一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法与流程

本发明涉及四氢甲基嘧啶羧酸，具体为一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法。

背景技术：

1、根据中国专利网已公开的专利，专利名称为：一种四氢甲基嘧啶羧酸发酵过程诱导剂的加入方法，专利号为：202310191372.6，本发明涉及氨基酸衍生物生产技术领域，并提供一种四氢甲基嘧啶羧酸发酵过程诱导剂的加入方法，四氢甲基嘧啶羧酸发酵工艺流程包含斜面培养、种子瓶培养、种子罐培养、发酵罐培养，具体步骤如下：先进行斜面配方的制备；然后在种子瓶中培养种子培养基；将种子培养基转移至种子罐中培养，在种子罐进行培养时取样测od值、ph值、残糖值；最后将种子罐中的培养物转移至发酵罐中进行培养，测量发酵培养罐中od含量，发酵培养罐中od含量到达50及以上时加入诱导剂进行诱导，进行诱导剂诱导的同时将发酵培养罐中的温度调节至26-30℃诱导4h，在8h、12h、16h分别向培养罐中加入诱导剂进行诱导并测量发酵培养罐中的发酵物含量，最后得出最佳诱导时间；而上述中的四氢甲基嘧啶羧酸通过发酵法制备时过程过于复杂，并且成本较高，产物得到率也较低，影响了制备的质量。

2、因此，需要对四氢甲基嘧啶羧酸进行设计改造，有效的防止其制备时过程过于复杂，并且成本较高，产物得到率也较低的现象。

技术实现思路

1、为解决上述背景技术中提出的问题，本发明的目的在于提供一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法，具备可以高效制备的优点，解决了制备时过程过于复杂，并且成本较高，产物得到率也较低的问题。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法，包括步骤a）准备阶段；步骤b）活化菌种；步骤c）种子培养；步骤d）发酵处理；步骤e）提取纯化；步骤f）干燥处理；步骤g）包装处理；

3、步骤a）准备阶段：首先准备斜面配方、种子培养基和发酵培养基，种子培养基一般包括葡萄糖、酵母蛋白胨、酵母提取物、氯化钠等，用于在种子罐中进行培养，发酵培养基则包括葡萄糖、磷酸氢二铵、磷酸二氢铵、氯化钾、七水硫酸镁、酵母蛋白胨、酵母提取物以及微量元素母液等；

4、步骤b）活化菌种：然后将大肠杆菌接种至固体平板培养基上，得到活化菌；

5、步骤c）种子培养：将活化菌接种至种子培养基中，在种子罐中进行培养，得到种子培养液，种子培养基的配方和条件（如温度、ph值等）需要精心选择和优化，以确保菌种的良好生长和代谢；

6、步骤d）发酵处理：将种子培养液接种至发酵培养基中，在发酵罐中进行培养，在发酵过程中，需要加入诱导剂和补料培养基，以促进四氢甲基嘧啶羧酸的合成，同时，发酵罐内的温度、ph值、搅拌速度等条件也需要严格控制，以保证发酵过程的顺利进行；

7、步骤e）提取纯化：经过一段时间的发酵后，发酵液中会积累一定量的四氢甲基嘧啶羧酸，此时，需要将发酵液进行提取和纯化，以得到高纯度的四氢甲基嘧啶羧酸产品，具体的提取和纯化方法可以根据实际需求和条件进行选择和优化；

8、步骤f）干燥处理：将纯化后的四氢甲基嘧啶羧酸进行干燥处理，去除其中的水分和杂质；

9、步骤g）包装处理：然后，将干燥后的产品进行包装和储存，以便后续使用或销售。

10、作为本发明优选的，所述准备阶段时需要在无菌环境下进行分拣，并且各个培养基都需要按照比例进行调配。

11、作为本发明优选的，所述活化菌种时工作人员需要佩戴防护服和护目镜，且在无菌环境下进行。

12、作为本发明优选的，所述种子培养时得到的种子培养液需要放在玻璃容器内进行保存，避免接触空气。

13、作为本发明优选的，所述发酵处理时在适当的温度、酸碱度、通气等条件下进行发酵，控制发酵过程中的各项参数以促进thmpc的产生。

14、作为本发明优选的，所述提取纯化时采用结晶、溶剂洗涤、柱层析等步骤进行操作处理。

15、作为本发明优选的，所述干燥处理时需要反复干燥最少三次，且干燥温度需要根据周围温度进行实时调式。

16、作为本发明优选的，所述包装处理时采用耐腐蚀高强度的容器进行包装，确保了产品的质量。

17、与现有技术相比，本发明的有益效果如下：

18、1、本发明四氢甲基嘧啶羧酸改变了传统诱导培养的方式，采用了发酵法制备的方式，其制备过程就不会过于复杂，成本也不会较高，产物得到率也不会很低，更不会影响制备的质量，并且通过准备阶段、活化菌种、种子培养、发酵处理、提取纯化、干燥处理和包装处理对四氢甲基嘧啶羧酸进行发酵制备，同时在每个步骤之间都要进行清洁处理，使其更加环保，从而具备高效制备的效果。

1.一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法，其特征在于：包括步骤a）准备阶段；步骤b）活化菌种；步骤c）种子培养；步骤d）发酵处理；步骤e）提取纯化；步骤f）干燥处理；步骤g）包装处理；

2.根据权利要求1所述的一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法，其特征在于：所述准备阶段时需要在无菌环境下进行分拣，并且各个培养基都需要按照比例进行调配。

3.根据权利要求1所述的一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法，其特征在于：所述活化菌种时工作人员需要佩戴防护服和护目镜，且在无菌环境下进行。

4.根据权利要求1所述的一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法，其特征在于：所述种子培养时得到的种子培养液需要放在玻璃容器内进行保存，避免接触空气。

5.根据权利要求1所述的一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法，其特征在于：所述发酵处理时在适当的温度、酸碱度、通气等条件下进行发酵，控制发酵过程中的各项参数以促进thmpc的产生。

6.根据权利要求1所述的一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法，其特征在于：所述提取纯化时采用结晶、溶剂洗涤、柱层析等步骤进行操作处理。

7.根据权利要求1所述的一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法，其特征在于：所述干燥处理时需要反复干燥最少三次，且干燥温度需要根据周围温度进行实时调式。

8.根据权利要求1所述的一种通过发酵法制备四氢甲基嘧啶羧酸的方法，其特征在于：所述包装处理时采用耐腐蚀高强度的容器进行包装，确保了产品的质量。