地骨皮中倍半萜类化合物及其制备方法与应用

本发明属于中药提取分离、植物化学及医药领域，涉及从茄科植物地骨皮中分离得到的倍半萜类化合物及其制备方法与应用。

背景技术：

1、糖尿病作为一种慢性代谢性疾病，具有发病率高、并发症多的特点。糖尿病的发展常伴随炎症产生，神经病变又是其最主要的慢性并发症。神经炎症若未能得到有效控制，将导致疼痛、认知障碍、运动障碍甚至动脉粥样硬化、脑卒中等症状，严重威胁糖尿病患者的生病安全。目前，治疗糖尿病的药物作用主要集中于疼痛管理和血糖控制，用于糖尿病引发的神经炎症的治疗药物所见甚少，因此开发效果明显、副作用低的抗糖尿病神经炎症药物迫在眉睫。

2、地骨皮(cortex lycii)是茄科(solanaceae)植物枸杞(lycium chinese mill.)或宁夏枸杞(lycium barbarum l.)的干燥根皮，其性寒、味甘，归肺、肝、肾经，具有凉血除蒸、清肺降火之效，主要用于阴虚潮热、骨蒸盗汗、肺热咳嗽、咯血、衄血及内热消渴等症状。现代研究表明其具有降血压、降血脂、降血糖、抑菌抗炎、免疫调节及解热镇痛等药理活性，其单味和复方制剂已在临床应用于糖尿病神经病变的治疗。目前从地骨皮中发现的化合物主要包括生物碱类、黄酮类、萜类、蒽醌类、有机酸类、糖苷类、环肽类。但其抗糖尿病神经炎症的活性成分尚未明确。

3、因此，进一步分析并开发地骨皮中的抗糖尿病神经炎症成分，对于地骨皮的应用及新的抗糖尿病神经炎症药物或保健品的开发具有重要意义

技术实现思路

1、本发明以茄科枸杞属植物地骨皮为研究目标，对其化学成分进行研究，得到了新型倍半萜类化合物，并评价其抗神经炎症活性，均具有抗神经炎症活性。

2、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、从茄科枸杞属植物地骨皮(lycii cortex)中分离得到的结构如下所示的倍半萜类化合物：

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6、作为本发明所述的优选技术方案，结构如下所示的倍半萜类化合物：

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8、本发明的另一个目的是提供所述的倍半萜类化合物的制备方法，包括：

9、步骤(1)、干燥的地骨皮药材用75～90％乙醇进行回流提取，提取液减压浓缩除去溶剂，得到浸膏，浸膏吸附于等量硅藻土上，依次用石油醚、乙酸乙酯和甲醇洗脱，分别收集石油醚洗脱液、乙酸乙酯洗脱液和甲醇洗脱液，分别进行减压浓缩，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、甲醇部位；其中，干燥的地骨皮药材和75～90％乙醇质量体积比为1:10～1:20kg/l或g/ml；

10、步骤(2)、乙酸乙酯部位进行硅胶柱色谱，以石油醚-乙酸乙酯体系、二氯甲烷-甲醇体系为洗脱剂，合并相同流分，得到九个组分：fr.a～fr.i；

11、步骤(3)、组分fr.e进行硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇体系为洗脱剂，得到十个馏分：fr.e1～fr.e10；fr.e6进行制备hplc色谱(制备型高效液相色谱)，得到化合物11；fr.e8进行制备hplc色谱，得到化合物10；fr.e9进行制备hplc色谱，得到化合物3、化合物4、化合物5；

12、步骤(4)、组分fr.g进行硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇体系为洗脱剂，得到十二个馏分：fr.g1～fr.g12；fr.g5进行sephadex lh-20凝胶柱色谱，以甲醇-水体系为洗脱剂，得到六个馏分：fr.g5a～fr.g5f；fr.g5a进行制备hplc色谱，得到化合物1、化合物8；fr.g10进行硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇体系为洗脱剂，得到八个馏分：fr.g10a～g10h；fr.g10b进行制备hplc色谱，得到化合物6；fr.g10g进行制备hplc色谱，得到化合物2、化合物7、化合物9。

13、步骤(1)中，优选的，干燥的地骨皮药材用75％乙醇进行回流提取。

14、优选的，干燥的地骨皮药材和75～90％乙醇质量体积比为1:20kg/l。

15、所述的提取的次数为2次，每次提取的时间为2h。

16、步骤(2)中，所述的石油醚-乙酸乙酯体系为石油醚:乙酸乙酯＝10:1→0:1v/v，二氯甲烷-甲醇体系为二氯甲烷-甲醇＝15:1→5:1v/v。

17、步骤(3)中，所述的二氯甲烷-甲醇体系为二氯甲烷:甲醇＝150:1→10:1v/v。

18、分离化合物11时，制备hplc色谱的条件为：ymc-pack ods-a色谱柱(型号aa12s05-2510wt)，流动相为乙腈:水＝50:50v/v，流速为7～10ml/min。

19、分离化合物10时，制备hplc色谱的条件为：ymc-pack ods-a色谱柱(型号aa12s05-2510wt)，流动相为乙腈:水＝30:70v/v，流速为7～10ml/min。

20、分离化合物3，化合物4，化合物5时，制备hplc色谱的条件为：ymc-pack ods-a色谱柱(型号aa12s05-2510wt)，流动相为乙腈:水＝30:70v/v，流速为7～10ml/min。

21、步骤(4)中，组分fr.g进行硅胶柱色谱，所述的二氯甲烷-甲醇体系为二氯甲烷:甲醇＝100:1→20:1v/v。

22、所述的甲醇-水体系为甲醇:水＝80:20v/v。

23、分离化合物1和8时，制备hplc色谱的条件为：ymc-pack ods-a色谱柱(型号aa12s05-2510wt)，流动相为乙腈:水＝30:70v/v，流速为7～10ml/min。

24、fr.g10进行硅胶柱色谱时，所述的二氯甲烷-甲醇体系为二氯甲烷:甲醇＝100:0→10:1v/v；

25、分离化合物6时，制备hplc色谱的条件为：ymc-pack ods-a色谱柱(型号aa12s05-2510wt)，流动相为乙腈:水＝30:70v/v，流速为7～10ml/min。

26、制备化合物2，化合物7，化合物9时，制备hplc色谱的条件为：ymc-pack ods-a色谱柱(型号aa12s05-2510wt)，流动相为乙腈:水＝30:70v/v，流速为7～10ml/min。

27、本发明的另一个目的是提供所述的倍半萜类化合物在制备治疗神经炎症的药物中的应用。

28、本发明的另一个目的是提供所述的倍半萜类化合物在制备治疗糖尿病引发的神经炎症的药物中的应用。

29、本发明还提供了一种具有抗神经炎症的药物组合物，所述的药物组合物以所述的倍半萜类化合物为有效成分。

30、与现有技术相比，本发明的有益效果：

31、本发明从茄科枸杞属植物地骨皮中分离得到了具有新型结构的倍半萜类化合物。体外细胞实验表明，倍半萜类化合物具有抗神经炎症活性，在制备抗神经炎症的药物中具有良好的应用前景，同时可以作为先导化合物，为发掘潜在的抗神经炎症新药提供了有力依据。

32、本发明倍半萜类化合物的分离方法简便可靠，效率高，可操作性强。