一种生物炭富里酸复合材料固定化嗜麦芽寡养单胞菌的制备方法及应用

1.一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6，其分类命名为嗜麦芽寡养单胞菌（stenotrophomonas maltophilia），已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.29353。

2.根据权利要求1所述的一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6，其特征在于，该菌株对多环芳烃具有降解能力，形成菌落呈无色半透明状，表面光滑湿润，边缘规则，中央隆起，略显黄色；呈长杆状，端圆，无芽孢，个体大小 1~1.5 μm×0.2~0.4 μm ；菌株 hct2-6 对芘的最佳降解环境条件为 ph=7.0，30℃，盐度为 3%。

3.一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6的筛选和驯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6的筛选和驯化方法，其特征在于，所述的无机盐培养基为(nh4)2so4 2g、na2hpo4 1g、kh2po4 1g、mgso4·7h2o 0.2g、cacl2·2h2o 0.1g、微量元素溶液1ml、蒸馏水1000ml，ph 7.0。

5.根据权利要求3所述的一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6的筛选和驯化方法，其特征在于，所述的步骤三芘浓度分别为30 mg·l-1、90 mg·l-1、150 mg·l-1、210 mg·l-1和300mg·l-1。

6.根据权利要求3所述的一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6的筛选和驯化方法，其特征在于，所述的选择性培养基为取一定量的多环芳烃溶液（丙酮溶解）加入到已灭菌的msm培养基中，待有机溶剂完全挥发后备用。

7.根据权利要求3所述的一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6的筛选和驯化方法，其特征在于，所述的第一阶段驯化培养条件为100ml选择性培养基加入富集后的菌液5-10ml，30 ℃，150 r·min-1培养7d。

8.根据权利要求3所述的一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6的筛选和驯化方法，其特征在于，所述的高效液相色谱(hplc)检测的色谱条件为：采用的 hplc 型号为 agilenthp1100，色谱柱为 c18 柱（shim-pack vp-ods 液相色谱柱，150 mm×4.6 mm/5 μm），利用紫外检测器，波长设定为 220 nm 和 254 nm，设置流速为 1 ml·min-1，柱温为 30 ℃，进样量为 10μl，流动相为乙腈和超纯水 90:10，芘（pyr）的保留时间为 4.2±0.1 min。

9.根据权利要求1所述的一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6应用于生物炭富里酸复合材料固定化菌剂的制备，其特征在于，包括以下步骤；

10.根据权利要求9所述的一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6应用于生物炭富里酸复合材料固定化菌剂的制备，其特征在于，所述的固定化培养基为蔗糖10g、牛肉膏6 g、酵母浸粉1.5 g，蒸馏水1000ml，ph7.0~7.2，121 ℃灭菌 20 min。

11.根据权利要求9所述的一种嗜麦芽寡养单胞菌hct2-6应用于生物炭富里酸复合材料固定化菌剂的制备，其特征在于，所述的固定化菌剂在土壤多环芳烃污染环境治理中的应用。

12.根据权利要求11所述应用，其特征在于多环芳烃为萘 nap、芘 pyr、苯并[a]蒽baa、苯并[a]芘 bap。

13.根据权利要求11所述应用，其特征在于使用方法为：向无菌棕色瓶中加入 2 g 老化后多环芳烃污染土壤，使土壤含水率保持于 50-60% ，将制备的20mg固定化菌剂加入老化后多环芳烃污染土壤中，在摇床（30 ℃、150r·min-1）中避光振荡培养，共培养60d，每隔15d样，测定土壤中多环芳烃的残余量，用 hplc 测定溶液中多环芳烃浓度。