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一种草鱼出血病和败血症二联亚单位疫苗的制备和应用的制作方法

2026-01-02 15:20:02 540次浏览

技术特征:

1.一种融合基因,所述融合基因中含有草鱼呼肠孤病毒的vp6基因序列和维氏气单胞菌ompaⅱ基因序列。

2.根据权利要求1所述的融合基因,其特征在于,所述融合基因还包括接头序列;优选地,所述接头包括柔性接头、刚性接头或可剪切接头。

3.根据权利要求1所述的融合基因,其特征在于,所述融合基因的核苷酸序如seq idno.1所示。

4.一种融合蛋白,所述融合蛋白由权利要求1~3任一项所述的融合基因编码。

5.含有如权利要求1~3任一项所述的融合基因或权利要求4所述的融合蛋白的重组表达载体、表达盒或重组菌。

6.根据权利要求5所述的重组菌,其特征在在于,所述重组菌为重组大肠杆菌;优选地,所述重组大肠杆菌的分类命名为大肠氏菌pet32a-vp6-ompa ii/bl21(escherichia.colipet32a-vp6-ompa ii/bl21),保藏编号是cctcc no:m 2024974。

7.权利要求1~3任一项所述的融合基因或权利要求4所述的融合蛋白或权利要求5~6任一项所述的重组表达载体、表达盒或重组菌在制备防治草鱼呼肠孤病毒和/或维氏气单胞菌引起的疾病的产品中的应用;优选地,所述草鱼呼肠孤病毒和/或维氏气单胞菌引起的疾病包括草鱼出血病和/或草鱼细菌性败血症。

8.一种产品,所述产品包括权利要求1~3任一项所述的融合基因或权利要求4所述的融合蛋白或权利要求5~6任一项所述的重组表达载体、表达盒或重组菌。

9.根据权利要求7所述的应用或权利要求8所述的产品,其特征在于,所述产品为药物;所述药物优选为疫苗;更优选为亚单位疫苗。

10.根据权利要求9所述的应用或产品,其特征在于,所述疫苗包括佐剂;优选地,所述佐剂包括isa763a、氢氧化铝、卵磷脂、mpltm、il-12、isa51vg、isa720vg、mf59、qs21、as03佐剂中的至少一种;优选地,所述药物的给药途径包括腹腔注射、肌肉注射。


技术总结
本发明公开了一种草鱼出血病和败血症二联亚单位疫苗的制备和应用。本发明提供了一种由GCRV的VP6蛋白和维氏气单胞菌的ompAII蛋白连接获得的融合基因,将该融合基因表达融合蛋白联合佐剂构建二联亚单位疫苗对实验动物进行腹腔注射免疫,采集脾脏和肾组织,测定各组织中免疫相关基因的表达量水平;结果表明所制备的二联亚单位疫苗通过注射免疫能够刺激鱼体不同免疫组织产生免疫应答反应;在免疫后第28d,腹腔注射GCRV强毒及维氏气单胞菌进行鱼体攻毒实验,攻毒后15天,对维氏气单胞菌和草鱼呼肠孤病毒感染相对存活率分别为85%和55%,表明本发明二联亚单位疫苗对养殖草鱼重要病害均具有较好的保护效果。

技术研发人员:尹纪元,王庆,李威,张德锋,王英英,李莹莹,莫绪兵,任燕,潘厚军
受保护的技术使用者:中国水产科学研究院珠江水产研究所
技术研发日:
技术公布日:2024/12/5
文档序号 : 【 40238774 】

技术研发人员:尹纪元,王庆,李威,张德锋,王英英,李莹莹,莫绪兵,任燕,潘厚军
技术所有人:中国水产科学研究院珠江水产研究所

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尹纪元王庆李威张德锋王英英李莹莹莫绪兵任燕潘厚军中国水产科学研究院珠江水产研究所
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