一种消减香草兰枯萎病的枯草芽孢杆菌合生元及其应用

本发明涉及生物，特别涉及一种资源配合枯草芽孢杆菌消减香草兰土传枯萎病的应用。

背景技术：

1、香草兰（vanilla planifolia ames），兰科香荚兰属多年生热带藤本攀缘植物，其豆荚经过加工后被广泛应用在药品、烟草、食品、化妆品行业，是我国热带地区重要经济作物之一。但饱受由土传病原菌尖孢镰刀菌香草兰专化型（fusarium oxysporum schl. sp.vanillae）引起的土传枯萎病的严重制约，发病田块植株枯萎死亡，造成大量减产，严重制约农业经济发展。

2、传统的化学防治手段如农药施用、土壤熏蒸等虽然能够在短时间内杀灭土传病原菌，但无法彻底根治，极易导致枯萎病反复发生，不符合绿色农业发展趋势需求，同时也会杀死土著有益微生物，不利于植物健康生长发育。

3、目前施用有益菌是公认的绿色、可持续消减土传枯萎病的措施。许多报道指出枯草芽孢杆菌能够抑制病原菌生长，有效消减如番茄、黄瓜、西瓜等经济作物的土传枯萎病，在一定程度上减少病害的发生，但针对热带作物香草兰土传枯萎病的有益菌还有待挖掘。此外，在有益菌筛选过程中，研究人员往往在实验室条件下为菌株提供最适宜其生长及功能物质产生的环境及营养条件，因此有益菌往往大量增殖且对病原菌表现出良好的抑制能力。然而在实际土壤环境中，资源的种类与数量往往十分有限，有益菌施入土壤后，由于缺乏支撑其生长及功能发挥的物质导致对土传枯萎病的消减效果大大降低。

4、因此，需要找寻能够高效促进枯草芽孢杆菌根际生长和抑菌能力发挥的资源——根际益生元，为有益菌在土壤提供一个适宜生长的资源环境，增强其消减香草兰土传枯萎病的能力。同时，由于不同作物-土壤体系下，土传病原菌种类以及作物根际营养环境和土壤微生物群落存在差异，适用于每种作物的有益菌也不同。因此亟需挖掘能够有效消减香草兰土传枯萎病的有益菌，并寻找能够有效提升其在土壤条件消减效果的资源物质，构建香草兰合生元配方，消减香草兰土传枯萎病。

技术实现思路

1、不同土壤-作物体系下，能够发挥消减土传枯萎病功效的合生元组合不同。有鉴于此，本发明提供了一种资源配合枯草芽孢杆菌消减香草兰土传枯萎病的应用，并确定了一种枯草芽孢杆菌合生元，该合生元可以解决由于土壤中养分有限，施用有益菌消减枯萎病时有益菌难以在土壤中大量增殖并发挥应有防效的问题。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis），保藏编号为cgmcc no.30934。

4、本发明还提供了上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）的培养物，为上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）的菌悬液或发酵液。

5、本发明还提供了上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）或上述培养物在以下任一项中的应用。

6、本发明还提供了上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）在抑制植物病原菌中的应用。

7、本发明还提供了上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）在制备合生元中的应用。

8、本发明还提供了上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）在消减香草兰病害中的应用。

9、本发明还提供了上述培养物在抑制植物病原菌中的应用。

10、本发明还提供了上述培养物在制备合生元中的应用。

11、在本发明的一些具体实施方案中，上述应用所述合生元包括防治香草兰病害的合生元。

12、本发明还提供了上述培养物在消减香草兰病害中的应用。

13、本发明还提供了合生元，包括上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）或上述培养物。

14、在本发明的一些具体实施方案中，上述合生元还包括资源物质；

15、所述资源物质为精胺、2,6-二氨基庚二酸、乙醇酸中的至少一种。

16、本发明还提供了制剂，包括上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）。

17、本发明还提供了制剂，包括上述培养物。

18、本发明还提供了制剂，包括上述合生元。

19、本发明还提供了上述合生元在抑制植物病原菌中的应用。

20、本发明还提供了上述合生元在消减香草兰病害中的应用。

21、本发明还提供了上述制剂在抑制植物病原菌中的应用。

22、本发明还提供了上述制剂在消减香草兰病害中的应用。

23、在本发明的一些具体实施方案中，上述应用所述植物病原菌包括尖孢镰刀菌。

24、在本发明的一些具体实施方案中，上述应用所述香草兰病害包括香草兰枯萎病。

25、在本发明的一些具体实施方案中，上述应用所述香草兰枯萎病包括主要由尖孢镰刀菌引起的香草兰土传枯萎病。

26、本发明还提供了香草兰的种植方法，包括施用上述枯草芽孢杆菌（bacillussubtilis）。

27、本发明还提供了香草兰的种植方法，包括施用上述培养物。

28、本发明还提供了香草兰的种植方法，包括施用上述合生元。

29、本发明还提供了香草兰的种植方法，包括施用上述制剂。

30、在本发明的一些具体实施方案中，上述种植方法包括采用灌根法将资源物质与上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）同时施入土壤。

31、在本发明的一些具体实施方案中，上述种植方法所述资源物质的终浓度为1×105cfu/kg土至1×109 cfu/kg土，可以是1×107 cfu/kg土。

32、在本发明的一些具体实施方案中，上述种植方法所述枯草芽孢杆菌（bacillussubtilis）的用量为0.01~1 mmol/kg土，可以是0.1 mmol/kg土。

33、本发明还提供了消减香草兰枯萎病的方法，包括施用上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）。

34、本发明还提供了消减香草兰枯萎病的方法，包括施用上述培养物。

35、本发明还提供了消减香草兰枯萎病的方法，包括施用上述合生元。

36、本发明还提供了消减香草兰枯萎病的方法，包括施用上述制剂。

37、在本发明的一些具体实施方案中，上述消减香草兰枯萎病的方法包括采用灌根法将资源物质与上述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）同时施入土壤。

38、在本发明的一些具体实施方案中，上述消减香草兰枯萎病的方法所述资源物质的终浓度为1×105 cfu/kg土至1×109 cfu/kg土，可以是1×107 cfu/kg土。

39、在本发明的一些具体实施方案中，上述消减香草兰枯萎病的方法所述枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）的用量为0.01~1 mmol/kg土，可以是0.1 mmol/kg土。

40、本发明的菌株和合生元组合有如下效果：

41、试验发现，从发病田块香草兰根际土壤样品中分离出的一株有益菌枯草芽孢杆菌yd19能够显著抑制病原菌生长，并且发现在室内微孔板系统中资源物质，特别是精胺可以显著促进枯草芽孢杆菌yd19的生长，并且显著提高枯草芽孢杆菌yd19对尖孢镰刀菌生长的抑制效果；温室盆栽实验中，资源物质，特别是精胺与枯草芽孢杆菌yd19配合使用，以灌根法施入土壤中，可显著降低香草兰枯萎病的发生。说明联合施用资源物质与枯草芽孢杆菌yd19可减少香草兰枯萎病的发病率，消减香草兰枯萎病。综上，本发明将资源物质与枯草芽孢杆菌yd19组成消减香草兰枯萎病的枯草芽孢杆菌合生元，可显著提升枯草芽孢杆菌yd19对尖孢镰刀菌生长的抑制，同时可显著香草兰枯萎病的发病率，有效消减香草兰土传枯萎病。

42、生物保藏说明

43、生物材料：yd19，分类命名：枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis），于2024年06月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏中心地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号 中国科学院微生物研究所；保藏编号为cgmcc no. 30934。