一种植物内生枝孢菌HNU21及其应用

本发明属于微生物，涉及一种植物内生枝孢菌hnu21及其应用。

背景技术：

1、植物内生菌（endophyte）是一定阶段或全部阶段生活于植物的组织和器官内部的真菌或细菌，普遍存在于高等植物中，木本、草本植物，单子叶植物和双子叶植物内均有内生细菌，其已成为生物防治中有潜力的微生物农药、增产菌或作为潜在的生防载体菌而加以利用。

2、其中，内生真菌对药用植物的生长发育具有重要作用，它们能够产生植物生长所需的调节剂类物质，增强植株对微量元素的吸收，促进植物的生长发育。此外，内生真菌还能提高宿主植物的生理活性指标和抗逆性，包括对抗生物胁迫和非生物胁迫。在药用植物的次生代谢产物和活性物质的调节方面，内生真菌通过影响和调节药用植物次生代谢产物的合成、含量及累积，直接或间接地影响药用植物活性物质的分布和含量。

3、从植物中提取内生真菌对于理解内生真菌与植物之间的相互作用、发掘新的药物成分等方面具有重要意义。例如，紫杉醇是一种从红豆杉属植物中提取的珍贵抗癌药物，具有显著的治疗效果；然而，红豆杉生长缓慢且为濒危物种，传统的提取方法不可持续，市场需求的增长使得寻找替代生产方法变得迫切，因此，科学家们已经开始探索利用内生真菌发酵生产紫杉醇的方法，以解决药源不足的问题。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种植物内生枝孢菌hnu21及其应用。

2、第一方面，本发明提供了一种从红豆杉属植物东北红豆杉中分离纯化得到的内生真菌，分类学命名为枝孢菌属 cladosporium sp. hnu21，该菌株保藏编号为cctcc no：m2024232，保藏日期2024年1月26日，保藏单位：中国典型培养物保藏中心（cctcc），保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号；其its序列如seq id no.1所示。

3、第二方面，本发明提供上述植物内生枝孢菌hnu21的细胞培养物、细胞代谢产物、细胞培养上清或细胞裂解产物。

4、第三方面，本发明提供一种用于提高东北红豆杉叶片的紫杉醇含量的组合物，其包含选自下组的成分：上述植物内生枝孢菌hnu21；或上述细胞培养物、细胞代谢产物、细胞培养上清或细胞裂解产物。

5、第四方面，本发明提供了一种上述植物内生枝孢菌hnu21的应用，可以提高东北红豆杉叶片的紫杉醇含量以及紫杉醇合成通路关键基因的表达量。

6、进一步地，所述应用具体为：将植物内生枝孢菌hnu21的孢子液喷洒于东北红豆杉苗，从而实现提高东北红豆杉针叶中紫杉醇的含量；

7、所述孢子液由以下步骤制得：将植物内生枝孢菌hnu21接种到pda固体培养基（马铃薯葡萄糖肉汤培养基，potato dextrose broth）中，在温度25-30℃培养箱中培养5~7天，待孢子生成，减压过滤获得含孢子溶液，即为孢子液。

8、本发明的有益效果在于：

9、本发明提供了一种植物内生枝孢菌hnu21，所述植物为东北红豆杉，该菌能够用于促进东北红豆杉中紫杉醇成分的生物合成及合成相关基因表达，提高提高紫杉醇含量，进而为药源不足的问题提供一种有效的解决方式，具有较高的应用价值；同时，本发明还提供了植物内生枝孢菌hnu21的细胞培养物、细胞代谢产物、细胞培养上清或细胞裂解产物，以及制备包含植物内生枝孢菌hnu21孢子液的方法，通过将过滤的孢子液喷洒东北红豆杉苗小枝，可有效促进紫杉醇合成。相较于现有的真菌诱导子，本发明所述内生枝孢菌hnu21孢子液对紫杉醇含量的提高达到1.5倍以上，具有较好的应用价值。

1.一种植物内生枝孢菌hnu21，其特征在于，其分类学命名为枝孢菌（cladosporium sp.），菌株名为hnu21，保藏编号为cctcc no：m2024232，保藏日期2024年1月26日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。

2.一种用于提高东北红豆杉叶片的紫杉醇含量的组合物，其特征在于，包含：权利要求1所述的植物内生枝孢菌hnu21，或其细胞培养物、细胞代谢产物、细胞培养上清或细胞裂解产物。

3.如权利要求1所述的植物内生枝孢菌hnu21在提高东北红豆杉叶片的紫杉醇含量中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，将植物内生枝孢菌hnu21的孢子液喷洒于东北红豆杉苗；

5.如权利要求1所述的植物内生枝孢菌hnu21在提高紫杉醇合成通路关键基因的表达量中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，将植物内生枝孢菌hnu21的孢子液喷洒于东北红豆杉苗；