ApbC基因敲除的创伤弧菌菌株及其构建方法和应用

1.一种apbc基因敲除的创伤弧菌菌株，其特征在于，所述apbc基因敲除的创伤弧菌菌株中缺失apbc基因片段；

2.根据权利要求1所述的apbc基因敲除的创伤弧菌菌株，其特征在于，所述菌株fe-s蛋白合成缺陷。

3.一种apbc基因敲除的创伤弧菌菌株的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的apbc基因敲除的创伤弧菌菌株的构建方法，其特征在于，步骤s1中，apbc基因的上游序列带有酶切位点saci，apbc基因的下游序列带有酶切位点xhoi；

5.根据权利要求4所述的apbc基因敲除的创伤弧菌菌株的构建方法，其特征在于，所述步骤s2中，所述自杀质粒含有与所述apbc基因缺失的重叠片段相同的酶切位点，将双酶切后的所述apbc基因缺失的重叠片段与所述自杀质粒连接，获得重组自杀质粒。

6.根据权利要求3所述的apbc基因敲除的创伤弧菌菌株的构建方法，其特征在于，所述步骤s3中，利用热激穿孔进行所述重组自杀质粒转化。

7.根据权利要求3所述的apbc基因敲除的创伤弧菌菌株的构建方法，其特征在于，所述步骤s4中，通过氯霉素抗性和创伤弧菌自身的多粘菌素抗性进行第一轮筛选，获得第一重组菌落。

8.根据权利要求7所述的apbc基因敲除的创伤弧菌菌株的构建方法，其特征在于，利用含10μg/ml氯霉素和12.5μg/ml多粘菌素e的bhi血平板进行所述第一轮筛选。

9.根据权利要求7或8所述的apbc基因敲除的创伤弧菌菌株的构建方法，其特征在于，所述第二轮筛选具体过程如下：

10.一种apbc基因敲除的创伤弧菌菌株的应用，其特征在于，如权利要求1或2所述的apbc基因敲除的创伤弧菌菌株用于研究创伤弧菌中apbc基因的功能。