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一种工程化嗜盐菌及用其生产3-羟基丁酸的方法与流程

2025-09-05 13:40:01 483次浏览

技术特征:

1.一种工程化嗜盐菌,其特征在于,所述工程化嗜盐菌不表达聚3-羟基丁酸酯合成酶基因phac且过表达硫酯酶基因tesb。

2.根据权利要求1所述的工程化嗜盐菌,其特征在于,所述工程化嗜盐菌为工程化盐单胞菌。

3.根据权利要求1所述的工程化嗜盐菌,其特征在于,所述聚3-羟基丁酸酯合成酶基因phac的核苷酸序列为seq id no.1所示;所述硫酯酶基因tesb的核苷酸序列为seq id no.2所示。

4.根据权利要求1~3中任一项所述的工程化嗜盐菌,其特征在于,过表达硫酯酶基因tesb采用诱导型表达系统或组成型表达系统。

5.根据权利要求4所述的工程化嗜盐菌,其特征在于,所述诱导型表达系统中采用的启动子为mmp1。

6.根据权利要求4所述的工程化嗜盐菌,其特征在于,所述组成型表达系统中采用的启动子为pporin221、pporin68、pporin42或pporin58。

7.权利要求1~6中任一项所述的工程化嗜盐菌在3-羟基丁酸生产或选育3-羟基丁酸生产菌中的应用。

8.一种3-羟基丁酸的生产方法,其特征在于,包括:发酵培养权利要求1~6中任一项所述的工程化嗜盐菌。

9.根据权利要求8所述的生产方法,其特征在于,所述发酵培养采用的培养基以mm培养基为基础培养基,添加终浓度为10-30g/l的葡萄糖以及30-60g/l的氯化钠,ph为8.5~9.5。

10.根据权利要求8或9所述的生产方法,其特征在于,所述发酵培养结束后,收集培养物中的3-羟基丁酸,并将菌体离心重悬后加入丙酮酸,进一步收集重悬液中的3-羟基丁酸。


技术总结
本发明涉及微生物技术领域,尤其涉及一种工程化嗜盐菌及用其生产3‑羟基丁酸的方法。所述工程化嗜盐菌不表达聚3‑羟基丁酸酯合成酶基因phaC且过表达硫酯酶基因tesB。本发明利用嗜盐菌通过工程化改造获得了一种能够高效合成3‑羟基丁酸的工程化嗜盐菌,实现了3‑羟基丁酸在嗜盐菌中从零到一合成的突破。本发明的提出为3‑羟基丁酸的工业化生产提供了优良菌种,而且本发明的生产工艺简单,成本低廉,给予工业化发酵生产3‑羟基丁酸提供了更多的选择,具有广阔的应用前景。

技术研发人员:杨芳,徐绚明,张瑶瑶,杜开心,高紫君,刘威,王竞辉
受保护的技术使用者:北京微构工场生物技术有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/28
文档序号 : 【 40165417 】

技术研发人员:杨芳,徐绚明,张瑶瑶,杜开心,高紫君,刘威,王竞辉
技术所有人:北京微构工场生物技术有限公司

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杨芳徐绚明张瑶瑶杜开心高紫君刘威王竞辉北京微构工场生物技术有限公司
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