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一种生产糖苷水解酶的工程菌及其制备方法和应用

2025-08-15 12:20:02 663次浏览

技术特征:

1.一种生产糖苷水解酶的工程菌,其特征在于,所述工程菌分泌糖苷水解酶需要信号肽引导;

2.根据权利要求1所述的生产糖苷水解酶的工程菌,其特征在于,所述tat途径信号肽spphod的氨基酸序列包括如seq id no:1所示的序列;

3.权利要求1或2所述的生产糖苷水解酶的工程菌的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:

4.根据权利要求3所述的生产糖苷水解酶的工程菌的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括设置所述信号肽的编码核酸和所述糖苷水解酶的编码核酸的启动子为phpaii、pspovg或psacb;

5.一种制备糖苷水解酶的方法,其特征在于,所述制备糖苷水解酶的方法包括:

6.根据权利要求5所述的制备糖苷水解酶的方法,其特征在于,所述发酵培养的培养基含有葡萄糖5-40g/l、胰蛋白胨1-12g/l、酵母浸粉2-20g/l、nacl 1-8g/l、na2hpo4·12h2o1.0-9.2g/l、k2hpo4 1.0-6.8g和mgso4·7h2o 0.2-3.0g/l。

7.一种糖苷水解酶,其特征在于,所述糖苷水解酶由权利要求5或6所述的制备糖苷水解酶的方法制备得到。

8.权利要求5或6所述的制备糖苷水解酶的方法或权利要求7所述的的糖苷水解酶在催化糖苷水解和/或糖基转移中的应用。

9.一种制备槐糖的方法,其特征在于,所述制备槐糖的方法包括:取权利要求7所述的糖苷水解酶,催化葡萄糖制备槐糖。

10.根据权利要求9所述的制备槐糖的方法,其特征在于,所述方法具体包括:


技术总结
本发明公开了一种生产糖苷水解酶的工程菌及其制备方法和应用。通过基因表达元件的筛选,并敲除宿主菌株胞外蛋白酶基因,构建了高效生产糖苷水解酶的工程菌,从发酵培养基、发酵罐放大培养等方面进行系统优化,显著提高了糖苷水解酶的生产水平,同时,通过初始培养基中无机盐离子的优化,使得发酵后,富含糖苷水解酶的发酵液可直接用于催化葡萄糖快速合成槐糖,实现槐糖的低成本生产,使其可以作为诱导物用于纤维素酶的工业化生产,本发明也为其它异源蛋白的高效表达提供表达载体构建方法和生产方法。

技术研发人员:彭小伟,聂珂珂
受保护的技术使用者:中国科学院过程工程研究所
技术研发日:
技术公布日:2024/11/26
文档序号 : 【 40124377 】

技术研发人员:彭小伟,聂珂珂
技术所有人:中国科学院过程工程研究所

备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
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彭小伟聂珂珂中国科学院过程工程研究所
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