一种具有蜡样芽孢杆菌抑制作用的嗜盐四联球菌及应用

本发明涉及嗜盐四联球菌，具体涉及一种具有抑制蜡样芽孢杆菌作用的嗜盐四联球菌(tetragenococcus halophilus)lxhmy1及其在腐乳发酵体系中的应用；属于微生物应用。

背景技术：

1、蜡样芽孢杆菌是一种常见于土壤的革兰氏阳性菌，容易在环境和各种农业原料中被检出，随后进入食物链。蜡样芽孢杆菌会产生腹泻型肠毒素和呕吐毒素，主要的临床表现有腹泻和呕吐，部分菌株甚至会引发严重的眼睛感染、肝脏衰竭等相关疾病。一般认为当蜡样芽孢杆菌菌数达到5-8logcfu/g时会引起食物中毒。蜡样芽孢杆菌产生的孢子在不同环境压力条件下均有良好的生存能力，对高温、干燥、部分有毒化学物质等多种不利因素都具有一定的耐受性。

2、腐乳、豆酱、酱油等均是以大豆为主要原料的中国传统发酵豆制品，通常使用开放或半开放的前期发酵和加盐腌制的方式，因此环境中的微生物有机会进入发酵体系，尽管高浓度的食盐对大多数病源微生物有抑制作用，但对蜡样芽孢杆菌一类的产芽孢细菌作用有限，需要加以关注。有报道表明，在很多传统发酵食品中都有蜡样芽孢杆菌检出，其中腐乳因营养丰富且无灭菌工序，容易出现蜡样芽孢杆菌超标的情况。

3、针对上述传统发酵食品中存在的问题，食品科技工作者进行了广泛的研究。目前已经报道的抑制蜡样芽孢杆菌生长的物质包括植物提取物、微生物代谢产物、生物制剂等，但这些方法仍存在制备方法复杂、安全性无法保证，或者可能影响食品风味等问题，从而制约了其在食品体系中的应用。如植物精油虽然具有很好的抑菌效果，但因对产品风味有显著影响而难以在发酵食品中应用。因此，积极寻求新的途径解决发酵食品中的蜡样芽孢杆菌污染危害具有重要意义。

4、中国发明专利申请cn117796403a公开了儿茶素在抑制蜡样芽孢杆菌中的应用；通过二倍稀释法和琼脂扩散法确定儿茶素对蜡样芽孢杆菌的最小抑菌浓度为2mg/ml、最低杀菌浓度为4mg/ml，论证了茯茶提取物中所含儿茶素是抑制蜡样芽孢杆菌生长的天然活性成分。但该技术的儿茶素存在着使发酵食品出现酸味或涩味的风险，进而可能对发酵食品的品质和风味产生不良影响。

技术实现思路

1、为解决现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种能抑制蜡样芽孢杆菌生长的，培养条件简单，在高盐环境下生长情况良好，对氨苄西林、庆大霉素、卡那霉素、链霉素、克林霉素、四环素、红霉素和氯霉素敏感，无耐药基因和毒力基因的嗜盐四联球菌。

2、本发明另一目的在于提供所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用。

3、本发明目的通过如下技术方案实现：

4、一种嗜盐四联球菌lxhmy1(tetragenococcus halophilus)，于2024年8月2日保藏在广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏号为gdmcc 64945。

5、本发明还保护所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用。

6、为进一步实现本发明目的，优选地，在灭菌后的培养基中接种嗜盐四联球菌，得到嗜盐四联球菌菌悬液，将嗜盐四联球菌菌悬液稀释后接种至前发酵豆浆液中，加盐，在25-30℃温度条件下发酵7-28天。

7、优选地，所述的嗜盐四联球菌的培养基为含8-10g/100ml nacl的mrs肉汤培养基。

8、优选地，所述的培养基的灭菌是在120-122℃灭菌15-20min。

9、优选地，所述的在灭菌后的培养基中接种嗜盐四联球菌的接种量为2-5vol％。

10、优选地，所述的在灭菌后的培养基中接种嗜盐四联球菌的接种的方法是在25-30℃的温度下培养48-72h后，得嗜盐四联球菌菌悬液。

11、优选地，所述的前发酵豆浆液含有蜡样芽孢杆菌。

12、优选地，所述的嗜盐四联球菌菌悬液稀释后的浓度为5-6logcfu/ml；嗜盐四联球菌菌悬液稀释后接种量为1-3vol％。

13、优选地，所述的加盐是在每100ml前酵豆浆液中加入8-12g的食盐，前酵豆浆液加盐后构成腐乳发酵体系。

14、本发明提供的嗜盐四联球菌具有的优点和有益效果：

15、1)本发明公开的嗜盐四联球菌lxhmy1培养条件简单，用于抑菌的菌悬液制备方法简单，在发酵食品行业具有很好的应用潜力。

16、2)本发明公开的嗜盐四联球菌lxhmy1在高盐环境下生长情况良好，适用于腐乳、豆酱和酱油等高盐产品的生产环境。

17、3)本发明公开的嗜盐四联球菌lxhmy1对氨苄西林、庆大霉素、卡那霉素、链霉素、克林霉素、四环素、红霉素和氯霉素敏感，无耐药基因和毒力基因，应用前景广阔。

18、4)本发明公开的嗜盐四联球菌lxhmy1的菌悬液在固体培养基中对分离自腐乳的蜡样芽孢杆菌具有良好的抑制效果，具有制备相关生物制剂的潜力。

19、5)本发明公开的嗜盐四联球菌lxhmy1在腐乳发酵体系中可显著降低蜡样芽孢杆菌数量，同时降低体系中的肠毒素含量，可有效提高腐乳等发酵食品的安全性。

1.一种嗜盐四联球菌(tetragenococcus halophilus)，其特征在于，其保藏号为gdmcc64945。

2.权利要求1所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用。

3.根据权利要求2所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用，其特征在于，在灭菌后的培养基中接种嗜盐四联球菌，得到嗜盐四联球菌菌悬液，将嗜盐四联球菌菌悬液稀释后接种至前发酵豆浆液中，加盐，在25-30℃温度条件下发酵7-28天。

4.根据权利要求3所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用，其特征在于，所述的嗜盐四联球菌的培养基为含8-10g/100ml nacl的mrs肉汤培养基。

5.根据权利要求3所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用，其特征在于，所述的培养基的灭菌是在120-122℃灭菌15-20min。

6.根据权利要求3所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用，其特征在于，所述的在灭菌后的培养基中接种嗜盐四联球菌的接种量为2-5vol％。

7.根据权利要求3所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用，其特征在于，所述的在灭菌后的培养基中接种嗜盐四联球菌的接种的方法是在25-30℃的温度下培养48-72h后，得嗜盐四联球菌菌悬液。

8.根据权利要求3所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用，其特征在于，所述的前发酵豆浆液含有蜡样芽孢杆菌。

9.根据权利要求3所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用，其特征在于，所述的嗜盐四联球菌菌悬液稀释后的浓度为5-6logcfu/ml；嗜盐四联球菌菌悬液稀释后接种量为1-3vol％。

10.根据权利要求3所述的嗜盐四联球菌在腐乳发酵体系中抑制蜡样芽孢杆菌的应用，其特征在于，所述的加盐是在每100ml前酵豆浆液中加入8-12g的食盐，前酵豆浆液加盐后构成腐乳发酵体系。