一种工程化嗜盐菌及用其生产3-羟基丁酸的方法与流程
技术特征:
1.一种工程化嗜盐菌,其特征在于,所述工程化嗜盐菌不表达聚3-羟基丁酸酯合成酶基因phac且过表达硫酯酶基因tesb。
2.根据权利要求1所述的工程化嗜盐菌,其特征在于,所述工程化嗜盐菌为工程化盐单胞菌。
3.根据权利要求1所述的工程化嗜盐菌,其特征在于,所述聚3-羟基丁酸酯合成酶基因phac的核苷酸序列为seq id no.1所示;所述硫酯酶基因tesb的核苷酸序列为seq id no.2所示。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的工程化嗜盐菌,其特征在于,过表达硫酯酶基因tesb采用诱导型表达系统或组成型表达系统。
5.根据权利要求4所述的工程化嗜盐菌,其特征在于,所述诱导型表达系统中采用的启动子为mmp1。
6.根据权利要求4所述的工程化嗜盐菌,其特征在于,所述组成型表达系统中采用的启动子为pporin221、pporin68、pporin42或pporin58。
7.权利要求1~6中任一项所述的工程化嗜盐菌在3-羟基丁酸生产或选育3-羟基丁酸生产菌中的应用。
8.一种3-羟基丁酸的生产方法,其特征在于,包括:发酵培养权利要求1~6中任一项所述的工程化嗜盐菌。
9.根据权利要求8所述的生产方法,其特征在于,所述发酵培养采用的培养基以mm培养基为基础培养基,添加终浓度为10-30g/l的葡萄糖以及30-60g/l的氯化钠,ph为8.5~9.5。
10.根据权利要求8或9所述的生产方法,其特征在于,所述发酵培养结束后,收集培养物中的3-羟基丁酸,并将菌体离心重悬后加入丙酮酸,进一步收集重悬液中的3-羟基丁酸。
技术总结
本发明涉及微生物技术领域,尤其涉及一种工程化嗜盐菌及用其生产3‑羟基丁酸的方法。所述工程化嗜盐菌不表达聚3‑羟基丁酸酯合成酶基因phaC且过表达硫酯酶基因tesB。本发明利用嗜盐菌通过工程化改造获得了一种能够高效合成3‑羟基丁酸的工程化嗜盐菌,实现了3‑羟基丁酸在嗜盐菌中从零到一合成的突破。本发明的提出为3‑羟基丁酸的工业化生产提供了优良菌种,而且本发明的生产工艺简单,成本低廉,给予工业化发酵生产3‑羟基丁酸提供了更多的选择,具有广阔的应用前景。
技术研发人员:杨芳,徐绚明,张瑶瑶,杜开心,高紫君,刘威,王竞辉
受保护的技术使用者:北京微构工场生物技术有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/28
文档序号 :
【 40165417 】
技术研发人员:杨芳,徐绚明,张瑶瑶,杜开心,高紫君,刘威,王竞辉
技术所有人:北京微构工场生物技术有限公司
备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
声 明 :此信息收集于网络,如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们,我们会在第一时间删除
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