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一种基于mCherry的筛选系统及其构建方法与应用

2025-03-20 13:40:07 70次浏览

技术特征:

1.一种基于mcherry的筛选系统,其特征在于,包括:表达载体a和表达载体b;

2.根据权利要求1所述的筛选系统,其特征在于,所述表达载体a的核苷酸序列如seqid no.3所示,所述表达载体b的核苷酸序列如seq id no.4所示。

3.一种如权利要求1~2任一项所述的筛选系统的构建方法,其特征在于,包括:

4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述mcherry-nsplit-linker1片段通过同源重组插入第一表达载体的编码框中;和/或,所述linker2-csplit-mcherry片段通过同源重组插入第二表达载体的编码框中。

5.一种如权利要求1~2任一项所述的筛选系统的应用,其特征在于,将所述筛选系统应用于细胞杂交体的筛选。

6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述细胞杂交体为裂殖酵母杂交体。

7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述将所述筛选系统应用于细胞杂交体的筛选的方法,包括:

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述荧光信号的激发波长为550~620nm,发射波长为590~650nm。


技术总结
本发明涉及生物技术领域,公开了一种基于mCherry的筛选系统及其构建方法与应用。所述筛选系统包括:表达载体A和表达载体B;表达载体A的编码框中包含mCherry‑Nsplit‑linker1片段,mCherry‑Nsplit‑linker1片段的序列如SEQ ID NO.1所示;表达载体B的编码框中包含linker2‑Csplit‑mCherry片段,linker2‑Csplit‑mCherry片段的序列如SEQ ID NO.2所示。将表达载体A和表达载体B分别转入不同的宿主细胞中,当宿主细胞发生杂交时,表达载体A和表达载体B能够通过linker1和linker2重组表达mCherry荧光蛋白,进而可以通过检测荧光信号筛选出发生杂交的宿主细胞。该筛选系统具有高度特异性且可视化,能够与高通量筛选技术结合使用,使得同时处理大量样本变得更加容易。此外,该筛选系统应用时操作简便且成本低廉,适用于各类实验室和生产场景。

技术研发人员:林良才,梁爽,刘高雯
受保护的技术使用者:天津科技大学
技术研发日:
技术公布日:2024/11/18
文档序号 : 【 40051690 】

技术研发人员:林良才,梁爽,刘高雯
技术所有人:天津科技大学

备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
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林良才梁爽刘高雯天津科技大学
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