制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞和人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞群的方法

1.一种制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞的方法，

2.根据权利要求1所述的制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞的方法，其中所述方法包括在存在选自wnt经典途径激活剂、bmp4和vegf中的一种或多种的情况下，在所述人多能干细胞中强制表达nr5a1；然后悬浮培养2天至10天，随后进行贴壁培养的步骤。

3.根据权利要求1所述的制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞的方法，其中所述方法包括在存在选自wnt经典途径激活剂、bmp4和vegf中的一种或多种的情况下，在所述人多能干细胞中强制表达nr5a1；然后进行悬浮培养，直到所述人多能干细胞开始形成胚叶体，随后进行贴壁培养的步骤。

4.根据权利要求2或3所述的制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞的方法，其中所述贴壁培养步骤包括去除存在的wnt经典途径激活剂、bmp4和vegf，然后加入camp的步骤。

5.根据权利要求4所述的制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞的方法，其中所述方法包括在开始用camp处理后的第2天至第40天期间从培养系统中去除camp的步骤。

6.根据权利要求4所述的制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞的方法，其中所述贴壁培养步骤包括去除存在的wnt经典途径激活剂、bmp4和vegf，然后用毛喉素处理的步骤。

7.根据权利要求1所述的制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞的方法，其中，在存在选自wnt经典途径激活剂、bmp4和vegf的一种或多种的情况下的一种或多种存在下，人多能干细胞中强制表达nr5a1的步骤在能够形成50个细胞到20000个细胞的一个胚状体的培养装置上进行。

8.根据权利要求1所述的制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞的方法，其中人多能干细胞中强制表达nr5a1的步骤包括在四环素依赖性基因表达系统中使用tet-off(商标名)系统，所述tet-off系统在四环素或多西环素不存在的情况下强制表达nr5a1。

9.根据权利要求2或3所述的制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞的方法，其中所述方法包括在进行悬浮培养和贴壁培养后进一步进行悬浮培养的步骤。

10.根据权利要求1所述的制备人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞的方法，其中，从所述人多能干细胞到所述人多能干细胞衍生睾丸间质状细胞的分化诱导效率为80％或更高。

11.一种人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞，其通过权利要求1的方法制备。

12.根据权利要求11所述的人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞，其中所述人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞是连续产生睾酮至少60天的睾丸间质样细胞。

13.一种人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞，所述人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞是在权利要求11的人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞传代至少一次后获得的。

14.一种人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞群，包括权利要求11所述的人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞。

15.根据权利要求14所述的人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞群，其中所述人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞群包含80％或更多能够产生睾酮的睾丸间质样细胞。

16.根据权利要求14或15所述的人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞群，其中所述人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞群进行免疫隔离处理。

17.一种用于治疗与睾酮降低相关疾病的药物组合物，包含权利要求14或15所述的人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞群作为活性成分。

18.一种用于细胞移植的组合物，包含生物相容性膜，所述生物相容性膜上粘附有权利要求14或15所述的人多能干细胞衍生的睾丸间质样细胞群。

19.一种用于多能干细胞衍生的内分泌细胞移植的装置，包括用于将多能干细胞衍生的内分泌细胞植入活体的生物相容性膜。

20.根据权利要求19所述的用于多能干细胞衍生的内分泌细胞移植的装置，其中所述多能干细胞衍生的内分泌细胞是能够产生睾酮的人多能干细胞衍生的内分泌细胞。

21.根据权利要求20所述的用于多能干细胞衍生的内分泌细胞移植的装置，其中，能够产生睾酮的人多能干细胞衍生的内分泌细胞是权利要求11所述的人多干细胞衍生的睾丸间质样细胞。