一种螺甾烷型甾体生物碱的制备方法及抗肠炎的应用

本发明属于生物医药，一种螺甾烷型甾体生物碱的制备方法及抗肠炎的应用。

背景技术：

1、炎症性肠病(inflammatorybowel disease，ibd)，是一种主要累及胃肠道的非特异性、慢性、复发性、炎症性疾病，主要症状为腹痛抽筋、直肠疼痛、直肠出血，可能出现中毒性巨结肠、肠穿孔、重度脱水、癌变等严重并发症。ibd主要包括溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis，uc)和克罗恩病(crohn disease，cd)。ibd的发病率在西方国家趋于稳定，但是在新兴工业化国家处于快速增长阶段。研究表明遗传基因、环境、免疫系统、肠道菌群之间的改变是导致ibd发展的主要因素。目前ibd的主要治疗手段是药物治疗，包括抗生素、免疫调节剂、氨基水杨酸盐、糖皮质激素、生物制剂等，但长期服用极易产生耐药性及严重不良反应，包括肝毒性以及骨髓毒性、肾毒性、骨坏死、白内障、糖尿病、高血压等。目前国内已开展中西医结合的治疗方法，西医以快速控制疾病发展为目标，中医以后续巩固为主。天然产物不仅具有良好的抗炎效果，还具有较高的安全性、副作用少等优点。

2、螺甾烷型生物碱(spirosolane alkaloid)广泛存在于茄科植物中，主要包含澳洲茄胺(solasodine)类，西红柿烯胺(tomatidine)类，西红柿登醇(tomatidenol)类。据报道螺甾烷型生物碱类物质在体外及体内实验中表现出强抗肿瘤及抗炎活性，可降低炎症模型il-1β、il-6等促炎细胞因子的含量，抑制no的产生。前期研究表明新鲜龙葵果汁可缓解溃疡性结肠炎病症，且其主要成分为螺甾烷型生物碱类物质，但其部分化合物结构及抗肠炎活性并未见报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于阐明一种螺甾烷型甾体生物碱的制备方法及抗肠炎的应用，为炎症反应提供一种潜在安全药物。

2、为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、一种螺甾烷型甾体生物碱的制备方法及抗肠炎的应用。

4、本技术方案的原理以及优点在于：

5、发明人进行了大量的实验验证探究了螺甾烷型甾体生物碱propanediolsolaoiate的制备方法及抗肠炎的应用，具体如下：

6、(1)螺甾烷型甾体生物碱propanediol solaoiate的制备方法：通过ods反相柱及凝胶柱分离纯化新鲜龙葵果汁，通过显色反应、高分辨质谱、1h nmr、13c nmr确定得到一种螺甾烷型甾体生物碱化合物。

7、(2)一种螺甾烷型甾体生物碱propanediol solaoiate的结构鉴定：通过显色反应、质谱、1h nmr、13c nmr、hsqc、hmbc、1h-1h cosy、roesy对螺甾烷型甾体生物碱的结构进行鉴定。

8、(3)一种螺甾烷型甾体生物碱propanediol solaoiate体外抗炎活性的评价：使用lps/ifn-γ诱导巨噬细胞raw264.7极化，通过dcfh-da探针及elisa试剂盒检测此螺甾烷型甾体生物碱对巨噬细胞ros和il-1β分泌的影响。

9、(4)一种螺甾烷型甾体生物碱propanediol solaoiate对dss构建的ibd模型小鼠的影响：首先，统计小鼠的体重变化和生存期。其次，比较各组小鼠结肠长度、脾脏指数及结肠组织形态。最后，检测各组小鼠血清的炎症因子含量。

10、与现有技术相比，本技术方案具有以下有益效果。

11、本发明首次报道了一种螺甾烷型甾体生物propanediol solaoiate结构及制备方法。另外，本发明首次报道了此螺甾烷型甾体生物碱可提高葡聚糖硫酸钠盐构建溃疡性结肠炎小鼠的生存状态，缓解结肠长度变短及肠道坏死出血的情况，下调血清中促炎因子il-1β、tnf-α的含量。上述发现可提供一种肠炎的治疗药物，为进一步研究溃疡性结肠炎的发病提供了新的思路；同时，此螺甾烷型甾体生物碱propanediol solaoiate可应用于新型的抗溃疡性结肠炎的药物筛选和测试中，为开发出新型的治疗肠炎药物提供了指导。

1.化合物在制备抗肠炎产品中的应用，所述化合物制备方法如下：以新鲜龙葵果汁为原料，使用ods-aq-hg反相柱及凝胶柱分离纯化得到。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：命名为(1s,2)-propanediol(3β，12β，22α，25r)-3，12-dihydroxy-siprosol-5-en-27-ate-12-o-beta-d-glucopyranosyl-(1-2)-[o-alpha-l-rhamnopyranosy l-(1-3)]-o-alpha-l-mannopyranosyl，简称propanediolsolaoiate。结构如下

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：化合物propanediol solaoiate对极化后巨噬细胞促炎物质的分泌具有抑制作用。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：化合物propanediol solaoiate可预防或/和治疗肠炎。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：化合物propanediol solaoiate的受试者包括人、猫、狗、猪、马或鸡。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：巨噬细胞为raw264.7细胞株。

7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：促炎物质包括ros、il-1β等。

8.包含一种或多种权利要求2中所述化合物或其可药用的盐与可药用载体的药物。

9.如权利要求2及8所述的用途，其中所述药物是以口服方式给药：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、泡腾片剂、舌下片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、微胶囊剂、微囊剂、微球剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂、口服液、混悬液、溶液以及缓释或控释制剂。

10.如权利要求2及8所述的用途，其中所述药物是以吸入方式给药：气雾剂以及缓释或控释制剂。

11.如权利要求2及8所述的用途，其中所述药物是以静脉方式给药：注射剂、注射乳剂、冻干粉针以及缓释或控释制剂。