一种抗菌猪脾肽及其制备方法与应用与流程

本申请涉及活性肽的，具体涉及一种抗菌猪脾肽及其制备方法与应用。

背景技术：

1、生物活性肽源于蛋白质，是其中具有生物活性的片段，有着超出基本营养需求的

2、独特生物活性，因其对人体健康的贡献而受到越来越多的关注。由于肽是隐藏在母蛋白中的复杂结构，导致其生物活性难以有效发挥。经过外界蛋白酶酶解、发酵等生物化学反应或是胃肠道消化后可以产生多种生理功能，对人体健康产生积极影响。

3、近年来，许多研究都致力于鉴定新型鸡蛋清蛋白肽，鸡基因组的发表极大地提高了在复杂样品中鉴定蛋白质与多肽的能力。研究表明，鸡蛋清蛋白经特定的蛋白酶酶解后鉴定可以得到种类不同的生物活性肽。

4、当前，生物活性肽已被应用于预防与治疗，猪脾中含有丰富的蛋白质，而且含有大量的生物活性物质，有着防治疾病、免疫调节等生理功能。目前，对于猪脾的深度开发利用较少，导致大量的优质蛋白资源被浪费。因此，以猪脾为原料，研发高品质的猪脾多肽产品具有良好的前景与意义。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本申请提供一种抗菌猪脾肽及其制备方法与应用。

2、第一方面，本申请提供了一种抗菌猪脾肽，所述抗菌猪脾肽选自mlw活性肽、lgf活性肽中的一种或多种；所述mlw活性肽的氨基酸序列为：甲硫氨酸-亮氨酸-色氨酸；所述lgf活性肽的氨基酸序列为：亮氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸。

3、优选地，所述抗菌猪脾肽由重量比为1-10：1-10的mlw活性肽和lgf活性肽混合组成。

4、优选地，所述抗菌猪脾肽由重量比为1-5：6-10的mlw活性肽和lgf活性肽混合组成。

5、在一个具体的实施方案中，所述mlw活性肽和lgf活性肽的重量比可以为1-3：1、1-5：3、1-8：5、1-8：6、1-10：8、1：1-10、3-5：1、3-5：5、3-8：6、3-10：8、3：3-10、5-8：1、5-10：3、5：3-6、5：5-8、5：5-10、6-8：1、6-8：3、6-10：5、6-10：8、6：3-10、8：1-5、8：3-6、8：5-10、8：5-6、8：8-10、10：1-6、10：3-8、8-10：5、10：6-10、10：6-8。

6、在一些具体的实施方案中，所述mlw活性肽和lgf活性肽的重量比还可以为1：1、1：3、1：5、1：6、1：8、1：10、3：1、3：5、3：6、3：8、3：10、5：1、5：3、5：6、5：8、5：10、6：1、6：3、6：5、6：8、6：10、8：1、8：3、8：5、8：6、8：10、10：1、10：3、10：5、10：6、10：8。

7、经过试验分析可知，本申请选择由上述重量比的mlw活性肽和lgf活性肽混合组成猪脾肽，可以进一步提高猪脾肽的抗菌性能。

8、第二方面，本申请提供了上述抗菌猪脾肽的制备方法，具体包括以下步骤：取猪脾脏酶解后，经过过滤、超滤、浓缩、真空干燥、筛选分离得到。

9、优选地，所述猪脾酶解的具体步骤为：取新鲜猪脾脏，加入生理盐水，调节ph为7.5-9.0，加入重量比为5：1-5的胰酶、碱性蛋白酶的混合物，在45-65℃下酶解2-4h；然后调节ph值为6.5-7.5，加入风味蛋白酶，在45-65℃下酶解2-4h；煮沸灭酶活。

10、经过试验分析可知，申请人发现在猪脾酶解的过程中，通过合理选择合适的ph值环境，并合理匹配选择两段酶解的蛋白酶种类和用量，可以有效提高mlw活性肽、lgf活性肽的产量。

11、优选地，所述胰酶、碱性蛋白酶的混合物与所述猪脾脏的重量比为0.0005-0.0015：1。

12、优选地，所述胰酶、碱性蛋白酶的混合物与所述猪脾脏的重量比为0.0008-0.0012：1。

13、优选地，所述风味蛋白酶的重量与所述猪脾脏的重量比为0.0002-0.001：1。

14、优选地，所述风味蛋白酶的重量与所述猪脾脏的重量比为0.0004-0.008：1。

15、第三方面，本申请提供了上述抗菌猪脾肽在制备抗菌药物中的应用。

16、综上所述，本申请的技术方案具有以下效果：

17、利用本申请的技术方案制备的抗菌猪脾肽mlw活性肽、lgf活性肽中的一种或多种对于对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌均具有优异的抗菌性，在抗菌领域具有广阔的应用前景。

18、本申请通过优化抗菌猪脾肽的制备方法，获得了得率较高的mlw活性肽、lgf活性肽。

1.一种抗菌猪脾肽，其特征在于，所述抗菌猪脾肽选自mlw活性肽、lgf活性肽中的一种或多种；所述mlw活性肽的氨基酸序列为：甲硫氨酸-亮氨酸-色氨酸；所述lgf活性肽的氨基酸序列为：亮氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸。

2.根据权利要求1所述的抗菌猪脾肽，其特征在于，所述抗菌猪脾肽由重量比为1-10：1-10的mlw活性肽和lgf活性肽混合组成。

3.根据权利要求2所述的抗菌猪脾肽，其特征在于，所述抗菌猪脾肽由重量比为1-5：6-10的mlw活性肽和lgf活性肽混合组成。

4.如权利要求1-3中任一项所述的抗菌猪脾肽的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：取猪脾脏酶解后，经过离心过滤、超滤、浓缩、真空干燥、筛选分离得到。

5.根据权利要求4所述的抗菌猪脾肽的制备方法，其特征在于，所述猪脾酶解的具体步骤为：取新鲜猪脾脏，加入生理盐水，调节ph为7.5-9.0，加入重量比为5：1-5的胰酶、碱性蛋白酶的混合物，在45-65℃下酶解2-4h；然后调节ph值为6.5-7.5，加入风味蛋白酶，在45-65℃下酶解2-4h；煮沸灭酶活，得到酶解液。

6.根据权利要求5所述的抗菌猪脾肽的制备方法，其特征在于，所述胰酶、碱性蛋白酶的混合物与所述猪脾脏的重量比为0.005-0.015：10。

7.根据权利要求6所述的抗菌猪脾肽的制备方法，其特征在于，所述胰酶、碱性蛋白酶的混合物与所述猪脾脏的重量比为0.008-0.012：10。

8.根据权利要求5所述的抗菌猪脾肽的制备方法，其特征在于，所述风味蛋白酶的重量与所述猪脾脏的重量比为0.002-0.01：10。

9.根据权利要求8所述的抗菌猪脾肽的制备方法，其特征在于，所述风味蛋白酶的重量与所述猪脾脏的重量比为0.004-0.008：10。

10.权利要求1-3中任一项所述的抗菌猪脾肽在制备抗菌药物中的应用。