一种基于polyA金胶比色生物传感器及其检测方法和应用与流程
技术特征:
1.一种基于poly a金胶比色生物传感器检测mirna的方法,其特征在于,所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的基于poly a金胶比色生物传感器检测mirna的方法,其特征在于,所述吸收值为525-610nm处的吸收值;
3.根据权利要求1或2所述的基于poly a金胶比色生物传感器检测mirna的方法,其特征在于,所述滚环扩增反应包括如下步骤:
4.根据权利要求1-3中任一项所述的基于poly a金胶比色生物传感器检测mirna的方法,其特征在于,所述滚环扩增产物与纳米金自组装结合的反应体系包括:纳米金、bspp、无机盐和滚环扩增产物;
5.根据权利要求1-4中任一项所述的基于poly a金胶比色生物传感器检测mirna的方法,其特征在于,所述方法包括:
6.一种基于poly a金胶比色生物传感器,其特征在于,所述生物传感器包括:含有polyt的锁环探针、纳米金和被检测mirna;
7.根据权利要求6所述的基于poly a金胶比色生物传感器,其特征在于,计算所述生物传感器基于低盐浓度的反应体系的a525/a610比值a1,作mirna浓度对数-a1的标准曲线,计算待测样本中所含mirna的浓度;
8.一种基于poly a金胶比色检测mirna的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中包括权利要求6或7所述的基于poly a金胶比色生物传感器。
9.权利要求1-5中任一项所述的基于poly a金胶比色生物传感器检测mirna的方法、权利要求6或7所述的基于poly a金胶比色生物传感器或权利要求8所述的基于poly a金胶比色检测mirna的试剂盒中任意一种或至少两种的组合在mirna检测中的应用。
10.权利要求6或7所述的基于poly a金胶比色生物传感器和/或权利要求8所述的基于poly a金胶比色检测mirna的试剂盒在制备检测mirna的品中的应用。
技术总结
本发明提供了一种基于poly A金胶比色生物传感器及其检测方法和应用。本发明开发了一种比色法,通过滚环扩增反应辅助金纳米颗粒实现了对miRNA的超灵敏和特异性检测。在预成环序列中所设计的poly T经过目标物触发滚环扩增后,产生的poly A具有高吸附亲和力直接组装到金表面。滚环扩增产物与金结合形成具有网络结构的聚合物,通过紫外‑可见光谱法测量金的聚集。并且由于该生物传感器在两种盐浓度下的聚集离散程度不同,实验中利用这两种翻转的现象实现了信号的增强,将不同盐浓度下的紫外吸收值比值来确定被检测RNA的量,且检测过程中纳米金无需格外修饰,这种方法大大提高了灵敏度,检测限为0.42fM。
技术研发人员:李兰英,刘刚,王乐乐,闻艳丽,杨佳琪,陶晴
受保护的技术使用者:上海市计量测试技术研究院(中国上海测试中心、华东国家计量测试中心、上海市计量器具强制检定中心)
技术研发日:
技术公布日:2024/12/10
技术研发人员:李兰英,刘刚,王乐乐,闻艳丽,杨佳琪,陶晴
技术所有人:上海市计量测试技术研究院(中国上海测试中心、华东国家计量测试中心、上海市计量器具强制检定中心)
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