一种猪子宫内膜间充质干细胞分离培养方法和应用

1.一种猪子宫内膜间充质干细胞分离培养方法，其特征在于，具体工艺过程包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的猪子宫内膜间充质干细胞分离培养方法，其特征在于，将p2-p3代的细胞加入不同的细胞诱导分化培养基，能够诱导其向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞分化。

3.根据权利要求1所述的猪子宫内膜间充质干细胞分离培养方法，其特征在于，步骤(1)中的无菌pbs中添加的氯化镁和氯化钙的浓度分别为1mm和0.5mm；消化酶中含有浓度为0.2％的ii型胶原酶和40μg/ml的i型脱氧核糖核酸酶。

4.根据权利要求1所述的猪子宫内膜间充质干细胞分离培养方法和应用，其特征在于，步骤(2)和(3)中的msc完全培养基为含有10％胎牛血清、1％双抗的msc基础培养基。

5.根据权利要求1所述的猪子宫内膜间充质干细胞分离培养方法和应用，其特征在于，步骤(3)中的培养条件是：温度37.0℃，5％co2饱和度。

6.根据权利要求1所述的猪子宫内膜间充质干细胞分离培养方法，其特征在于，步骤(4)中的传代培养的细胞接种浓度为0.5×104/cm2-1.5×104/cm2。

7.根据权利要求2所述的猪子宫内膜间充质干细胞分离培养方法和应用，其特征在于，细胞诱导分化为包括成骨分化、成软骨分化、成脂肪分化的间充质干细胞三系诱导分化。

8.根据权利要求4所述的猪子宫内膜间充质干细胞分离培养方法和应用，其特征在于，双抗为100u/ml的青霉素和100μg/ml的链霉素。

9.根据权利要求1、3-6和8中任一项所述的猪子宫内膜间充质干细胞分离培养方法，其特征在于，通过表面标记物鉴定，确定适用于鉴定猪子宫内膜间充质干细胞的抗体：cd44，cd34，cd105，cd11b。

10.一种猪子宫内膜间充质干细胞应用，其特征在于，修复宫腔粘连、皮肤及血管损伤细胞，包括卵巢早衰、子宫内膜损伤。