一种生物碱类化合物在防治腹主动脉瘤中的研究及应用的制作方法

本发明涉及医药，尤其涉及一种生物碱类化合物在防治腹主动脉瘤中的研究及应用。

背景技术：

1、腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, aaa)是由于多种原因导致的主动脉直径不可逆地扩张，超过正常直径50%以上的一种主动脉扩张性疾病。在人体中，当主动脉直径(尤其是肾动脉分支以下的主动脉段的直径)>3cm时，可认为aaa发生，aaa是血管外科风险最高的血管退行性疾病之一。aaa发病隐匿，随着主动脉的不断扩张，瘤体不断变大，其破裂的风险也在逐渐增加；一旦破裂，其致死率高达80%。他汀类、血管紧张素转化酶抑制剂和血管紧张素ii受体拮抗剂等，可在一定程度上延缓aaa进展，但其确切疗效有待明确。迄今尚无明确适应症为aaa的药物出现，寻找aaa的防治新靶点和新的治疗药物，亟须深入探索和研究。

2、秋水仙碱是一种从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的中性亲脂性三环类生物碱，最早于1820年由pelletier和caventou首次粗提获得。1955年corrodi和hardegger揭示了秋水仙碱的化学结构，拓宽了其临床应用。美国食品药物管理局(america's food and drug administration, fda)先后批准秋水仙碱用于治疗家族性地中海热、痛风、关节炎和胆汁性肝硬化等。秋水仙碱主要通过抑制中性粒细胞和巨噬细胞功能，发挥抗炎和抑制免疫作用；同时通过阻断微管形成，抑制细胞有丝分裂，发挥抗纤维化作用。2023年fda发布公告：秋水仙碱0.5mg片剂可用于治疗已有动脉粥样硬化性疾病的患者，或有多个心血管危险因素的成年人。同时，欧洲预防心脏病学杂志的一项研究也表明，使用低剂量的秋水仙碱可使已接受降压和降脂药物治疗的患者获益。

3、研究发现：高血压、高血脂均是诱发aaa导致瘤体破裂的重要危险因素。但是目前尚无秋水仙碱用于治疗aaa的相关报道。

技术实现思路

1、1.要解决的技术问题

2、本发明的目的是为了解决现有技术中尚无秋水仙碱用于治疗aaa的问题，而提出的一种生物碱类化合物在防治腹主动脉瘤中的研究及应用。

3、2.技术方案

4、为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

5、一种生物碱类化合物，所述生物碱类化合物为秋水仙碱。

6、本发明中还提出了一种生物碱类化合物，在改善腹主动脉瘤病理损伤中的应用。

7、本发明中还提出了一种生物碱类化合物，在防治腹主动脉瘤中的应用。

8、本发明中还提出了一种生物碱类化合物，在制备腹主动脉瘤防治药物中的应用。

9、本发明中还提出了一种生物碱类化合物在防治腹主动脉瘤中的研究方法，包括以下步骤：

10、步骤1：先进行小鼠aaa造模，利用猪胰蛋白酶ppe孵育联合饮水给予富马酸氨基丙腈bapn诱导小鼠形成腹主动脉瘤；

11、步骤2：在小鼠aaa造模的同时，向小鼠腹腔注射0.1mg/kg秋水仙碱，其中秋水仙碱是在aaa造模的同时同步给予小鼠，一天腹腔注射一次，连续给予2周；

12、步骤3：在2周后分离小鼠腹主动脉，通过对血管he/evg/masson染色评估主动脉的扩张程度及损伤情况，具体方法为利用生物显微镜去除主动脉周围黏连组织，通过电子游标卡尺联合he染和image软件测量测量最大主动脉直径；

13、步骤4：最后检测小鼠腹主动脉组织，探究秋水仙碱改善小鼠aaa损伤的可能分子机制。

14、优选地，所述步骤1中小鼠aaa造模具体包括以下步骤：

15、s1：小鼠使用1%戊巴比妥钠溶液(40mg/kg)麻醉后，腹部朝上，固定在泡沫板上；使用75%的酒精消毒小鼠腹部及周围区域，使用灭菌后的剪刀和镊子轻轻剪开小鼠腹部皮肤，逐层开腹；使用棉签将小肠、大肠等轻轻拉出，放在浸泡过生理盐水的纱布条上；使用棉签和镊子轻轻游离小鼠腹主动脉，尤其是髂动脉以上，肾动脉分支以下的主动脉段；

16、s2：将提前剪好的化妆棉条浸泡于ppe溶液中，随后将其包裹在游离的主动脉组织上；孵育时间为40min，其中可10min补加一次约5μl的ppe溶液；

17、s3：待孵育时间结束后，取出化妆棉条，使用棉签沾取生理盐水后轻轻擦拭3次；逐层关腹、缝合小鼠，待其苏醒后放回动物房；

18、s4：给予小鼠0.4%的bapn饮用水，正常状态对照组为使用生理盐水孵育小鼠腹主动脉组，并给予不含bapn的饮用水，所有小鼠自由饮水、饮食，在饲养笼内自如活动或休息。

19、优选地，所述步骤4中通过western blot检测vsmcs表型相关蛋白和mmps的表达，通过免疫荧光染色分析血管壁中炎症因子和氧化应激水平的变化，通过流式细胞术检测血管壁外膜中炎性细胞的浸润情况。

20、3.有益效果

21、相比于现有技术，本发明的优点在于：

22、1.本发明中，首次提出具有明确抗炎作用的秋水仙碱，可通过抑制血管壁外膜炎性细胞浸润、抑制血管平滑肌细胞向合成型转化和基质金属蛋白酶的表达等方面来改善小鼠aaa损伤，有助于揭示临床常用药物秋水仙碱的新用途，为腹主动脉瘤的防治提供了新的干预策略和研发思路；

23、2.本发明中，证明了低剂量的秋水仙碱可通过抑制血管平滑肌细胞(vesselsmooth muscle cells, vsmcs)向合成型转化和基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase, mmps)的表达、降低血管壁炎症反应和氧化应激水平等发挥改善小鼠aaa病理损伤的作用；且经过进一步研究，发现秋水仙碱可能通过抑制血管外膜炎性细胞浸润来发挥血管保护作用。

1.一种生物碱类化合物，其特征在于，所述生物碱类化合物为秋水仙碱。

2.根据权利要求1所述的一种生物碱类化合物，其特征在于，在改善腹主动脉瘤病理损伤中的应用。

3.根据权利要求1所述的一种生物碱类化合物，其特征在于，在防治腹主动脉瘤中的应用。

4.根据权利要求1所述的一种生物碱类化合物，其特征在于，在制备腹主动脉瘤防治药物中的应用。

5.根据权利要求1所述的一种生物碱类化合物在防治腹主动脉瘤中的研究方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的一种生物碱类化合物在防治腹主动脉瘤中的研究方法，其特征在于，所述步骤1中小鼠aaa造模具体包括以下步骤：

7.根据权利要求5所述的一种生物碱类化合物在防治腹主动脉瘤中的研究方法，其特征在于，所述步骤4中通过western blot检测vsmcs表型相关蛋白和mmps的表达，通过免疫荧光染色分析血管壁中炎症因子和氧化应激水平的变化，通过流式细胞术检测血管壁外膜中炎性细胞的浸润情况。