一种高磷脂细胞培养鱼油及其制备方法
技术特征:
1.一种高磷脂细胞培养鱼油的制备方法,其特征在于包括以下步骤:使用完全培养基扩增肌肉细胞,再使用成脂转分化培养基行成脂转分化诱导,得到高磷脂细胞培养鱼油;
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述肌肉细胞为大黄鱼肌肉卫星细胞。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:完全培养基为含10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素(100x)的dmem/f12培养基。
4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于2d成脂转分化包括以下步骤:将肌肉细胞接种到6孔板中,加入完全培养基,待细胞长满后更换为成脂转分化培养基,进行分化。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于3d成脂转分化包括以下步骤:
6.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于:骤(1)中微载体的加入比例为按总培养体系的体积计2-5 mg/ml;溶胀时间为12 h;步骤(1)和步骤(2)中的基础培养基为dmem/f12培养基,搅拌速度为40 rpm。
7.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)加入200 ml完全培养基,接种肌肉细胞的密度为5-20万/ml。
8.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)中梯度搅拌程序为0 rpm,2 h,40 rpm,5 min,循环过夜;恒速搅拌速度为40 rpm。
9.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于:步骤(5)中细胞裂解时间为2-3 min,室温操作;离心时间为5 min,转速 5000 rpm。
10.一种权利要求1-9任一所述制备方法制备的高磷脂细胞培养鱼油。
技术总结
本发明涉及生物工程技术领域,具体涉及一种高磷脂细胞培养鱼油及其制备方法。包括以下步骤:首先在2D条件下扩增细胞,然后将其接种在微载体上进行大体系培养,待细胞长满后进行成脂转分化诱导,诱导4天即可实现大黄鱼肌肉卫星细胞成脂转分化诱导。本发明通过调整成脂转分化培养基,实现了大黄鱼肌肉卫星细胞快速成脂转分化,并大规模制备了高磷脂含量的细胞培养大黄鱼鱼油,为进一步的得到细胞培养鱼肉奠定了基础。另外,本发明通过添加油酸、葡萄糖和维生素C以及物理调控(培养体系优化)共同实现了制备高磷脂含量的细胞培养鱼油,进一步改良了鱼油的营养品质。
技术研发人员:郑洪伟,薛长湖,魏迎新,许维娜,冯婷玉,王明昊
受保护的技术使用者:中国海洋大学
技术研发日:
技术公布日:2024/12/5
文档序号 :
【 40237931 】
技术研发人员:郑洪伟,薛长湖,魏迎新,许维娜,冯婷玉,王明昊
技术所有人:中国海洋大学
备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
声 明 :此信息收集于网络,如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们,我们会在第一时间删除
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