S-LAM-PCR建库方法及其应用与流程
技术特征:
1.一种s-lam-pcr建库的方法,其特征在于,所述方法包括:
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括:
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,a)中使用超声打断宿主dna;
4.如权利要求1-3任一项所述的方法,其特征在于,b)中所述生物素标记引物为5-ltr1-r,所述5-ltr1-r具有如seq id no:2所示的核苷酸序列;
5.如权利要求1-4任一项所述的方法,其特征在于,c)中使用链霉亲和素磁珠对b)中的线性扩增片段进行捕获;和/或,第二链合成使用随机引物。
6.如权利要求1-5任一项所述的方法,其特征在于,d)中所述接头为y型不对称接头。
7.如权利要求1-6任一项所述的方法,其特征在于,e)中所述引物为5-ltr1-r,所述5-ltr1-r具有如seq id no:2所示的核苷酸序列;和/或,
8.如权利要求1-7任一项所述的方法,其特征在于,f)中所述引物为5-ltr2-r,所述5-ltr2-r具有如seq id no:4所示的核苷酸序列;和/或,
9.一种慢病毒载体整合位点分析的方法,其特征在于,所述方法包括:
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,根据确定的整合位点判断以慢病毒载体为递送载体的基因与细胞治疗药物的安全性。
技术总结
本发明公开了S‑LAM‑PCR建库方法及其应用。本发明提供的S‑LAM‑PCR建库方法,通过使用超声打断克服了酶切打断的偏好性,使用PCR扩增试剂盒及减少线性扩增循环数以缩短试验周期,线性扩增及两轮巢式PCR提高了本方法的灵敏度。
技术研发人员:周长慧,常艳,何伟伟,陈建军,崔文腾,方雅励
受保护的技术使用者:上海益诺思生物技术股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/12/12
文档序号 :
【 40315120 】
技术研发人员:周长慧,常艳,何伟伟,陈建军,崔文腾,方雅励
技术所有人:上海益诺思生物技术股份有限公司
备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
声 明 :此信息收集于网络,如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们,我们会在第一时间删除
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