一种联产D-天冬氨酸和L-丙氨酸的方法与流程

本发明涉及生物工程,尤其涉及一种联产d-天冬氨酸和l-丙氨酸的方法。
背景技术:
1、d-天冬氨酸是白色或类白色结晶性粉末,是一种重要的手性化合物,在医药、食品等方面具有重要作用,特别是作为手性药物合成的前体、中间体在医药行业中有着重要的应用前景。
2、d-天冬氨酸的制备主要有化学法和酶法。化学法采用不对称拆分,工艺复杂,且产物d-天门冬氨酸的纯度低,无工业化价值。酶法生产d-天冬氨酸是目前常用的生产方法,一般利用l-天冬氨酸-β-脱羧酶进行拆分。自然界中含高活性l-天冬氨酸-β-脱羧酶的微生物较多,该酶能专一性的催化l-天冬氨酸,脱除其β位羧基生成l-丙氨酸。因此,利用该酶可以把dl-天冬氨酸中的l-天冬氨酸转化成l-丙氨酸,并得到产物d-天冬氨酸,该工艺已较为成熟。
3、利用l-天冬氨酸-β-脱羧酶拆分生产d-天冬氨酸的过程中,生产的l-天冬氨酸转化液中含有大量的副产物l-丙氨酸。采用常规的提取方法,如蒸发浓缩很难回收获得纯度高的l-丙氨酸副产物,且收率不高。
技术实现思路
1、基于背景技术存在的技术问题,本发明提出了一种联产d-天冬氨酸和l-丙氨酸的方法。
2、本发明提出的一种联产d-天冬氨酸和l-丙氨酸的方法,包括以下步骤:
3、s1、将d-天冬氨酸酶转化液进行过滤除杂;
4、s2、将s1中所得清液浓缩,调节ph至2.8-3.0进行结晶,离心,得到d-天冬氨酸和离心母液;
5、s3、将离心母液回调ph至7.0-8.0,浓缩,加入乙醇并降温结晶,离心,得到l-丙氨酸。
6、优选地,d-天冬氨酸酶转化液的获取是以dl-天冬氨酸为底物,在l-天冬氨酸-β-脱羧酶的催化下转化反应生成含有d-天冬氨酸和l-丙氨酸的酶转化液。
7、优选地,s1中,还包括采用氨水调节d-天冬氨酸酶转化液ph至9.5-10.5,陈化2-3h,再进行过滤;优选地,依次采用陶瓷膜和超滤膜进行过滤。
8、优选地,s1中,还包括将过滤得到的滤液进行脱色处理。
9、优选地,s2中,在-0.95mpa、60-70℃下真空浓缩至体系中l-丙氨酸的浓度至180g/l。
10、优选地,s2中,将d-天冬氨酸用水浆洗或淋洗后,干燥,即得d-天冬氨酸成品。
11、优选地,s3中,在-0.95mpa、60-70℃下真空浓缩至体系中l-丙氨酸的浓度至250-260g/l。
12、优选地,s3中,向浓缩液中流加95%乙醇,流加量为浓缩液体积的35-50%,流加时间为2-3h;降温至10-15℃结晶。
13、优选地,s3中,还包括在降温过程中,加入l-丙氨酸晶种。
14、优选地,s3中,为获得高品质l-丙氨酸,可以将l-丙氨酸溶于水,再加入乙醇并降温结晶,进行二次醇析分离。
15、有益效果:本发明通过将酶转化液先通过调节体系ph,使溶解度受ph影响较大的d-天冬氨酸在等电点结晶析出,经离心分离回收得到d-天冬氨酸;再采用醇析的方法,l-丙氨酸从离心母液中结晶析出且d-天冬氨酸残留较少,所得l-丙氨酸的纯度较高,且为了获得高品质的l-丙氨酸,可以将l-丙氨酸复溶于水后再进行二次醇析。
技术特征:
1.一种联产d-天冬氨酸和l-丙氨酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,d-天冬氨酸酶转化液的获取是以dl-天冬氨酸为底物,在l-天冬氨酸-β-脱羧酶的催化下转化反应生成含有d-天冬氨酸和l-丙氨酸的酶转化液。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,s1中,还包括采用氨水调节d-天冬氨酸酶转化液ph至9.5-10.5,陈化2-3h,再进行过滤除杂;优选地,依次采用陶瓷膜和超滤膜进行过滤除杂。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法,其特征在于,s1中,还包括将过滤得到的滤液进行脱色处理。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法,其特征在于,s2中,在-0.95mpa、60-70℃下真空浓缩至体系中l-丙氨酸的浓度至170-180g/l。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法,其特征在于,s2中,将d-天冬氨酸用水浆洗或淋洗后,干燥,即得d-天冬氨酸成品。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法,其特征在于,s3中,在-0.95mpa、60-70℃下真空浓缩至体系中l-丙氨酸的浓度至250-260g/l。
8.根据权利要求1-7任一项所述的方法,其特征在于,s3中,向浓缩液中流加95%乙醇,流加量为浓缩液体积的35-50%,流加时间为2-3h;降温至10-15℃结晶。
9.根据权利要求1-8任一项所述的方法,其特征在于,s3中,还包括在降温过程中,加入l-丙氨酸晶种。
10.根据权利要求1-9任一项所述的方法,其特征在于,s3中,为获得高品质l-丙氨酸,可以将l-丙氨酸溶于水,再加入乙醇并降温结晶,进行二次醇析分离。
技术总结
本发明公开了一种联产D‑天冬氨酸和L‑丙氨酸的方法,通过先调节酶转化液体系pH,使溶解度受pH影响较大的D‑天冬氨酸在等电点结晶析出,经离心分离回收得到D‑天冬氨酸;再将离心母液pH调节至7.0‑8.0,采用醇析的方法,向离心母液中加入乙醇并降温结晶,L‑丙氨酸从离心母液中结晶析出且D‑天冬氨酸残留较少,所得L‑丙氨酸的纯度较高,且为了获得高品质的L‑丙氨酸,可以将L‑丙氨酸复溶于水后再进行二次醇析。
技术研发人员:马祥亮,余军
受保护的技术使用者:安徽华恒生物科技股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/28
技术研发人员:马祥亮,余军
技术所有人:安徽华恒生物科技股份有限公司
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