一种口腔鳞状细胞癌诊断生物标志物hsa-miR-331-3p及其应用

本发明涉及肿瘤诊断和分子靶向治疗领域，更具体地说，涉及一种hsa-mir-331-3p在口腔鳞状细胞癌的临床诊断及其作为靶点治疗口腔鳞状细胞癌的应用。

背景技术：

1、口腔鳞状细胞癌(oral squamoas cell carcinoma，oscc)是头颈部最常见的恶性肿瘤之一，占头颈癌的90％。oscc可以出现在口腔的任何部位，如舌、牙龈、口底、上腭和颊粘膜等。oscc的发生与多种不良嗜好和饮食习惯有关，如吸烟、饮酒和嚼槟榔等。鉴于分子生物学研究的最新进展，已发现oscc的发生和发展与癌基因如bcl-2、c-myc和egfr的激活以及rb、p16和p53的失活有关。oscc的治疗方法主要为外科治疗，结合辅助疗法如放疗或化学疗法。尽管这些临床疗法取得了进步，但其远期生存率仍不乐观。目前，对oscc的诊断和预后的分子标志物的需求一直是临床亟待解决的问题。虽然有很多关于oscc的基因组学、蛋白质组学的研究，但由于实体肿瘤的复杂性和异质性，目前尚无有效应用于临床的oscc分子标志物。寻找oscc有关的生物标志物(biomarker)和探寻其发生、发展的分子机制，或可为oscc治疗提供新的治疗靶点。

2、mirna是一类长度约为22nt的内源性非编码rna，通过与靶mrna的序列碱基互补配对结合，抑制靶mrna的翻译或促进靶mrna的降解，从而对基因进行转录后调控。既往的研究表明，在多种恶性肿瘤中都发现有mirna表达异常。hsa-mir-331-3p和hsa-mir-642a-5p在oscc患者血清中表达上调，hsa-mir-1282在oscc患者血清中表达下调，其可作为oscc诊断和预后的生物标志物，而且更进一步的，其可能成为治疗oscc的潜在靶点，因此，有必要针对hsa-mir-331-3p、hsa-mir-642a-5p和hsa-mir-1282进一步研究。

技术实现思路

1、本发明要解决的技术问题是提高口腔鳞状细胞癌诊断的准确度，并提供诊断口腔鳞状细胞癌的诊断试剂盒和治疗试剂。

2、为实现上述目的，本发明提供了一种检测生物标志物的试剂在制备口腔鳞状细胞癌诊断的产品中的应用，其中检测生物标志物的试剂包括检测hsa-mir-331-3p、hsa-mir-642a-5p和hsa-mir-1282中的一种或多种的试剂。

3、在本发明的较佳实施方式中，本发明提供了一种检测生物标志物的试剂在制备口腔鳞状细胞癌诊断的产品中的应用，其中检测生物标志物的试剂包括检测hsa-mir-331-3p的试剂。

4、优选地，所述检测生物标志物的试剂还包括检测hsa-mir-642a-5p和/或hsa-mir-1282的试剂。

5、优选地，所述hsa-mir-331-3p、hsa-mir-642a-5p和hsa-mir-1282源自血清样本或癌症组织。

6、优选地，所述产品为试剂盒。

7、优选地，所述检测hsa-mir-331-3p、hsa-mir-642a-5p和hsa-mir-1282的试剂为引物，检测hsa-mir-331-3p的上游引物如seq id no：2所示，检测hsa-mir-642a-5p的上游引物如seq id no：3所示，检测hsa-mir-1282的上游引物如seq id no：4所示，检测hsa-mir-331-3p、hsa-mir-642a-5p和hsa-mir-1282的下游通用引物如seq id no：5所示。

8、在本发明的又一较佳实施方式中，本发明提供了一种hsa-mir-331-3p抑制剂在制备治疗oscc药物的应用。

9、优选地，所述hsa-mir-331-3p抑制剂为其反义寡核苷酸。

10、优选地，所述hsa-mir-331-3p抑制剂为如seq id no：7所示的寡核苷酸。

11、本发明的技术效果如下：

12、(1)本发明发现hsa-mir-331-3p在口腔鳞状细胞癌中显著高表达，可作为口腔鳞状细胞癌潜在的生物标志物；

13、(2)本发明发现hsa-mir-331-3p在下调表达后，能够明显抑制口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭，可用作治疗口腔鳞状细胞癌的潜在靶点。

14、以下将结合附图对本发明的构思、具体结构及产生的技术效果作进一步说明，以充分地了解本发明的目的、特征和效果。

1.一种检测生物标志物的试剂在制备口腔鳞状细胞癌诊断的产品中的应用，其特征在于，所述检测生物标志物的试剂包括检测mir-331-3p、mir-642a-5p和mir-1282中的一种或多种的试剂。

2.一种检测生物标志物的试剂在制备口腔鳞状细胞癌诊断的产品中的应用，其特征在于，所述检测生物标志物的试剂包括检测mir-331-3p的试剂。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测生物标志物的试剂还包括检测mir-642a-5p和/或mir-1282的试剂。

4.根据权利要求1-3任一所述的应用，其特征在于，所述mir-331-3p、mir-642a-5p和mir-1282源自血清样本或癌症组织。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述产品为试剂盒。

6.根据权利要求1-3任一所述的应用，其特征在于，所述检测hsa-mir-331-3p、hsa-mir-642a-5p和hsa-mir-1282的试剂为引物，检测hsa-mir-331-3p的上游引物如seq idno：2所示，检测hsa-mir-642a-5p的上游引物如seq id no：3所示，检测hsa-mir-1282的上游引物如seq id no：4所示，检测hsa-mir-331-3p、hsa-mir-642a-5p和hsa-mir-1282的下游通用引物如seq id no：5所示。

7.一种mir-331-3p抑制剂在制备治疗口腔鳞状细胞癌药物的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述mir-331-3p抑制剂为其反义寡核苷酸。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述mir-331-3p抑制剂为如seq id no：7所示的寡核苷酸。