新型脂肪酶的制作方法

本发明涉及一种新型脂肪酶。

背景技术：

1、脂肪酶在洗涤用洗涤剂、餐具用洗涤剂、油脂加工、纸浆处理、饲料、医药中间体合成等各种用途中有用。在清洁中，脂肪酶通过将甘油三酯水解，并生成脂肪酸，从而有助于包含油的污垢的除去。

2、现有的清洁组合物或清洁环境含有抑制脂肪酶的活性或清洁效果的各种成分，要求在那样的条件下发挥功能的脂肪酶。作为对清洁有用的脂肪酶，来自疏绵状嗜热丝孢菌(thermomyces lanuginosus)的脂肪酶(以下称为tll)以lipolase(注册商标)的商品名销售。专利文献1中公开了来自cedecea sp-16640株的脂肪酶lipr139具有比tll优异的清洁性能。专利文献2中公开了在与1个或多个参照脂肪分解酶比较的情况下具有改善的清洁性能的来自变形杆菌(proteus)属细菌的脂肪酶(以下称为pvlip)的突变体。专利文献3中公开了来自宏基因组的脂肪酶lipr138具有比tll优异的清洁性能。lipr139、pvlip和lipr138是属于包括来自变形杆菌(proteus)属细菌或耶尔森氏菌(yersinia)属细菌的脂肪酶在内的同一的进化枝(变形杆菌/耶尔森氏菌进化枝)的脂肪酶。

3、许多来自革兰氏阴性菌的脂肪酶需要脂肪酶特异性伴侣才能折叠成活性型(非专利文献1)，在通过异源表达的低成本制造上存在问题。报道了通过特异性伴侣的共表达来改善异源表达(非专利文献2)，但其生产率低，在通过异源表达的低成本制造上依然存在较大的问题。另一方面，变形杆菌/耶尔森氏菌进化枝的细菌脂肪酶不需要特异性伴侣，在通过异源表达的低成本制造上具有优势(非专利文献3、4)。

4、如上所述，变形杆菌/耶尔森氏菌进化枝的细菌脂肪酶在对清洁的适应性和低成本制造可能性这两者上，作为清洁用酶具有巨大的潜力。

5、(专利文献1)日本特表2015-523078号公报

6、(专利文献2)国际公开第2020/046613号

7、(专利文献3)日本特表2015-525248号公报

8、(非专利文献1)hobson,audrey h.,et al.proceedings of the nationalacademy of sciences 90.12(1993):5682-5686.

9、(非专利文献2)quyen,thidinh,chihai vu,and giangthi thu le.microbialcell factories 11.1(2012):1-12.

10、(非专利文献3)lee,hong-weon,et al.biotechnology letters 22.19(2000):1543-1547.

11、(非专利文献4)glogauer,arnaldo,et al.microbial cell factories10.1(2011):1-15.

技术实现思路

1、本发明涉及下述1)～6)。

2、1)下述任意一种脂肪酶：

3、由序列编号14所示的氨基酸序列或与其具有至少79％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

4、由序列编号16所示的氨基酸序列或与其具有至少76％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

5、由序列编号18所示的氨基酸序列或与其具有至少81％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

6、由序列编号20所示的氨基酸序列或与其具有至少83％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

7、由序列编号22所示的氨基酸序列或与其具有至少96％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

8、由序列编号24所示的氨基酸序列或与其具有至少83％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

9、由序列编号26所示的氨基酸序列或与其具有至少90％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

10、由序列编号28所示的氨基酸序列或与其具有至少82％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

11、由序列编号30所示的氨基酸序列或与其具有至少73％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

12、由序列编号32所示的氨基酸序列或与其具有至少73％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

13、由序列编号34所示的氨基酸序列或与其具有至少79％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

14、由序列编号36所示的氨基酸序列或与其具有至少85％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

15、由序列编号38所示的氨基酸序列或与其具有至少73％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

16、由序列编号40所示的氨基酸序列或与其具有至少71％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；

17、由序列编号42所示的氨基酸序列或与其具有至少72％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶；和

18、由序列编号44所示的氨基酸序列或与其具有至少70％的同一性的氨基酸序列构成的脂肪酶。

19、2)一种多核苷酸，其编码1)所述的脂肪酶。

20、3)一种载体或dna片段，其包含2)的多核苷酸。

21、4)一种转化细胞，其含有3)的载体或dna片段。

22、5)一种清洁剂组合物，其含有1)所述的脂肪酶。

23、6)一种污垢的清洁方法，其中，使用5)所述的清洁剂组合物。

1.一种脂肪酶，其中，

2.一种多核苷酸，其中，

3.一种载体或dna片段，其中，

4.一种转化细胞，其中，

5.如权利要求4所述的转化细胞，其中，

6.一种清洁剂组合物，其中，

7.如权利要求6所述的清洁剂组合物，其中，

8.如权利要求7所述的清洁剂组合物，其中，

9.如权利要求7或8所述的清洁剂组合物，其中，

10.如权利要求9所述的清洁剂组合物，其中，

11.一种污垢的清洁方法，其中，