一种新型的双链siRNA、其缀合物及其用途的制作方法

1.一种双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述双链sirna包括一条正义链和一条反义链，且所述双链sirna包含一个或多个y，所述y为所述双链sirna中的每一个核苷酸和y各自独立地是经修饰的或未修饰的。

2.根据权利要求1所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述反义链包含如5’-ugugaagcgaagugcacacuu-3’(seq id no:40)所示的序列，或在如seq id no:40所示序列中使用y替换了一个或多个核苷酸残基的序列；其中，所述反义链中的每一个核苷酸和y各自独立地是经修饰的或未修饰的，所述反义链的长度不超过23个核苷酸。

3.根据权利要求1或2所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述正义链包含如5’-gugugcacuucgcuucaca-3’(seq id no:20)所示的序列，或在如seq id no:20所示序列中使用y替换了一个或多个核苷酸残基的序列，其中，所述正义链中的每一个核苷酸和y各自独立地是经修饰的或未修饰的，所述正义链的长度不超过23个核苷酸。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述正义链或反义链中的70％、75％、80％、85％、90％或95％以上的核苷酸和y都是经修饰的；任选地，所述双链sirna中的每一个核苷酸和y都是经修饰的。

5.根据权利要求1-4任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中所述修饰选自以下中的至少之一：2’-甲氧基修饰、2’-甲氧基乙基修饰、2’-氟代修饰、硫代磷酸酯基连接、2’-脱氧修饰、2’-氨基修饰、锁核酸修饰、解锁核酸修饰、乙二醇核酸修饰和5’-乙烯基磷酸酯修饰。

6.根据权利要求1-5任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述正义链包含在如seq id no:20所示的序列中使用y替换了0个、1个、2个、3个、4个或5个核苷酸残基的序列，其中所述正义链中的每一个核苷酸和y各自独立地是经修饰的或未修饰的。

7.根据权利要求1-6任一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，反义链包含在如seq id no:40所示的序列中使用y替换了0个、1个、2个、3个、4个或5个核苷酸残基的序列，其中所述反义链的每一个核苷酸和y各自独立地是经修饰的或未修饰的。

8.根据权利要求1-7任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述y替换发生在如seq id no:20所示序列的5’端的第1位～第19位。

9.根据权利要求1-8任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述y替换发生在如seq id no:40所示序列的5’端的第1位～第21位。

10.根据权利要求1-9任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述正义链包含在如5’-g●u●gugcacuucgcuucaca-3’(seq id no:19)所示的序列中使用y替换了0个、1个、2个、3个、4个或5个核苷酸残基的序列，其中，所述正义链的每一个核苷酸和y各自独立地是经修饰的或未修饰的，所述y替换发生在所述seq id no:19的5’端的第1～第19位，所述正义链的长度不超过23个核苷酸。

11.根据权利要求1-10任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述反义链包含在如5’-u●g●ugaagcgaagugcacac●u●u-3’(seq id no:36)所示的序列中使用y替换了0个、1个、2个、3个、4个或5个核苷酸残基的序列，其中，所述反义链的每一个核苷酸和y各自独立地是经修饰的或未修饰的，所述y替换发生在所述反义链seq id no:36的5’端的第1～第21位，所述反义链的长度不超过23个核苷酸。

12.根据权利要求1-10任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述反义链包含在如5’-u●g●uga(agn)gcgaagugcacac●u●u-3’(seq id no:33)所示的序列中使用y替换了0个、1个、2个、3个、4个或5个核苷酸残基的序列，其中，反义链的每一个核苷酸和y各自独立地是经修饰的或未修饰的，所述y替换发生在如seq id no:33所述序列5’端的第1～第21位，所述反义链的长度不超过23个核苷酸。

13.根据权利要求1-12任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，所述正义链包含以下核苷酸序列中的之一：

14.根据权利要求1-13任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，所述反义链包含以下核苷酸序列之一：

15.根据权利要求1-14任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述双链sirna包含以下之一：

16.根据权利要求1-15任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述双链sirna或其缀合物选自s1至s143、s146、s147和s150中的之一。

17.根据权利要求1-16任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述双链sirna缀合物为所述双链sirna与缀合基团l96或daw40007-4缀合后的缀合物，所述缀合基团l-96和daw40007-4的结构分别为：

18.根据权利要求17所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述缀合基团与双链sirna的正义链的3’末端或5’末端缀合，优选地与双链sirna的正义链的3’末端缀合。

19.根据权利要求17或18所述的双链sirna、其缀合物或其盐，其中，所述双链sirna通过磷酸酯基团、硫代磷酸酯基团或磷酸基团与所述缀合基团链接。

20.一种核苷酸残基y，其结构为：

21.一种化合物，其具有如式(i)所示的结构，或如式(i)所示的化合物的立体异构体、互变异构体或可接受的盐，

22.根据权利要求21所述化合物，其中，z和y1各自独立地为h、氘、苄氧基羰基、4-硝基苄氧基羰基、4-溴苄氧基羰基、4-甲氧基苄氧基羰基、联苯基甲氧基羰基、2,2,2-三氯乙氧基羰基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基、烯丙氧羰基、氯乙酰基、三氟乙酰基、甲氧基乙酰基、苯氧基乙酰基、苯甲酰基、2,2,2-三氯乙基、2-三甲基甲硅烷基乙基、1,1-二甲基-2-丙烯基、3-甲基-3-丁烯基、烯丙基、对甲氧基苄基二苯甲基、四氢呋喃基、甲氧基甲基、甲基硫代甲基、苄氧基甲基、2,2,2-三氯乙氧基甲基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、甲磺酰基、对甲苯磺酰基、c1-12烷基、c1-12烷基c(＝o)-、c1-12烷硅基、c6-10芳基c1-6烷基、hoc(＝o)(ch2)jc(＝o)-、m-c(＝o)(ch2)jc(＝o)-、三苯基甲基、mmtr、dmtr、4’,4’,4’-三甲氧基三苯甲基、或

23.根据权利要求21或22所述化合物，其中，r2为9-芴基甲氧基羰基、苄氧基羰基、4-硝基苄氧基羰基、4-溴苄氧基羰基、4-甲氧基苄氧基羰基、联苯基甲氧基羰基、2,2,2-三氯乙氧基羰基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基、烯丙氧羰基、氯乙酰基、三氟乙酰基、甲氧基乙酰基、苯氧基乙酰基、苯甲酰基、甲基、叔丁基、2-三甲基甲硅烷基乙基、1,1-二甲基-2-丙烯基、3-甲基-3-丁烯基、烯丙基、苄基、对甲氧基苄基二苯甲基、三苯甲基、四氢呋喃基、甲氧基甲基、甲基硫代甲基、苄氧基甲基、2,2,2-三氯乙氧基甲基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、甲磺酰基、对甲苯磺酰基、三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、c1-6烷氧基或r3c(＝o)-；

24.根据权利要求22-23任意一项所述化合物，各rx和ry独立地为苄氧基羰基、4-硝基苄氧基羰基、4-溴苄氧基羰基、4-甲氧基苄氧基羰基、联苯基甲氧基羰基、2,2,2-三氯乙氧基羰基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基、烯丙氧羰基、氯乙酰基、三氟乙酰基、甲氧基乙酰基、苯氧基乙酰基、苯甲酰基、2,2,2-三氯乙基、2-三甲基甲硅烷基乙基、1,1-二甲基-2-丙烯基、3-甲基-3-丁烯基、烯丙基、对甲氧基苄基二苯甲基、四氢呋喃基、甲氧基甲基、甲基硫代甲基、苄氧基甲基、2,2,2-三氯乙氧基甲基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、甲磺酰基、对甲苯磺酰基、氰基c1-6烷基、c1-6烷基、c1-6烷基c(＝o)-、c1-6烷硅基、苯基、卤素取代的苯基、苄基或苯乙基；或

25.根据权利要求21-24任意一项所述化合物，其具有如式(ii)所示的结构，

26.一种药物组合物，其包含权利要求1-19任意一项所述的双链sirna、其缀合物或其盐，和药学上可接受的载体。

27.如权利要求1-19任意一项所述的双链sirna缀合物、其缀合物和其盐或如权利要求26所述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防乙型肝炎疾病的药物中的用途。

28.如权利要求21-25任意一项所述的化合物在dna核苷酸固相合成的原料、寡核苷酸药物的合成原料、sirna药物的合成原料、sirna药物研究、基因功能研究和/或全基因库的筛选方面的应用。

29.如权利要求20所述的核苷酸残基作为寡聚核苷酸嵌入基团的应用，其中，所述寡聚核苷酸是含有10～50个核苷酸或核苷酸碱基对的核苷酸序列，且所述寡聚核苷酸能够抑制或阻断基因的表达。

30.根据权利要求29所述的应用，其中，所述基因为hbv基因。

31.根据权利要求29或30所述的应用，其中，所述寡聚核苷酸为sirna。

32.根据权利要求31任意一项所述的应用，其中，所述sirna包括正义链和反义链。

33.根据权利要求32所述的应用，其中，所述核苷酸残基仅嵌入到所述sirna的正义链上。

34.根据权利要求32或33所述的应用，其中，所述核苷酸残基仅嵌入到所述sirna的反义链上。

35.根据权利要求32-34任意一项所述的应用，其中，所述核苷酸残基嵌入到所述sirna的正义链和反义链上。

36.根据权利要求32-35任意一项所述的应用，其中，所述sirna的正义链包含如seq idno:19所示的序列。

37.根据权利要求32-36任意一项所述的应用，其中，所述sirna的反义链包含如seq idno:36或seq id no:33所示的序列。