药用8臂-聚乙二醇-L-抗坏血酸乙酸酯的制备方法与流程

本发明属于制药领域，特别是涉及一种药用8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯的制备方法。

背景技术：

1、8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯是一种多臂聚乙二醇衍生物，在连接到一个三聚季戊四醇的八个臂的每个末端具有l-抗坏血酸乙酸酯基团，分子量有2k～40k。其同时兼具了聚乙二醇和维生素c的生理活性，常温下为白色或淡黄色粘稠状液体或蜡状固体，在空气中能稳定存在。该产品可以增加药物的溶解度和稳定性，降低肽和蛋白质的免疫原性，并抑制带电分子在修饰表面的非特异性结合。

2、药用8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯作为一种新型多臂聚乙二醇衍生物的药用辅料，暂无相关生产技术的文献报道。可作为乳化剂、增溶剂、吸收促进剂和抗氧剂等，具有较强的乳化增溶能力，并能提高药物靶向性，在现代制药领域有较大的市场应用需求，尤其是在国内外创新药物制剂开发方面。而制剂客户对该辅料的含量、酸值、水分、干燥失重、炽灼残渣、残留溶剂等要求较为苛刻，品控稍差即会对制剂疗效产生不良影响。因此需要在合成和精制过程中精细化控制，以降低杂质的残留，提高产品质量，满足药用需求。

3、基于上述现状，亟需一种品质优、收率高、成本低、环境友好、操作简便、适合工业化生产的药用8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯的制备方法。

技术实现思路

1、本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种工艺简单、操作安全、成本低廉的以及产品质量符合药用企业标准的药用8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯的制备方法。

2、本发明的技术方案概述如下：

3、药用8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯的制备方法，

4、合成路线为：

5、

6、其中：ⅰ--8臂-聚乙二醇、ⅱ--8臂-聚乙二醇乙酸酯、ⅲ--8臂-聚乙二醇乙酸、ⅳ--8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯。

7、包括下列步骤：

8、(1)将8臂-聚乙二醇、低级脂肪醇加入反应容器中，再加入强碱性催化剂，搅拌均匀，30～70℃，反应2～5小时，8臂-聚乙二醇与强碱性催化剂的摩尔比为1：12.8～32；

9、(2)向步骤(1)中滴加相当于8臂-聚乙二醇摩尔数2.5～6倍的卤代乙酸酯，30～70℃，反应4～9小时，得到含8臂-聚乙二醇乙酸酯的反应液；然后在10～30℃下，加入相当于低级脂肪醇0.3～0.7倍质量的1n naoh水溶液，搅拌1～4小时；用1n hcl调ph至5.0～6.0，得到含8臂-聚乙二醇乙酸的处理液；

10、(3)将步骤(2)含8臂-聚乙二醇乙酸的处理液减压浓缩除去低级脂肪醇得到浓缩液，再用二氯甲烷萃取浓缩液2次，合并二氯甲烷萃取液，减压浓缩至二氯甲烷萃取液的质量为8臂-聚乙二醇质量的0.9～1.0倍，向二氯甲烷浓缩液中滴加正己烷析出固体，搅拌打浆、过滤，滤饼干燥得到8臂-聚乙二醇乙酸；

11、(4)按摩尔比1：8.8～14.4的比例，将步骤(3)得到的8臂-聚乙二醇乙酸与l-抗坏血酸加入反应容器中，再加入二氯甲烷，搅拌均匀，在0～10℃下，加入缩合剂、缩合活化剂；升温至20～35℃，反应3～6小时，得到反应液，其中8臂-聚乙二醇乙酸与二氯甲烷的质量比为1：5.5～8；

12、(5)将步骤(4)得到的反应液减压浓缩至反应液体积的10％～15％，过滤除去滤饼，向滤液中滴加正己烷析出固体，搅拌打浆，得到打浆混合液；

13、(6)将步骤(5)的打浆混合液过滤，正己烷洗滤饼，滤饼干燥得到药用8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯。

14、上述8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯的hplc、gpc谱图如图1、图2所示；本发明制备产品的hplc谱图。

15、优选地，步骤(1)中8臂-聚乙二醇的分子量为2k～40k，强碱性催化剂为甲醇钾、乙醇钾或叔丁醇钾；低级脂肪醇为甲醇、乙醇或叔丁醇。

16、优选地，步骤(1)中8臂-聚乙二醇与强碱性催化剂的摩尔比为1：19.2～25.6，低级脂肪醇的加入量为8臂-聚乙二醇质量的5～8倍。

17、优选地，步骤(2)中卤代乙酸酯为氯乙酸甲酯、氯乙酸乙酯、氯乙酸叔丁酯、溴乙酸甲酯、溴乙酸乙酯或溴乙酸叔丁酯。

18、优选地，步骤(3)中第一次萃取所用二氯甲烷的质量为所加1n naoh质量的一半，第二次萃取所用二氯甲烷的质量为第一次萃取所用二氯甲烷质量的一半。

19、优选地，步骤(3)中打浆所用正己烷的质量为8臂-聚乙二醇质量的3～5倍；

20、优选地，步骤(4)中所加8臂-聚乙二醇乙酸与l-抗坏血酸的摩尔比为1：10.2～13.5。

21、优选地，步骤(4)中所用缩合剂为二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺或1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺；缩合活化剂为4-吡咯烷基吡啶、4-二甲氨基吡啶或1-羟基苯并三氮唑。

22、优选地，步骤(4)中8臂-聚乙二醇乙酸、缩合剂与缩合活化剂的摩尔比为1：8～12：4.5～8.5。

23、优选地，步骤(5)打浆所用正己烷的质量为8臂-聚乙二醇乙酸质量的2.5～4倍。

24、优选地，步骤(6)中清洗滤饼所用正己烷的质量为所述步骤(5)中打浆所用正己烷质量的1/15～1/8。

25、8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯为新型药用辅料，国内外报道甚少，暂查询不到现有生产技术。本发明是以8臂-聚乙二醇与卤代乙酸酯为原料，在强碱性催化剂作用下发生亲核取代反应生成8臂-聚乙二醇乙酸酯；8臂-聚乙二醇乙酸酯在碱性条件下发生酯水解反应生成8臂-聚乙二醇乙酸钠，再调节ph至酸性得到8臂-聚乙二醇乙酸；8臂-聚乙二醇乙酸与抗坏血酸，在缩合剂与缩合活化剂的作用下缩合成酯得到8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯。本工艺反应条件温和、反应速率快、反应副产物少、反应收率高；由于缩合活化剂的加入，减少了重排副产物的生成，降低纯化难度；通过打浆法可有效除去反应液中未反应完的原料、副产物等杂质。得到的药用8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯，含量99.5％以上、酸值0.10以下、水分0.1％以下、干燥失重0.1％以下，质量指标均符合药用企业标准。其同时兼具了聚乙二醇和维生素c的生理活性，常温下为白色或淡黄色粘稠状液体或蜡状固体，8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯在空气中能稳定存在，可以增加药物的溶解度和稳定性，降低肽和蛋白质的免疫原性，并抑制带电分子在修饰表面的非特异性结合。

26、本发明的优点：

27、1.本发明的方法是以8臂-聚乙二醇为原料，先与卤代乙酸酯发生亲核取代反应得到8臂-聚乙二醇乙酸酯，水解产物再与l-抗坏血酸发生酯化反应得到药用8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯，反应条件温和、反应速率快、反应副产物少、反应收率高达91％以上。

28、2.本发明使用二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺或1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺作为缩合剂、4-吡咯烷基吡啶、4-二甲氨基吡啶或1-羟基苯并三氮唑作为缩合活化剂，8臂-聚乙二醇乙酸先与缩合剂、缩合活化剂反应得到8臂-聚乙二醇乙酸活性酯，再以较温和的反应条件与l-抗坏血酸发生酯化反应得到8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯，大大降低了反应活化能，提高了反应速率；同时由于缩合活化剂的加入，大大减少了重排副产物的生成，降低纯化难度；

29、3.本发明根据溶解性差异，选用二氯甲烷、正己烷作为纯化溶剂，通过打浆法可有效除去反应液中未反应完的原料、副产物等杂质，得到的药用8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯含量99.5％以上；

30、4.本发明的方法制备得到的药用8臂-聚乙二醇-l-抗坏血酸乙酸酯，含量99.5％以上、酸值0.10以下、水分0.1％以下、干燥失重0.1％以下，质量指标均符合药用企业标准；

31、5.本发明使用的生产工艺操作简单，原料易得，反应条件温和，收率高，操作安全性高，环境友好无污染，适合工业化生产。