CaMKII结合域自组装蛋白质纳米颗粒及其制备和应用
技术特征:
1.camkii结合域自组装蛋白质纳米颗粒,其特征在于,所述蛋白质纳米颗粒由重组蛋白单体在缓冲液中自组装形成,所述重组蛋白单体的氨基酸序列至少包含seq id no.1所示序列。
2.根据权利要求1所述camkii结合域自组装蛋白质纳米颗粒,其特征在于,所述重组蛋白单体的氨基酸序列如seq id no.1所示。
3.根据权利要求1所述camkii结合域自组装蛋白质纳米颗粒,其特征在于,所述蛋白质纳米颗粒为重组蛋白单体的2-12聚体,所述缓冲液为中性tris缓冲液。
4.根据权利要求1-3任一项所述camkii结合域自组装蛋白质纳米颗粒的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
5.根据权利要求4所述camkii结合域自组装蛋白质纳米颗粒的制备方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述重组蛋白单体基因序列如seq id no.2所示;所述表达载体为重组质粒。
6.根据权利要求4所述camkii结合域自组装蛋白质纳米颗粒的制备方法,其特征在于,在步骤(2)中,所述转化的方法为:将表达载体溶液与工程菌悬液混合后冰水浴2-8min,再于41-43℃处理25-35s后,冰水浴1.5-2.5min,再将菌液涂布于含有抗生素的固体培养基表面,培养后挑取阳性单菌落即为重组菌。
7.根据权利要求4所述camkii结合域自组装蛋白质纳米颗粒的制备方法,其特征在于,在步骤(3)中,所述培养重组菌的方法为:将重组菌接种于lb液体培养基中,37℃摇菌培养12-26h,期间,在2-6h时进行诱导表达。
8.根据权利要求4所述camkii结合域自组装蛋白质纳米颗粒的制备方法,其特征在于,在步骤(4)中,所述将菌体破碎后进行蛋白纯化的方法为:重悬菌体后破碎菌体,离心收集上清液,采用镍柱和层析柱纯化上清液,其中,重悬菌体和层析柱纯化均采用中性tris缓冲液。
9.根据权利要求1-3任一项所述camkii结合域自组装蛋白质纳米颗粒在制备增强肿瘤免疫治疗的佐剂或抗肿瘤药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述肿瘤包括黑色素瘤、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌、胃癌、肺癌、肝癌、食管癌、胰腺癌、脑癌、血癌、淋巴癌、胆管癌中的一种或多种。
技术总结
本发明公开了CaMKII结合域自组装蛋白质纳米颗粒及其制备和应用。CaMKII结合域自组装蛋白质纳米颗粒由重组蛋白单体在缓冲液中自组装形成,所述重组蛋白单体的氨基酸序列至少包含SEQ ID NO.1所示序列。重组蛋白单体通过分子生物学手段重组表达获得。本发明可以选择性促进巨噬细胞和树突状细胞增殖,无法促进成纤维细胞和肿瘤细胞增殖,同时促进巨噬细胞向M1表型极化并增强其抗原提呈能力,同时释放大量炎症细胞因子TNF‑α和IL‑6,以及促进树突状细胞成熟增强其抗原提呈能力。本发明提供一类具有良好应用前景的佐剂,能够应用于疫苗增效及配合现有抗肿瘤药物的免疫治疗,有效提升现有抗肿瘤疗法的药效。
技术研发人员:翁丽星,许妙苗,卫思源,汪联辉
受保护的技术使用者:南京邮电大学
技术研发日:
技术公布日:2024/12/5
技术研发人员:翁丽星,许妙苗,卫思源,汪联辉
技术所有人:南京邮电大学
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