方格星虫来源的外囊泡在制备抗骨质疏松药物中的应用

本发明涉及生物医药，具体而言，涉及方格星虫来源的外囊泡在制备抗骨质疏松药物中的应用。

背景技术：

1、骨质疏松是一种常见的骨骼疾病，其临床表现为骨密度减少、骨组织变薄和微结构异常，从而导致骨头变得脆弱和易碎；这种疾病使得骨骼容易发生骨折，尤其是在手腕、髋部和脊椎等部位。骨质疏松常见的引发原因包括老化、营养不良、缺乏运动、遗传因素、内分泌失调（如更年期）、长期服用某些药物（如激素）、吸烟和过量饮酒等。目前在临床上对该疾病尚无有效干预和预防手段。

2、细胞外囊泡是细胞分泌到细胞外具有不同大小的脂质膜囊泡。这些囊泡能够将各种分子从产生细胞运送到目标细胞。细胞外囊泡的三种主要亚型是微泡、外泌体和凋亡小体，在不同类型的细胞外囊泡中，外囊泡是存在于不同生物体中的纳米大小的囊泡。越来越多的证据表明，外囊泡在细胞间的信息交流中发挥着重要作用，影响着生理和病理过程，已被用作纳米治疗剂、药物传递载体和生物标志物而得到广泛的研究。目前人们主要集中在研究哺乳动物和植物来源的细胞外囊泡，而星虫类来源的外囊泡其组成和功能未见有报道。

3、方格星虫又称沙虫，隶属星虫动物门、方格星虫属，是无节、蠕虫状的海产体腔动物，暖水性。我国多种医学著作中记载了其食用和药用价值，有些地区用其代替中药冬虫夏草，主治骨潮热、阴虚盗汗、胸闷、肺痨咳嗽、痰多及牙肿痛等症，但将方格星虫来源的外囊泡用于预防和治疗骨质疏松疾病的研究未见报道。

技术实现思路

1、本发明解决的技术问题是提供方格星虫来源的外囊泡在制备抗骨质疏松药物中的应用。

2、为解决上述技术问题，本发明提供了方格星虫来源的外囊泡在制备抗骨质疏松药物中的应用；所述抗骨质疏松药物用作骨髓间充质干细胞成骨分化诱导剂的应用。

3、可选地，所述方格星虫来源的外囊泡的制备方法包括：

4、步骤s1、获取方格星虫体腔液，将所述方格星虫体腔液与pbs缓冲液混合后，过滤处理，得到混合液；

5、步骤s2、将所述混合液进行第一次离心处理，提取上清液，过滤处理，得到第一上清液；

6、步骤s3、将所述第一上清液进行第二次离心处理，提取上清液，使用细菌筛进行过滤处理，得到第二上清液；

7、步骤s4、将所述第二上清液进行第三次离心处理，所得沉淀即为方格星虫来源的外囊泡。

8、可选地，所述步骤s1中，所述方格星虫体腔液与所述pbs缓冲液的体积之比为1：（2-5）。

9、可选地，所述步骤s2中，所述第一次离心处理的转速为2000-3000g，时间为20-30min。

10、可选地，所述步骤s3中，所述第二次离心处理的转速为9500-10500g，时间为30-40min。

11、可选地，所述步骤s4中，所述第三次离心处理的转速为95000-105000g，时间为60-70min。

12、可选地，所述步骤s1中，所述过滤处理采用70目的滤网进行。

13、可选地，所述步骤s3中，所述细菌筛的孔径为0.45μm。

14、可选地，所述步骤s2中，所述过滤处理包括：将上清液依次经过孔径为70μm、40μm筛网过滤。

15、可选地，所述方格星虫来源的外囊泡的粒径为129nm。

16、与现有技术相比，本发明采用超高速离心法获得方格星虫来源的外囊泡，并通过实验证明，方格星虫来源的外囊泡具有优异的促进人骨髓间充质干细胞（hbmscs）成骨分化的效果，并可显著诱导成骨分化的标志蛋白上调表达，可作为骨髓间充质干细胞成骨分化诱导剂，能够应用于制备抗骨质疏松药物。

1.方格星虫来源的外囊泡在制备抗骨质疏松药物中的应用；所述抗骨质疏松药物用作骨髓间充质干细胞成骨分化诱导剂的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述方格星虫来源的外囊泡的制备方法包括：

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤s1中，所述方格星虫体腔液与所述pbs缓冲液的体积之比为1：（2-5）。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤s2中，所述第一次离心处理的转速为2000-3000g，时间为20-30min。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤s3中，所述第二次离心处理的转速为9500-10500g，时间为30-40min。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤s4中，所述第三次离心处理的转速为95000-105000g，时间为60-70min。

7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤s1中，所述过滤处理采用70目的滤网进行。

8.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤s3中，所述细菌筛的孔径为0.45μm。

9.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤s2中，所述过滤处理包括：将上清液依次经过孔径为70μm、40μm筛网过滤。

10.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述方格星虫来源的外囊泡的粒径为129nm。