一种猪Ⅰ类白细胞抗原单克隆抗体及其应用

本发明属于兽医生物制品领域，涉及一种猪ⅰ类白细胞抗原单克隆抗体及其应用。

背景技术：

1、非洲猪瘟(african swine fever,asf)是由非洲猪瘟病毒(african swine fevervirus,asfv)引起的一种猪的急性、烈性、高度接触性传染病。asf强毒株对猪高度致死，致死率可达100％。asf于2018年首次传入中国。asfv在我国田间流行情况复杂，已出现基因ⅰ型和基因ⅱ型重组的高毒力毒株，但是目前，国内尚无安全、有效的疫苗或药物能够预防asfv感染。

2、猪作为重要的农业经济动物，不仅在食品生产中占据重要地位，而且在生物医学研究中也扮演着关键角色。猪的免疫系统与人类有许多相似之处，这使得它们成为研究人类疾病和开发新疗法的理想模型。mhc-i(主要组织相容性复合体i类)分子是免疫系统中的关键组成部分，它们在在抗原呈递、免疫应答、炎症反应及肿瘤形成中发挥重要作用。mhc-i类分子是由人b细胞和t细胞产生的，其作用在于促进b细胞和t细胞对抗原的应答。在t细胞和b细胞的信号传递中，mhc-i类分子发挥了重要作用。在感染、炎症反应及肿瘤形成中，mhc-i类分子表达量增加可使抗原更易被宿主细胞识别和呈递，从而增加了抗原的免疫原性，诱发机体产生相应的免疫应答，并诱导下游的免疫相关信号通路，最终促进疾病发生或使疾病发展。

3、猪ⅰ类白细胞抗原(swine leukocyte antigen i,sla-i,slai)是mhc-i类分子中的重要成员。

4、在细胞内，asfv蛋白被降解成为抗原肽，而后被猪ⅰ主要组织相容性复合物(slaⅰ)所呈递到细胞表面，被cd8+t细胞识别，从而激活机体的细胞免疫；因此，筛选和鉴定结合在slaⅰ分子上的asfv t细胞表位将为asf疫苗设计提供理论依据，深化对asfv蛋白的研究，对asf防控具有重要意义。

技术实现思路

1、为了解决现有技术中存在的问题，本发明第一方面提供了一种杂交瘤细胞，所述杂交瘤细胞为微生物保藏编号为cctcc no:c2024193的杂交瘤细胞；或者

2、微生物保藏编号为cctcc no:c2024193的杂交瘤细胞的传代细胞。

3、本发明第二方面提供了一种生物材料，所述生物材料是如下p1、p2、p3、p4、p5、p6、p7、p8和p9中的任一种；

4、p1：单克隆抗体

5、所述单克隆抗体保持对猪ⅰ类白细胞抗原或猪ⅰ类白细胞抗原的α3结构域的特异性结合活性；

6、所述单克隆抗体包括单克隆抗体重链和单克隆抗体轻链；

7、所述单克隆抗体重链包括重链cdr1、重链cdr2和重链cdr3；

8、所述单克隆抗体轻链包括轻链cdr1、轻链cdr2和轻链cdr3；

9、所述重链cdr1蛋白序列如seq id no.5所示；

10、所述重链cdr2蛋白序列如seq id no.7所示；

11、所述重链cdr3蛋白序列如seq id no.9所示；

12、所述轻链cdr1蛋白序列如seq id no.11所示；

13、所述轻链cdr2蛋白序列如seq id no.13所示；

14、所述轻链cdr3蛋白序列如seq id no.15所示；

15、p2：单克隆抗体重链与单克隆抗体轻链组合

16、所述单克隆抗体重链与单克隆抗体轻链组合保持对猪ⅰ类白细胞抗原或猪ⅰ类白细胞抗原的α3结构域的特异性结合活性；

17、所述单克隆抗体重链包括重链cdr1、重链cdr2、重链cdr3与功能性蛋白片段或惰性蛋白片段的氨基酸序列；

18、所述单克隆抗体轻链包括轻链cdr1、轻链cdr2、轻链cdr3与功能性蛋白片段或惰性蛋白片段的氨基酸序列；

19、所述重链cdr1蛋白序列如seq id no.5所示；

20、所述重链cdr2蛋白序列如seq id no.7所示；

21、所述重链cdr3蛋白序列如seq id no.9所示；

22、所述轻链cdr1蛋白序列如seq id no.11所示；

23、所述轻链cdr2蛋白序列如seq id no.13所示；

24、所述轻链cdr3蛋白序列如seq id no.15所示；

25、p3：抗体衍生物

26、所述抗体衍生物保持对猪ⅰ类白细胞抗原或猪ⅰ类白细胞抗原的α3结构域的特异性结合活性；

27、所述抗体衍生物的蛋白序列部分含有重链cdr1、重链cdr2、重链cdr3、轻链cdr1、轻链cdr2和轻链cdr3；

28、所述重链cdr1蛋白序列如seq id no.5所示；

29、所述重链cdr2蛋白序列如seq id no.7所示；

30、所述重链cdr3蛋白序列如seq id no.9所示；

31、所述轻链cdr1蛋白序列如seq id no.11所示；

32、所述轻链cdr2蛋白序列如seq id no.13所示；

33、所述轻链cdr3蛋白序列如seq id no.15所示；

34、所述抗体衍生物的形式选自：酶标抗体、荧光标记抗体、化学修饰抗体、抗体fab片段、猪源化抗体、单链抗体、嵌合单克隆抗体和改型单克隆抗体；

35、p4：rna组合

36、所述rna组合包括单克隆抗体重链rna和单克隆抗体轻链rna；

37、所述单克隆抗体重链rna能够被翻译得到p1或p2中所述的单克隆抗体重链；

38、所述单克隆抗体轻链rna能够被翻译得到p1或p2中所述的单克隆抗体轻链；

39、p5：基因组合

40、所述基因组合的编码序列能够编码p1或p2中所述的单克隆抗体重链以及p1或p2中所述的单克隆抗体轻链；

41、p6：基因表达盒组合

42、所述基因表达盒组合中的基因表达产物为p4中所述的rna组合；

43、p7：基因工程载体

44、所述基因工程载体中含有p6中所述的基因表达盒；

45、所述单克隆抗体重链rna和所述单克隆抗体轻链rna在一个或者两个载体中编码；

46、p8：细胞

47、所述细胞中含有p7中所述的基因工程载体；

48、所述基因工程载体的基因表达盒中的编码蛋白组成型表达或人工诱导型表达；

49、当所述单克隆抗体重链rna和所述单克隆抗体轻链rna在两个载体中编码时，所述两个载体在相同的细胞中或者不同的细胞中；

50、p8：组合物

51、所述组合物中含有p1中所述的单克隆抗体，p2中所述的单克隆抗体重链与单克隆抗体轻链组合，p3中所述的抗体衍生物，p4中所述的rna组合，p7中所述的基因工程载体或者p8中所述的细胞；以及

52、p9：试剂盒

53、所述试剂盒中含有p1中所述的单克隆抗体，p2中所述的单克隆抗体重链与单克隆抗体轻链组合，p3中所述的抗体衍生物，p4中所述的rna组合，p7中所述的基因工程载体或者p8中所述的细胞。

54、在一些实施方式中，在p1中，所述单克隆抗体是本发明第一方面所述的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。

55、在一些实施方式中，在p2中，所述功能性蛋白片段为用于分离纯化蛋白的标签肽和/或信号肽。

56、在一些实施方式中，所述猪ⅰ类白细胞抗原的蛋白序列如seq id no.1所示。

57、在一些实施方式中，所述猪ⅰ类白细胞抗原的α3结构域的蛋白序列如seq id no.3所示。

58、本发明第三方面提供了本发明第一方面所述的杂交瘤细胞或者本发明第二方面所述的生物材料在制备用于如下u1、u2或u3的制剂中的用途；

59、u1：在体内或体外识别猪ⅰ类白细胞抗原或猪ⅰ类白细胞抗原的α3结构域；

60、u2：在体内阻断猪ⅰ类白细胞抗原或猪ⅰ类白细胞抗原的α3结构域；以及u3：分离或鉴定病毒编码蛋白的t细胞表位。

61、在一些实施方式中，所述猪ⅰ类白细胞抗原的蛋白序列如seq id no.1所示。

62、在一些实施方式中，所述猪ⅰ类白细胞抗原的α3结构域的蛋白序列如seq id no.3所示。

63、在一些实施方式中，所述病毒为非洲猪瘟病毒。

64、本发明的进步之处在于：目前尚没有用于检测、募集slai分子的抗体的报道。本发明做制备的抗体填补上述空白，不仅可以用于slai类分子的检测，也能用于募集slai类分子，分析slai分子上所结合的多肽的序列，解析这些多肽在猪免疫调控中的作用。