一种索马鲁肽Analogue-1突变体及其表达方法和应用
技术特征:
1.一种索马鲁肽analogue-1突变体,其特征在于:所述索马鲁肽analogue-1突变体为天然索马鲁肽第二位处的单个氨基酸x替换为a,所述索马鲁肽analogue-1突变体氨基酸序列如seq id no.2所示。
2.权利要求1所述索马鲁肽analogue-1突变体在制备多重glp-1生物活性肽中的应用。
3.一种索马鲁肽analogue-1突变体的表达方法,其特征在于:
4.如权利要求3所述的表达方法,其特征在于:所述大肠杆菌为dh5α、jm109、w3110、bl21(de3)中的一种或多种。
5.如权利要求3所述的表达方法,其特征在于:所述短肽还包括利拉鲁肽。
6.如权利要求3所述的表达方法,其特征在于:所述多重glp-1生物活性肽的基因包括analogue 2~7,所述analogue-1的核苷酸序列如seq id no.1所示,所述gip的核苷酸序列如seq id no.3所示,所述gcg的核苷酸序列如seq id no.5所示,所述glp-1的核苷酸序列如seq id no.7所示,所述analogue-2的核苷酸序列如seq id no.9所示,所述analogue-3的核苷酸序列如seq id no.11所示,所述analogue-4的核苷酸序列如seq id no.13所示,所述analogue-5的核苷酸序列如seq id no.15所示,所述analogue-6的核苷酸序列如seqid no.17所示,所述analogue-7的核苷酸序列如seq id no.19所示。
7.如权利要求3所述的表达方法,其特征在于:所述多重glp-1生物活性肽的基因analogue 2~7的重组包括,
8.如权利要求3所述的表达方法,其特征在于:包括,
9.一种生产glp-1生物活性肽的方法,其特征在于:包括,将重组菌活化后以1-3%的接种量转接到发酵培养基中,od600为50时,温度为30℃,加入终浓度0.6mm的iptg诱导蛋白表达,根据需要添加氯霉素、链霉素、氨苄青霉素、卡那霉素,30~37℃,200r/min培养,周期20~50h。
10.如权利要求8所述生产glp-1生物活性肽的方法,其特征在于:所述发酵培养基为,酵母提取物10g/l、柠檬酸一水2g/l、硫酸铵5g/l、磷酸二氢钾7g/l、硫酸亚铁七水0.08g/l、无水氯化钙0.006g/l、葡萄糖10g/l、硫酸镁七水1.5g/l和金属离子溶液10ml/l;其中,金属离子溶液的组成成分包括:柠檬酸一水250g/l、三氯化铁六水16g/l、硼酸0.6g/l、硫酸锰一水2g/l、硫酸铜五水ii 0.6g/l、二水钼酸钠0.6g/l、六水合氯化钴0.5g/l和氯化锌2g/l。
技术总结
本发明公开了一种索马鲁肽Analogue‑1突变体及其表达方法和应用,索马鲁肽Analogue‑1突变体为天然索马鲁肽第二位处的单个氨基酸X替换为A,所述索马鲁肽Analogue‑1突变体氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;本发明基于具有结合单个特定G蛋白偶联受体(GPCR)的短肽,然后将这些模块链接在一起,链接相同的模块,可以增加生物活性肽的效价;链接不同的模块,可以实现多重生物活性肽;本发明基于具有单独GPCR结合功能的多肽进行模块化结合,从而获得具有多重性功能的多重生物活性多肽,并且可以快速构建具有多重生物活性功能的GLP‑1生物活性肽而不需要对单个活性多肽进行重新设计。
技术研发人员:郑嘉瑶,王玉,崔论
受保护的技术使用者:常州大学
技术研发日:
技术公布日:2024/12/2
技术研发人员:郑嘉瑶,王玉,崔论
技术所有人:常州大学
备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
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