一株金耳菌株DZHSSJE001及其工厂化栽培方法与流程

本发明涉及生物，具体涉及一株金耳菌株dzhssje001及其工厂化栽培方法。

背景技术：

1、金耳(naematelia aurantialba(bandoni&m.zang)millanes&wedin)是耳包革科、耳包革属真菌。担子果大型，半球形至不定型块状，全体呈脑状至分裂为数个具深沟槽而粗厚的裂瓣，直径3-12厘米，高2-8厘米。子实层遍生外露表层，为一宽广疏松包含着担子的区域；原担子初椭圆形至卵形；成熟下担子球形、近球形，稀有梨形至具短柄状基部，长13-25微米，宽11.5-19.5皮米。

2、金耳子实体由毛韧革菌和金耳菌丝组成，金耳孢子在pda上多以芽殖方式生长，目前金耳生产多使用金耳固体种与革菌固体种结合接种、金耳固体种与革菌液体种结合、金耳固体种直接做液体菌种接种菌棒等方式，前两种方式金耳固体种用量大，且菌种不稳定易造成批量污染或子实体发育不良等问题。金耳固体种直接做液体菌种方式，接种后金耳出现时间不一致，出菇管理难度大，且菌种传代易退化，菌种无法进行长时间保存，工厂化生产批次间质量不稳定。

3、鉴于上述缺陷，本发明创作者经过长时间的研究和实践终于获得了本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于解决金耳菌株工厂化栽培质量不佳的问题，提供了一株金耳菌株dzhssje001及其工厂化栽培方法。

2、为了实现上述目的，本发明公开了一株金耳菌株dzhssje001，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号分别为cgmcc no.41289，its序列如seqno.1所示。

3、本发明还公开了上述金耳菌株dzhssje001的工厂化栽培方法，包括以下步骤：

4、s1，培养基配制：把玉米粉、磷酸二氢钾、硫酸镁加入水中，用电磁炉加热，搅拌至粘稠状，分别取500ml，装入1000ml锥形瓶中，硅胶塞封口，121℃高压蒸汽灭菌30min，灭菌结束后放于超净工作台凉至25℃以下；

5、s2，接种培养：从试管或平板上取1cm2大小的金耳孢子，接种于25℃以下的步骤s1中的培养基中，接种后，将锥形瓶放于摇床，转速150r/min、温度18-22℃、避光培养5天。培养结束后可以用于生产；

6、s3，锥形瓶配制：土豆去皮称重200g，水煮开放入土豆，保持沸腾20min，关火加入葡萄糖，分装2个1000ml锥形瓶，各500ml，硅胶塞封口，121℃高压蒸汽灭菌30分钟，灭菌结束后放于超净工作台凉至25℃以下；

7、s4，从试管或平板上取4cm2大小的革菌，接种于25℃以下的步骤s3中的锥形瓶中，培养后进行发酵罐接种；

8、s5，将发酵罐灭菌后，待温度降至20℃，等待15min进行接种，取浸泡95°酒精的棉条绕接种口一圈，点燃，快速拧开接种口盖，锥形瓶口在火焰上消毒10s，然后将锥形瓶中革菌液体菌种倒入发酵罐，剩余10ml检测，将剩余菌种倒入灭菌过的平板上，检测是否有污染，接种口盖子在火焰上消毒10～15s，快速拧紧，22℃培养4天；

9、s6，将革菌液体菌种4～5ml注射入菌棒，随后将金耳孢子在同一位置注射入0.1～0.3ml；

10、s7，接种完以后的菌棒放于22℃房间内，避光，控制二氧化碳浓度低于1000ppm，养菌，养菌30-35天后，接种处原基开始凸起，此时用利刃开口，出菇管理后进行采收。

11、所述步骤s1中，培养基的配方为：玉米粉5g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁1g、水1l，所述玉米粉过筛80目。

12、所述步骤s3中，锥形瓶配方为：土豆200g、葡萄糖20g、水1l。

13、所述步骤s5中，发酵罐配方为：土豆粉0.5％、酵母粉0.5％、葡萄糖2％、磷酸二氢钾0.15％、硫酸镁0.15％。

14、所述步骤s6中，菌棒的配方为：阔叶木屑88％、麦麸11％、石膏1％，制作过程如下：按配方将材料加水拌匀后，调整湿度58％-60％，装袋，灭菌后冷却至25℃以下可以进行接种。

15、所述步骤s7中，养菌的条件为：接种完以后的菌棒放于22℃房间内，避光，控制二氧化碳浓度低于1000ppm。

16、所述步骤s7中，出菇管理具体过程如下：开好口的菌棒，转移至出菇房，前15天控制湿度88-95％，二氧化碳浓度低于1000ppm，后15天增加光照，光照强度600-900lx，促进其转色。

17、所述步骤s7中，采收具体过程如下：金耳开口25-30天，颜色为金黄色，外形圆润饱满时，使用利刃割下，放于周转筐内。

18、与现有技术比较本发明的有益效果在于：

19、本发明中的金耳孢子制作简单，且接种量容易控制，进而金耳在菌棒发育成子实体时，时间一致，大小一致，工厂化出菇管理更加方便。金耳固体种直接做液体菌种，液体中含有金耳菌丝和革菌菌丝，接种到菌棒的金耳菌丝数量影响金耳在菌棒上发育成子实体的时间大小，通过金耳孢子接种时控制金耳孢子的量，就可以使其发育时间、大小一致。

1.一株金耳菌株dzhssje001，其特征在于，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号分别为cgmcc no.41289，its序列如seq no.1所示。

2.一种如权利要求1所述的金耳菌株dzhssje001的工厂化栽培方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的一种金耳菌株dzhssje001的工厂化栽培方法，其特征在于，所述步骤s1中，培养基的配方为：玉米粉5g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁1g、水1l，所述玉米粉过筛80目。

4.如权利要求2所述的一种金耳菌株dzhssje001的工厂化栽培方法，其特征在于，所述步骤s3中，锥形瓶配方为：土豆200g、葡萄糖20g、水1l。

5.如权利要求2所述的一种金耳菌株dzhssje001的工厂化栽培方法，其特征在于，所述步骤s5中，发酵罐配方为：土豆粉0.5％、酵母粉0.5％、葡萄糖2％、磷酸二氢钾0.15％、硫酸镁0.15％。

6.如权利要求2所述的一种金耳菌株dzhssje001的工厂化栽培方法，其特征在于，所述步骤s6中，菌棒的配方为：阔叶木屑88％、麦麸11％、石膏1％，制作过程如下：按配方将材料加水拌匀后，调整湿度58％-60％，装袋，灭菌后冷却至25℃以下可以进行接种。

7.如权利要求2所述的一种金耳菌株dzhssje001的工厂化栽培方法，其特征在于，所述步骤s7中，养菌的条件为：接种完以后的菌棒放于22℃房间内，避光，控制二氧化碳浓度低于1000ppm。

8.如权利要求2所述的一种金耳菌株dzhssje001的工厂化栽培方法，其特征在于，所述步骤s7中，出菇管理具体过程如下：开好口的菌棒，转移至出菇房，前15天控制湿度88-95％，二氧化碳浓度低于1000ppm，后15天增加光照，光照强度600-900lx，促进其转色。

9.如权利要求2所述的一种金耳菌株dzhssje001的工厂化栽培方法，其特征在于，所述步骤s7中，采收具体过程如下：金耳开口25-30天，颜色为金黄色，外形圆润饱满时，使用利刃割下，放于周转筐内。