用于冷冻食品抗生素检测方法及柔性表面增强拉曼基底制备方法

本发明属于光谱分析，尤其涉及一种用于冷冻食品抗生素检测方法及柔性表面增强拉曼基底制备方法。

背景技术：

1、随着抗生素的广泛应用，其残留检测成为食品安全、环境监测及临床检测中的重要环节。表面增强拉曼散射(sers)是一种痕量分析检测方法，具有灵敏度高、样品制备快速和应用领域广泛等优点。由于样品的性质和来源不同，基质组成的复杂程度也不同，而抗生素常常是痕量存在的，难以通过sers直接检测。

2、sers基底的选择对于高效检测至关重要，但目前的研究大多集中在刚性或不耐冻的凝胶材料，它们不适合直接检测不规则样品且在低温条件检测，其灵敏度受限。柔性sers基底因其卓越的机械性能、操作便捷性备受关注，其中aades(赖氨酸-乙二醇)辅助制备的ag-nps/gel aades凝胶柔性sers基底因其柔韧抗冻特性，是一种能应用于低温环境食品安全检测领域的材料。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种用于冷冻食品抗生素检测方法及柔性表面增强拉曼基底制备方法，制备的基底能够在-25℃低温条件下灵敏的间接检测冷冻食品表面的抗生素残留。

2、为实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现：

3、一种柔性表面增强拉曼基底制备方法，包括以下步骤：

4、1)在50～70℃温度下，赖氨酸与乙二醇以1:(15～25)的摩尔比搅拌混合，得到aades；

5、2)在50～90℃温度下，将0.3～0.5g明胶、0.085g硝酸银加入到4～6ml的aades中，持续搅拌直至溶液为黑褐色凝胶，并保持不变，用乙醇冲洗黑褐色凝胶，得到表面增强拉曼基底。

6、一种利用权利要求1所述的表面增强拉曼基底实现的用于冷冻食品抗生素检测方法，包括以下步骤：

7、1)将表面增强拉曼基底用浓度为1×10-5mol/l的罗丹明6g乙醇溶液浸泡8～12小时，随后加入浓度为1×10-5～1×10-11mol/l的抗生素溶液；

8、2)将步骤1)得到的溶液滴加至食品表面，再在其上紧贴表面增强拉曼基底；

9、3)在-25～-20℃下冷冻5小时，取出附有待测液体的表面增强拉曼基底进行拉曼光谱采集；

10、所述的拉曼光谱采集用激发器采集，激发器使用532nm激发光，波长范围500-1800cm-1。

11、所述的抗生素溶液为红霉素胺、氨苄青霉素、青霉素、氯霉素、环丙沙星及诺氟沙星溶液中的一种以上。

12、步骤2)所述的表面增强拉曼基底的尺寸为0.5×0.5cm2，厚度为1mm以下；滴加至食品表面的溶液为10μl。

13、所述的拉曼光谱采集过程中，凝胶置于冰块上。

14、步骤1)中，加入抗生素溶液前，对浸泡在罗丹明6g乙醇溶液中的表面增强拉曼基底用乙醇和水冲洗。

15、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

16、1、本发明提供了一种用于冷冻食品抗生素检测方法及柔性表面增强拉曼基底制备方法，采用原位化学法形成了aades凝胶与纳米银复合纳米材料，利用该复合材料的拉曼增强效应，实现对低温下多种抗生素的超灵敏拉曼光谱检测。

17、2、本发明的柔性表面增强拉曼基底使用aades凝胶制备，使得柔性表面增强拉曼基底具有良好的机械柔韧性及耐冻性，能够满足低温检测要求。

18、3、将该表面增强拉曼基底应用在检测冷冻肉类中，可检测不同类型的抗生素残留，能高效检测不同曲面，低温下检测抗生素在拉曼光谱中具有灵敏度高的特点。

1.一种柔性表面增强拉曼基底制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.一种利用权利要求1所述的表面增强拉曼基底实现的用于冷冻食品抗生素检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的一种用于冷冻食品抗生素检测方法，其特征在于，所述的抗生素溶液为红霉素胺、氨苄青霉素、青霉素、氯霉素、环丙沙星及诺氟沙星溶液中的一种以上。

4.根据权利要求2所述的一种用于冷冻食品抗生素检测方法，其特征在于，步骤2)所述的表面增强拉曼基底的尺寸为0.5×0.5cm2，厚度为1mm以下；滴加至食品表面的溶液为10μl。

5.根据权利要求2所述的一种用于冷冻食品抗生素检测方法，其特征在于，所述的拉曼光谱采集过程中，凝胶置于冰块上。

6.根据权利要求2所述的一种用于冷冻食品抗生素检测方法，其特征在于，步骤1)中，加入抗生素溶液前，对浸泡在罗丹明6g乙醇溶液中的表面增强拉曼基底用乙醇和水冲洗。