一种手性Fmoc-Gly-L-Pro-OH二肽的制备方法与流程

本发明涉及一种手性fmoc-gly-l-pro-oh二肽的制备方法，尤其涉及一种可实现工业化的手性fmoc-gly-l-pro-oh二肽的制备方法。

背景技术：

1、fmoc-gly-l-pro-oh二肽是一种非常重要的合成原料，用于艾塞那肽、芋螺抗皱素、瑞他鲁肽等多肽类药物。由于fmoc-gly-l-pro-oh二肽具有手性，其光学纯度及有效含量将影响终产品的药理、药物动力学、代谢和毒理活性等。

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3、cn114702546公开了以2-氯乙酰氯和l-pro-oh为起始原料，经过三步反应制备fmoc-gly-l-pro-oh二肽的方法。该方法危险化学品用量大，如使用大量的氨水做反应液，刺激性、危险性较大，不适合在工业化生产车间使用。wo2024077149公开了以fmoc-gly-oh和l-脯氨酸酯为原料，经过两步反应制备fmoc-gly-l-pro-oh二肽的方法。该方法合成第一步耗时较长，且水解过程极易发生脱fmoc保护基的副反应，使收率降低、成本增加。cn106749611公开了以fmoc-gly-oh为起始物料，经氯化反应、酯化反应和酰胺化反应制备fmoc-gly-l-pro-oh二肽的方法。该方法的第二步酯化反应过程中原料的反应效率不高，且生产的副产物较多。同时，通过重复以上方法还发现所得产品的光学异构体(fmoc-gly-d-pro-oh)均偏高(＞5％)，无法制备得到满足光学纯度要求的终产物。此外，采用常规的拆分方法虽然可以得到高纯度的fmoc-gly-l-pro-oh二肽，但是相关方法均仅适于实验室规模实施，尚无针对fmoc-gly-l-pro-oh二肽异构体的有效的工业制备方法以及化纯化方法。

技术实现思路

1、发明目的：本发明旨在提供一种操作便捷、反应高效、参数窗口宽泛、质量可控的手性fmoc-gly-l-pro-oh二肽的工业化制备方法。

2、技术方案：本发明所述的手性fmoc-gly-l-pro-oh二肽的制备方法包含以下步骤：

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4、(1)起始原料fmoc-gly-oh与氯化试剂、五氟苯酚经碱催化反应得到中间体fmoc-gly-opfp；

5、(2)中间体fmoc-gly-opfp与脯氨酸反应得到fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物；

6、(3)fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物经纯化得到所述的fmoc-gly-l-pro-oh二肽。

7、优选，步骤(3)中fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物在含氮有机碱-低级烷基醇体系中纯化得到所述的fmoc-gly-l-pro-oh二肽。

8、进一步优选，所述的含氮有机碱选自三甲胺、三乙胺、吗啉、吡啶中的一种或几种。

9、更进一步优选，所述的含氮有机碱为三甲胺。

10、进一步优选，所述的低级烷基醇选自甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇、正丁醇中的一种或几种。

11、更进一步优选，所述的低级烷基醇为乙醇。

12、进一步优选，所述的含氮有机碱与低级烷基醇的质量比为1:(10～20)。

13、更进一步优选，所述的含氮有机碱与低级烷基醇的质量比为1:15。

14、再进一步优选，所述的fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物在质量比为1:15的三乙胺-乙醇体系中纯化得到所述的fmoc-gly-l-pro-oh二肽。

15、进一步优选，所述的fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物在90％总质量(含氮有机碱-低级烷基醇体系的总质量为二肽混合物的10～20倍质量)的含氮有机碱-低级烷基醇体系中进行第一次纯化，所得的第一次纯化母液在余量的含氮有机碱-低级烷基醇体系中进行第二次纯化，合并两次纯化的产物即得所述的fmoc-gly-l-pro-oh二肽。

16、更进一步优选，所述的fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物在90％总质量(三乙胺-乙醇体系的总质量为二肽混合物的15倍质量)的三乙胺-乙醇体系中进行第一次纯化，所得的第一次纯化母液在余量的三乙胺-乙醇体系中进行第二次纯化，合并两次纯化的产物即得所述的fmoc-gly-l-pro-oh二肽。

17、进一步优选，所述的fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物在含氮有机碱-低级烷基醇体系中经加热、冷却析晶纯化得到所述的fmoc-gly-l-pro-oh二肽。

18、更进一步优选，所述的fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物在三乙胺-乙醇体系中经加热、冷却析晶纯化得到所述的fmoc-gly-l-pro-oh二肽。

19、再进一步优选，所述的fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物在质量比为1:(10～20)的三乙胺-乙醇体系中加热至50～60℃搅拌、冷却至10～20℃析晶纯化得到所述的fmoc-gly-l-pro-oh二肽。

20、又进一步优选，所述的fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物在质量比为1:15的三乙胺-乙醇体系中加热至50℃搅拌、冷却至20℃析晶纯化得到所述的fmoc-gly-l-pro-oh二肽。

21、最优选，所述的fmoc-gly-d/l-pro-oh二肽混合物在90％总质量(三乙胺-乙醇体系的总质量为二肽混合物的15倍质量)的三乙胺-乙醇体系中经第一次加热至50℃搅拌、冷却至20℃析晶。所得的析晶母液浓缩后在余量的三乙胺-乙醇体系中经第二次加热至50℃搅拌、冷却至20℃析晶，合并两次析晶的产物即得所述的fmoc-gly-l-pro-oh二肽。

22、优选，步骤(1)中fmoc-gly-oh与氯化试剂、五氟苯酚、碱之间的摩尔比为1:(1.1～1.3):(1.1～1.3):(1.3～1.6)。

23、进一步优选，所述的fmoc-gly-oh与氯化试剂、五氟苯酚、碱之间的摩尔比为1:1.2:1.2:1.5。

24、优选，所述的氯化试剂选自二氯亚砜、三氯氧磷、三氯化磷、五氯化磷、草酰氯。

25、进一步优选，所述的氯化试剂为二氯亚砜。

26、优选，步骤(1)中的碱选自三甲胺、三乙胺、吗啉、吡啶。

27、进一步优选，所述的碱为吡啶。

28、优选，步骤(1)为分步反应：

29、分步1：所述的fmoc-gly-oh与氯化试剂制备酰氯；

30、分步2：分步1所得的酰氯与五氟苯酚在吡啶提供的碱性条件下制备fmoc-gly-opfp。

31、优选，步骤(2)中脯氨酸中d-pro-oh的含量不超过20％。

32、进一步优选，所述的脯氨酸中d-pro-oh的含量不超过7％。

33、更进一步优选，所述的脯氨酸中d-pro-oh的含量不超过2％。

34、优选，步骤(2)中采用碱催化反应，所述的碱选自碳酸钠、碳酸钾、碳酸锂。

35、进一步优选，所述的碱为碳酸钠。

36、有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下显著优点：

37、本发明设计的制备方法采用了单向转化的高效纯化方法，对起始原料脯氨酸的光学纯度要求较低(纯度高于98％即可)，物料利用率高(纯化收率高达90％以上)，纯化效果好(异构体杂质可降至0.2％以下)。同时，该纯化方法可以嵌套在本发明的制备方法中，还可以单独作为纯化方法对不合格品进行有效纯化。此外，整体合成路线简短，反应高效(总收率大于80％)，无需特殊的反应条件和设备；并且中间产品为固体形态，能够稳定运输及储藏，利于灵活安排工业化生产周期。