一种白桦BpSPL2基因在提高白桦耐旱能力中的应用

本发明属于分子生物学，尤其涉及一种白桦bpspl2基因在提高白桦耐旱能力中的应用。

背景技术：

1、spl(squamosapromoter-bindingprotein-like)是一类植物特有的转录因子，存在于所有绿色植物中，包括单细胞绿藻，苔藓，裸子植物和被子植物。spl转录因子首先是huijser等从金鱼草(antirrhinum majus)中克隆得到的，当时发现了两个密切相关的amsbp1和amsbp2基因，它们可与花分生组织特征基因squamosa(squa)的启动子结合，被命名为squamosa启动子结合蛋白(squamosapromoterbinding protein，sbp)。之后，先后在拟南芥和苔藓中进行了sbp转录因子家族的cdna克隆，发现在这两个植物中有多个sbp转录因子基因拷贝。近年来在桦木、玉米、番茄、草莓中也发现了此类基因。已有的研究表明spl参与调节多个重要的生物学过程，如发育阶段转变、花发育、叶片、株高和分蘖、植物胁迫应答及体内铜离子稳态平衡等发育和生理生化过程。

2、干旱胁迫是影响植物生长发育的重要因素之一，轻则阻碍生长，重则导致植株死亡。有研究报道，在干旱胁迫条件下，发现mir156在苜蓿的根中被诱导，而在叶片中没有被诱导，mir156过表达或敲低msspl13提高了苜蓿的耐旱性，mir156可以通过靶向msspl13来提高耐旱性。msspl8的下调增强了转基因苜蓿的耐盐性和耐旱性。此外，spl基因有助于增加保护细胞对aba的敏感性，并在干旱胁迫下保持气孔关闭。水稻osspl10是一个参与水稻抗旱性调控的转录因子，osspl10在干旱胁迫条件下正调控毛状体的形成，负调控ros的产生和气孔关闭，敲低或敲除osspl10可诱导水稻快速关闭气孔，防止水分流失，从而提高水稻的抗旱性。芒果中mispl13可能通过调控胁迫响应基因的表达来提高转基因植物在aba或干旱胁迫下的胁迫耐受性。木薯中mespl9通过调节保护性代谢物水平和ja信号传导来影响抗旱性，抑制mespl9的表达提高耐旱性且不会影响植物的整体生长。

3、就目前来说，spls基因在耐旱方面的研究多集中于水稻、苜宿、木薯等植物中且都是作为负调控因子，对于生长周期较长的多年生木本植物白桦spls基因功能的报道较少，也没有涉及到白桦bpspl2基因在提高耐旱的功能研究。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种白桦bpspl2基因在提高白桦耐旱能力中的应用。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了白桦bpspl2基因在改变植株耐旱能力中的应用，在植株中过表达白桦bpspl2基因，提高植株的耐旱能力；或者在植株中抑制白桦bpspl2基因的表达，降低植株的耐旱能力。

4、优选的，所述过表达白桦bpspl2基因的方法包括以下步骤：

5、构建bpspl2基因的过表达载体，利用农杆菌侵染法对白桦进行遗传转化，筛选出过表达bpspl2基因的转基因株系，实现白桦bpspl2基因的过表达。

6、优选的，所述bpspl2基因的过表达载体为pgwb5-bpspl2-gfp，所述pgwb5-bpspl2-gfp以pgwb5-gfp为初始载体，在pgwb5-gfp的bamhi酶和kpni酶酶切位点之间克隆有bpspl2基因片段。

7、优选的，所述抑制白桦bpspl2基因表达的方法包括以下步骤：

8、构建抑制bpspl2基因表达的载体，利用农杆菌侵染法对白桦进行遗传转化，筛选出抑制bpspl2基因的转基因株系，实现白桦bpspl2基因的抑制表达。

9、优选的，所述抑制白桦bpspl2基因表达的载体为prokii-bpspl2-srdx，所述prokii-bpspl2-srdx以prokⅱ为初始载体，在prokⅱ的bamhi酶和kpni酶酶切位点之间克隆有bpspl2基因片段及添加的srdx片段。

10、优选的，所述植株为白桦。

11、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

12、本发明提供了参与白桦耐旱的bpspl2基因过表达、抑制表达转基因白桦植株，还可用于挖掘下游调控基因，丰富植物生长抗逆的调控通路；本发明过表达bpspl2基因得到的35s::bpspl2耐旱能力提高的白桦植株，可用于培育抗逆生长性状优良的的林木；本发明提供的bpspl2基因能够参与白桦抗旱过程，可用于林木植物逆境生长发育研究，并为植物sbp基因家族功能研究提供参考资源。

1.白桦bpspl2基因在改变植株耐旱能力中的应用，其特征在于，在植株中过表达白桦bpspl2基因，提高植株的耐旱能力；或者在植株中抑制白桦bpspl2基因的表达，降低植株的耐旱能力。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述过表达白桦bpspl2基因的方法包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述bpspl2基因的过表达载体为pgwb5-bpspl2-gfp，所述pgwb5-bpspl2-gfp以pgwb5-gfp为初始载体，在pgwb5-gfp的bamhi酶和kpni酶酶切位点之间克隆有bpspl2基因片段。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抑制白桦bpspl2基因表达的方法包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述抑制白桦bpspl2基因表达的载体为prokii-bpspl2-srdx，所述prokii-bpspl2-srdx以prokⅱ为初始载体，在prokⅱ的bamhi酶和kpni酶酶切位点之间克隆有bpspl2基因片段及添加的srdx片段。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植株为白桦。