一种NAA多肽-喜树碱偶联物及其制备方法和应用

本发明涉及生物，具体涉及一种naa多肽-喜树碱偶联物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、喜树碱是美国科学家monroe e.wall在1966年从从喜树中首次分离得到的生物碱，目前喜树碱及其衍生物的抗肿瘤活性在生物碱中尤为显著，具有极高的开发前景。且喜树碱作为拓扑异构酶抑制剂，它能够靶向到肿瘤细胞的拓扑异构酶上。拓扑异构酶作为抗癌药物重要的靶标之一，它参与了dna代谢的多个方面(例如dna的切割和重新连接)从而保证细胞分裂的各个过程，有趣的是，在肿瘤细胞中dna拓扑异构酶ⅰ是过度表达的，所以topoⅰ也被大家认为是最有希望的抗肿瘤药物的靶标之一。但是，喜树碱具有水溶性差，稳定性差，几乎不具有靶向性等缺点，因此，需要对喜树碱进行改造以使得其具有更好的疗效。

2、多肽药物偶联物(peptide–drug conjugates，pdcs)作为一种新兴的给药系统，通过连接体与药物进行偶联，从而改变药物的水溶性、脂溶性、稳定性、靶向性等特点，进而实现改善药物的治疗效果。且多肽是由氨基酸组成，可以对pdc药物进行不同多肽的选择和多肽的修饰，并且多肽是生物可降解的，所以可以避免免疫原性反应的发生。例如，发明专利cn115737833a公开了一种喜树碱多肽抗肿瘤药物偶联物，以半胱氨酸为中间连接体，利用酰胺化反应将半胱氨酸接枝在9-氨基喜树碱、靶向抗肿瘤多肽上，再氧化形成二硫键将9-氨基喜树碱和靶向抗肿瘤多肽进行偶联；能够靶向特异性作用于肿瘤部位及肿瘤细胞，使药物分子高度积累在肿瘤部位，具有较高的肿瘤靶向性和滞留性，实现靶向精准化疗，降低对机体的毒副作用，同时，偶联物的形式有效提高9-氨基喜树碱的稳定性，延长药物的血液循环半衰期，持久发挥抗肿瘤疗效。发明人的前期研究中，得到了一种rgd多肽-喜树碱多肽药物偶联物(cn111068068a)，所述的rgd多肽与喜树碱通过丁二酸干作为连接臂相连；所合成的rgd-喜树碱多肽药物偶联物，可以将喜树碱递送至肿瘤细胞、组织，肿瘤微环境等肿瘤部位，以达到改善喜树碱溶解性的问题，并使药物喜树碱具有靶向的作用，减低对正常细胞及组织的毒副作用，从而达到特异性抗肿瘤的目的。且该研究中克服了喜树碱20-oh处难以修饰，反应效率低下的问题。

3、在前期研究的基础上，发明人进行了持续的研究，继续在喜树碱20-oh处进行多肽修改，并意外的得到了一种naa多肽-喜树碱偶联物，所述的偶联物治疗宫颈癌、结肠癌和肝癌的效果显著，同时多肽naa作为一种可被肿瘤微环境高表达的酶——legumain识别并可切割的linker，可在naa多肽-喜树碱的基础上与多肽、抗体、蛋白、peg、脂肪酸等进行偶联，从而实现靶向或延长半衰期的作用，具有广阔的应用前景。

技术实现思路

1、本发明的首要目的是提供一种靶向naa多肽-喜树碱偶联物，所述的naa多肽-喜树碱偶联物的结构式如式(ⅰ)所示：

2、

3、本发明的第二目的是提供所述的naa多肽-喜树碱偶联物的制备方法，所述的制备方法包括如下步骤：

4、(1)进行喜树碱20-oh的修饰，在20-oh处用丁二酸干进行修饰；

5、(2)采用固相多肽合成的方法进行制备多肽；然后在树脂上将已修饰过的喜树碱进行偶联；(3)将已经偶联喜树碱的多肽从树脂上裂解下来，得到靶向多肽-喜树碱偶联物粗品。

6、本发明的第三目的是提供所述的naa多肽-喜树碱偶联物在制备治疗癌症药物中的应用。

7、本发明的第四目的是提供所述的naa多肽-喜树碱偶联物在制备抑制宫颈癌细胞生长试剂或药物中的应用。

8、优选的，所述的宫颈癌细胞为hela细胞。

9、本发明的第五目的是提供所述的naa多肽-喜树碱偶联物在制备抑制结肠癌细胞生长试剂或药物中的应用。

10、优选的，所述的结肠癌细胞为hct-15细胞。

11、本发明的第六目的是提供所述的靶向naa多肽-喜树碱偶联物在制备抑制肝癌细胞生长试剂或药物中的应用。

12、本发明的有益效果是：本发明提供了一种naa多肽-喜树碱偶联物，所述的靶向naa多肽-喜树碱偶联物能够显著的抑制宫颈癌、结肠癌和肝癌细胞的生长，可以用于制备治疗宫颈癌、结肠癌和肝癌药物，同时多肽naa作为一种可被肿瘤微环境高表达的酶——legumain识别并可切割的linker，可在naa多肽-喜树碱的基础上与多肽、抗体、蛋白、peg、脂肪酸等进行偶联，从而实现靶向或延长半衰期的作用，有望降低毒副作用，提升药效，具有广阔的应用前景。

1.一种naa多肽-喜树碱偶联物，其特征在于，所述的naa多肽-喜树碱偶联物的结构式如式(ⅰ)所示：

2.如权利要求1所述的naa多肽-喜树碱偶联物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括如下步骤：

3.如权利要求1所述的naa多肽-喜树碱偶联物在制备治疗癌症药物中的应用。

4.如权利要求1所述的naa多肽-喜树碱偶联物在制备抑制宫颈癌细胞生长试剂或药物中的应用。

5.如权利要求1所述的naa多肽-喜树碱偶联物在制备抑制结肠癌细胞生长试剂或药物中的应用。

6.如权利要求1所述的靶向naa多肽-喜树碱偶联物在制备抑制肝癌细胞生长试剂或药物中的应用。