淋巴细胞胞浆蛋白1作为动脉粥样硬化性心血管病生物标志物的应用

本发明涉及生物医学。更具体地，涉及一种与动脉粥样硬化性心血管病相关的生物标志物及其应用。

背景技术：

1、动脉粥样硬化性心血管病(atherosclerotic cardiovascular disease，简称ascvd)是广泛的、动脉粥样硬化源性疾病总称。动脉粥样硬化性心血管病的主要病因是动脉粥样硬化，其特征是血管内膜中脂质和纤维成分的积聚导致动脉壁增厚，从而形成动脉粥样硬化斑块。动脉粥样硬化性心血管病常常包括急性冠状动脉综合征、稳定性冠心病、血运重建术后、缺血性心肌病、缺血性卒中、短暂性脑缺血发作、外周动脉粥样硬化病(“中国心血管健康与疾病报告编写组.中国心血管健康与疾病报告2019概要[j].中国循环杂志，2020,35(9):833-854.doi:10.3969/j.issn.1000-3614.2020.09.001.”)。

2、目前，用于显示由动脉粥样硬化引起的动脉狭窄的影像学技术包括双重超声、ct血管造影和血管造影等。与影像学方法相比，生物标志物检测具有操作方便、快捷和结果易于判读等优点。然而，传统的动脉粥样硬化性心血管病的实验室检测包括血脂及载脂蛋白的测定，只能评估动脉粥样硬化性心血管病的危险因素，不能作为诊断动脉粥样硬化性心血管病的血清学标志物，存在特异性不高的缺点。因此，在临床上急需寻找到可成本低廉、重复性好且特异性高的生物标志物，更好地帮助动脉粥样硬化性心血管病患者诊断和监测病情。

3、淋巴细胞胞浆蛋白1(lcp1)，又称l-plastin，是一种在人类、小鼠和斑马鱼中高度保守的肌动蛋白结合蛋白。lcp1包含2个n-末端e-f手结构，参与钙结合，以及2个肌动蛋白结合结构域。lcp1含有两个n-末端磷酸化位点：ser5(主要位点)和ser7，磷酸化增强了lcp1对富含f-肌动蛋白结构的靶向作用，并增加了lcp1对肌动蛋白的捆绑活性。lcp1主要通过协助肌动蛋白聚合、细胞骨架重排来调节细胞运动，是直接控制细胞运动的主要细胞骨架结合蛋白之一。此外，lcp1还参与宿主防御、免疫突触的形成、t细胞的激活等。lcp1缺乏会破坏多种免疫功能，主要是通过破坏依赖基于粘附的信号传导的过程。在巨噬细胞中，lcp1与肌动蛋白支持的结构共定位，并集中在支持细胞运动和粘附的伪足小体中。正常情况下，lcp1主要在造血细胞中表达，包括中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、t细胞和b细胞，但在多种恶性肿瘤细胞中高表达。在结直肠癌、口腔癌、前列腺癌和胆管癌等非造血细胞来源的肿瘤细胞中，lcp1的高表达与细胞迁移和侵袭增加相关。异常表达的lcp1与各种癌症的分期和严重程度密切相关，其异常表达可作为肿瘤的生物标志物和分子疗法的靶点。然而，目前关于lcp1在动脉粥样硬化性心血管病患者血液或组织样本中的表达水平及其诊断效能的研究尚不清楚。

技术实现思路

1、基于上述问题，本发明的目的在于提供一种基于lcp1的新型生物标志物，从而解决当前动脉粥样硬化性心血管病诊断中生物标志物特异性和灵敏度不足的技术问题，实现对该疾病的快速、准确诊断，并有效监测病情进展，为临床决策提供有力支持。

2、为达到上述目的，本发明采用下述技术方案：

3、本发明公开了检测样本中淋巴细胞胞浆蛋白1表达水平的试剂在制备诊断动脉粥样硬化性心血管病的产品中的应用。

4、具体而言，本发明提出了一种新的生物标志物lcp1，用于动脉粥样硬化性心血管病的诊断。本发明通过整合多个与动脉粥样硬化病理过程密切相关的公共数据集，并运用生物信息学分析方法，对lcp1基因表达特性进行剖析，确保了研究结果的可靠性和普适性。本发明在mrna水平上发现lcp1在人颈动脉斑块组织中高表达。通过比较动脉粥样硬化性心血管病患者与非动脉粥样硬化性心血管病人群的外周血血清中lcp1蛋白水平，发现lcp1在动脉粥样硬化性心血管病患者中显著高升高；而且roc曲线分析揭示lcp1在动脉粥样硬化性心血管病患者的临床诊断的auc值达0.819，具有较高的可靠性，表明lcp1可作为潜在的动脉粥样硬化性心血管病生物标志物。

5、进一步地，所述试剂包括：

6、检测样本中淋巴细胞胞浆蛋白1的mrna表达水平的试剂；或者，

7、检测样本中淋巴细胞胞浆蛋白1的蛋白表达水平的试剂。

8、进一步地，所述产品通过检测来自受试者的样本中的淋巴细胞胞浆蛋白1的mrna表达水平，确定受试者是否患有动脉粥样硬化性心血管病或存在患动脉粥样硬化性心血管病的风险。

9、进一步地，所述产品通过检测来自受试者的样本中的淋巴细胞胞浆蛋白1的蛋白表达水平，确定受试者是否患有动脉粥样硬化性心血管病或存在患动脉粥样硬化性心血管病的风险。

10、进一步地，检测样本中淋巴细胞胞浆蛋白1的mrna表达水平的试剂包括通过高通量rna测序、rna-原位杂交、数字pcr或荧光定量pcr方法检测所述淋巴细胞胞浆蛋白1的mrna表述水平所需的试剂。

11、进一步地，检测样本中淋巴细胞胞浆蛋白1的蛋白表达水平的试剂包括通过化学发光法、免疫荧光法、蛋白芯片法、蛋白质谱法、免疫组织化学法、基于标记技术(包括但不限于同位素标记的抗体或蛋白、荧光标记的抗体或蛋白等)的斑块示踪法、蛋白印迹法或酶联免疫吸附法检测所述淋巴细胞胞浆蛋白1的蛋白表达水平所需的试剂。

12、进一步地，所述样本为血清或组织样本。

13、进一步地，所述产品为检测试剂盒。

14、进一步地，所述产品为检测芯片。

15、进一步地，所述产品为检测试纸条。

16、本发明的有益效果如下：

17、与现有技术相比，生物标志物lcp1用于诊断动脉粥样硬化性心血管病为本发明首次提出。本发明通过整合多个与动脉粥样硬化病理过程密切相关的公共数据集，并运用生物信息学分析方法，对lcp1基因表达特性进行剖析，确保了研究结果的可靠性和普适性。本发明通过实验验证了lcp1基因在斑块组织中的高表达特性，且血清中lcp1蛋白水平在动脉粥样硬化性心血管病患者中显著升高，roc曲线分析方法评估了血清lcp1蛋白在动脉粥样硬化性心血管病诊断中的性能。结果显示，lcp1具有较高的诊断准确性和区分度，auc值达到0.819，表明其在临床诊断中具有较高的应用价值。

1.检测样本中淋巴细胞胞浆蛋白1表达水平的试剂在制备诊断动脉粥样硬化性心血管病的产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂包括：

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品通过检测来自受试者的样本中的淋巴细胞胞浆蛋白1的mrna表达水平，确定受试者是否患有动脉粥样硬化性心血管病或存在患动脉粥样硬化性心血管病的风险。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品通过检测来自受试者的样本中的淋巴细胞胞浆蛋白1的蛋白表达水平，确定受试者是否患有动脉粥样硬化性心血管病或存在患动脉粥样硬化性心血管病的风险。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，检测样本中淋巴细胞胞浆蛋白1的mrna表达水平的试剂包括通过高通量rna测序、rna-原位杂交、数字pcr或荧光定量pcr方法检测所述淋巴细胞胞浆蛋白1的mrna表述水平所需的试剂。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，检测样本中淋巴细胞胞浆蛋白1的蛋白表达水平的试剂包括通过化学发光法、免疫荧光法、蛋白芯片法、蛋白质谱法、免疫组织化学法、基于标记技术的斑块示踪法、蛋白印迹法或酶联免疫吸附法检测所述淋巴细胞胞浆蛋白1的蛋白表达水平所需的试剂。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述样本为血清、血浆或组织样本。

8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品为检测试剂盒。

9.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品为检测芯片。

10.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品为检测试纸条。