任一项所述的方法，其中所述免疫相关病症是与b谱系的细胞中所述bcma蛋白的表达相关联的病症。

38.根据权利要求37所述的方法，其中所述病症是以下项中的至少一者：至少一种增殖性病症和/或至少一种自身免疫性疾病、沉积病症或任何b细胞介导的病症。

39.根据权利要求38所述的方法，其中所述增殖性病症是任何b细胞恶性肿瘤。

40.根据权利要求39所述的方法，其中所述b细胞恶性肿瘤是多发性骨髓瘤(mm)和任何相关病况。

41.根据权利要求37所述的方法，其中所述沉积病症为淀粉样变性病和任何相关病况。

42.用于在治疗、预防、改善、抑制或延迟哺乳动物受试者中免疫相关病症的发作的方法中使用的治疗有效量的以下项中的至少一者：

43.根据权利要求42所述的用于使用的有效量，其中所述car根据权利要求1至11中任一项所述，所述核酸分子根据权利要求12至14中任一项所述，所述基因编辑系统根据权利要求15所述，所述细胞根据权利要求16至18中任一项所述，并且所述组合物根据权利要求19至20中任一项所述。

44.一种针对表达所述bcma蛋白的靶细胞和/或包含所述靶细胞的组织靶向活化所述t谱系的细胞的方法，所述方法包括将所述t谱系的所述细胞与有效量的以下项中的至少一者接触的步骤：

45.根据权利要求44所述的方法，其中将所述t谱系的所述细胞与所述至少一个核酸盒接触的所述步骤在体内、体外或离体进行。

46.根据权利要求45所述的方法，其中使t谱系的所述细胞与所述至少一种核酸盒接触是在患有至少一种免疫相关病症的受试者体内进行的，所述方法还包括向所述受试者施用有效量的所述核酸盒、包含所述核酸盒的载体、包含所述核酸分子的基因编辑系统或它们的任何组合物。

47.根据权利要求45所述的方法，其中将t谱系的所述细胞与所述至少一个核酸盒接触是在体外或离体进行的，以获得所述t谱系的基于工程化细胞或所述细胞群体。

48.根据权利要求47所述的方法，其中所述方法用于在患有免疫相关病症的受试者中针对表达所述bcma蛋白的靶细胞和/或包含所述靶细胞的组织靶向活化所述t谱系的细胞，并且其中所述方法还包括将所述基因工程化细胞引入所述受试者的步骤。

49.根据权利要求47至48中任一项所述的方法，其中所述t谱系的所述细胞来自自体或同种异体来源。

50.根据权利要求46至49中任一项所述的方法，其中所述病症为以下项中的至少一者：至少一种增殖性病症、至少一种沉积病症和/或至少一种自身免疫性疾病。

51.根据权利要求44至50中任一项所述的方法，其中所述car根据权利要求1至11中任一项所述，所述核酸分子根据权利要求12至14中任一项所述，所述基因编辑系统根据权利要求15所述，所述细胞根据权利要求16至8中任一项所述，并且所述组合物根据权利要求19至20中任一项所述。