一种用于不同变型天麻鉴定的PCR引物及其鉴定方法与应用

1.一种用于不同变型天麻鉴定的pcr引物，其特征在于，所述不同变型天麻为乌天麻、绿天麻、红天麻、黄天麻、血红天麻，所述pcr引物包括ch15、ch20，各引物对应的核苷酸序列为：

2.如权利要求1所述的pcr引物，其特征在于，所述pcr引物ch15、ch20在用于乌天麻、绿天麻、红天麻、黄天麻、血红天麻鉴别中的应用。

3.如权利要求1所述的pcr引物，其特征在于，所述pcr引物ch15、ch20还可以制备用于鉴定待测天麻为乌天麻、绿天麻、红天麻、黄天麻或血红天麻的试剂盒。

4.一种利用权利要求1所述的pcr引物鉴定乌天麻、绿天麻、红天麻、黄天麻、血红天麻不同变型天麻的方法，其特征在于，包括如下步骤：

5.如权利要求4所述的鉴定方法，其特征在于，步骤1)中所述pcr扩增采用20μl体系：10×pcr buffer 2μl，dntp mixture 0.5μl，easytaq dna聚合酶0.2μl，引物各0.4μl(浓度为10μm)，dna模板25-100ng，ddh2o补齐至20μl。

6.如权利要求5所述的鉴定方法，其特征在于，步骤1)中所述dna模板50ng。

7.如权利要求4所述的鉴定方法，其特征在于，步骤1)中所述pcr扩增的程序为：95℃预变性5min；33个循环(95℃变型30s，52-61℃退火30s，72℃延伸45s)；72℃延伸5min。

8.如权利要求7所述的鉴定方法，其特征在于，步骤1)中所述33个循环(95℃变型30s，58℃退火30s，72℃延伸45s)。

9.如权利要求4所述的鉴定方法，其特征在于，步骤2)对步骤1)的pcr扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，乌天麻ch15引物在199bp处检测出条带，ch20引物在277bp处检测出条带；绿天麻ch15引物在199-300bp之间检测出条带，ch20引物在200-300bp之间检测出条带；红天麻ch15引物在150-199bp之间检测出条带，ch20引物在200-300bp之间检测出条带；黄天麻ch15引物在150-199bp之间检测出条带，ch20引物在300-400bp之间检测出条带；血红天麻的ch15引物在199bp处检测出条带，ch20引物在277-400bp之间检测出条带。

10.一种如权利要求4所述pcr引物鉴定乌天麻、绿天麻、红天麻、黄天麻、血红天麻的方法在用于鉴定待测样品中是否含有乌天麻、绿天麻、红天麻、黄天麻、血红天麻中的应用。