一种5-酮基米尔贝霉素的产生菌及其应用的制作方法

1.一种冰城链霉菌(streptomyces bingchengensis sp.)hs-5-oxo-mil-116，其保藏编号为(cgmcc no.29877)。

2.根据权利要求1所述的冰城链霉菌hs-5-oxo-mil-116在生产5-酮基米尔贝霉素或含有5-酮基米尔贝霉素的药物组合物中的应用。

3.一种培养5-酮基米尔贝霉素孢子生长的方法，其特征在于，利用权利要求1所述的冰城链霉菌hs-5-oxo-mil-116在含有可同化的碳源和/或氮源、泡敌、琼脂的固体培养基进行耐受有氧生长。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述固体培养基中可同化的碳源选自葡萄糖、蔗糖、甘露醇、d-半乳糖、糊精、可溶性淀粉、麦芽糖之一或者上述物质的组合，优选甘露醇。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述固体培养基中可同化的氮源选自酵母抽提粉、麦芽抽提粉、黄豆饼粉、酶化水解酪蛋白、酸化水解酪蛋白、脱脂奶粉之一或者上述物质的组合，优选黄豆饼粉。

6.根据权利要求3-5任一项所述的方法，其特征在于，所述固体培养基含有甘露醇10～50g/l、黄豆饼粉10～50g/l、琼脂10～30g/l、泡敌1～10g/l，消前ph7.0～7.2，优选地，所述固体培养基含有甘露醇20g/l，黄豆饼粉20g/l，琼脂20g/l、泡敌5g/l，消前ph 7.2。

7.根据权利要求3～6任一项所述的方法，其特征在于，所述有氧生长的温度为26～30℃，优选28℃；所述有氧生长的时间为7～10天，优选8天。

8.一种制备5-酮基米尔贝霉素的方法，其特征在于，利用权利要求1所述的冰城链霉菌hs-5-oxo-mil-116在含有可同化的碳源和/或氮源、泡敌的营养培养基进行有氧发酵。

9.根据权利要8所述的方法，其特征在于，所述营养培养基中可同化的碳源选自可溶性淀粉、麦芽糊精、蔗糖、葡萄糖、甘油、果糖、山梨醇、甘露醇、麦芽糖、乳糖、半乳糖、木聚糖、工业糖蜜之一或者上述物质的组合，优选蔗糖。

10.根据权利要求8的所述的方法，其特征在于，所述营养培养基中可同化的氮源选自黄豆饼粉、酵母膏、麦芽膏、脱脂奶粉、酵母抽提粉、酵母蛋白胨、花生饼粉、酵母粉、玉米浆干粉、麸质粉、小麦胚芽片、大豆蛋白胨、玉米粉、豆粕之一或者上述物质的组合，优选黄豆饼粉、花生饼粉、麸质粉、或者玉米粉之一与酵母膏、麦芽膏的组合，进一步优选黄豆饼粉、酵母膏、麦芽膏的组合。

11.根据权利要求8-10任一项所述的方法，其特征在于，所述营养培养基还包括无机盐，所述无机盐选自硫酸锌、硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸铜、硫酸锰、磷酸氢二钾、氯化钾、氯化钠、氯化镁、氯化钴、钼酸钠、柠檬酸三钠、碳酸钙、氯化钙之一或者上述物质的组合，优选硫酸亚铁、磷酸氢二钾、碳酸钙、硫酸镁的组合。

12.根据权利要求8-11任一项所述的方法，其特征在于，所述营养培养基含有蔗糖、黄豆饼粉、麦芽膏、酵母膏、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、碳酸钙、泡敌；优选地，所述营养培养基含有蔗糖100～500g/l、黄豆饼粉10～50g/l、麦芽膏1～10g/l、酵母膏1～10g/l、硫酸亚铁0.01～0.1g/l、磷酸氢二钾0.1～1g/l、硫酸镁0.1～1g/l、碳酸钙1～10g/l、泡敌1～10g/l；进一步优选地，所述营养培养基含有蔗糖160g/l、黄豆饼粉20g/l、麦芽膏5g/l、酵母膏5g/l、硫酸亚铁0.05g/l、磷酸氢二钾0.5g/l、硫酸镁0.5g/l、碳酸钙3.0g/l、泡敌2g/l。

13.根据权利要求8～12任一项所述的方法，其特征在于，所述有氧发酵的温度为26～30℃，优选28℃；营养培养基的ph为6.0～8.0，优选6.8～7.2；有氧发酵的时间为240～400小时，优选264～312小时。