一种多肽及其在制备抗狂犬病毒药物中的应用

本发明属于生物医药，具体涉及一种多肽及其在制备抗狂犬病毒药物中的应用。

背景技术：

1、狂犬病是一种由狂犬病毒感染引起的人畜共患致命神经系统疾病。尽管狂犬病一直是大规模公共卫生干预措施的重点，主要是通过疫苗接种工作，但该疾病每年导致全球约40000-70000人死亡[1]。虽然这种疾病比其他人类感染(如流感病毒)较少见，但因缺乏有效的治疗手段挽救有症状的狂犬病患者的生命，被患有狂犬病的动物咬伤后的预后很差，患病死率接近100％[2,3]。人类狂犬病仍然是最严重的疾病之一，是对公共卫生的重要威胁。因此，寻找有效的抗狂犬病毒药物仍是当前的一项艰巨任务，还必需在理论和实践上继续深入探讨。

2、近年来，多肽类药物具有良好的生物相容性、生物可降解性和反应性，成为靶向药物的研究热点之一[4,5]。目前，利用现代生物技术合成的多肽药物已广泛应用于肿瘤、肝炎、糖尿病、艾滋病等疾病的预防、诊断和治疗[6]。与传统小分子化学药物相比，蛋白质药物具有良好的生物活性、特异性强、低毒性、生物功能明确、有利于临床应用的特点，往往疗效显著、不良反应小、安全性高，很少引起严重的免疫反应[7]。由于本身的特性，多肽从临床试验到fda批准所需时间也比小分子药物时间短，大约平均为10年。而多肽通过临床试验的机率比小分子化合物要高两倍。目前，全球药物市场上有大约60～70种多肽药物，如索马杜林(somatuline)、诺雷德(zoladex)、sandostatin、促胰液素(secretin)、亮丙瑞林(leuprolide)、雨蛙素(ceruletide)、比伐卢定(bivalirudin)、加压素(vasopressin)、伐普肽(vapreotide)、普兰林肽(pramlintide)、促肾上腺皮质激素(corticotropin)和杆菌肽(bacitracin)等等，有200～300种多肽药物在临床试验中，有500～600种正在临床前试验中，更多的多肽药物在实验室研究阶段[8]。多肽的特定优点使其在药物开发中表现出特定的优势和拥有临床应用价值。迄今为止，未有针对狂犬病毒的靶向多肽类药物。

3、参考文献

4、[1]dhulipala s and uversky vn.looking at the pathogenesis of therabies lyssavirus strain pasteur vaccins through a prism of the disorder-based bioinformatics.biomolecules[j],2022,12(10).

5、[2]fooks ar,cliquet f,finke s,et al.rabies.nat rev dis primers[j],2017,3:17091.

6、[3]bastos v,pacheco v,rodriguesdl,et al.neuroimmunology of rabies:new insights into an ancient disease.j med virol[j],2023,95(10):e29042.

7、[4]mu r,zhu d,abdulmalik s,et al.stimuli-responsive peptideassemblies:design,self-assembly,modulation,and biomedical applications.bioactmater[j],2024,35:181-207.

8、[5]guo xy,yi l,yang j,et al.self-assembly of peptide nanomaterials atbiointerfaces:molecular design and biomedical applications.chem commun(camb)[j],2024,60(15):2009-2021.

9、[6]wang m,liu j,xia m,et al.peptide-drug conjugates:a new paradigmfor targeted cancer therapy.eur j med chem[j],2024,265:116119.

10、[7]ji x,nielsen al and heinis c.cyclic peptides for drugdevelopment.angew chem int ed engl[j],2024,63(3):e202308251.

11、[8]de la torre bg and albericio f.the pharmaceutical industry in2023:an analysis of fda drug approvals from the perspective ofmolecules.molecules[j],2024,29(3).

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种能针对狂犬病毒的多肽及其在制备抗狂犬病毒药物中的应用。

2、本发明的目的通过下述技术方案实现：

3、一种多肽pdia3(190-199aa)，其氨基酸序列为eslvneyddn(seq id no.1)。pdia3(190-199aa)来源于人pdia3蛋白的190-199位氨基酸，其能够与狂犬病毒的表面糖蛋白结合，抵抗狂犬病毒的感染。

4、一种由细胞穿透肽和上述pdia3(190-199aa)多肽融合形成的多肽。pdia3(190-199aa)多肽存在容易降解、难以进入细胞发挥作用的问题，将pdia3(190-199aa)多肽与细胞穿透肽融合能够解决该问题。所述的细胞穿透肽的氨基酸序列优选为ygrkkrrqrrr。当所述的细胞穿透肽的氨基酸序列为ygrkkrrqrrr时，所述的多肽命名为tat-p58arabv190，其氨基酸序列为ygrkkrrqrrreslvneyddn(seq id no.2)。

5、进一步地，上述多肽为c末端酰胺化形式的多肽，由人工合成且纯度为95％以上。

6、上述多肽pdia3(190-199aa)或由细胞穿透肽和pdia3(190-199aa)融合形成的多肽在制备抗狂犬病毒药物中的应用。所述药物通过至少以下作用抗狂犬病毒感染：选择性降解狂犬病毒表面糖蛋白，对病毒早期进入宿主以及进入宿主的后阶段进行抑制。所述的狂犬病毒包括cvs11毒株。

7、一种抗狂犬病毒药物，包含上述多肽pdia3(190-199aa)或由细胞穿透肽和pdia3(190-199aa)融合形成的多肽，还可进一步包含制药中可以被接受的辅料成分。

8、本发明的有益效果在于：

9、(1)不同浓度的tat-p58arabv190多肽在hek293细胞中不影响细胞活性和免疫激活，发现tat-p58arabv190多肽对细胞具有良好生物相容性。

10、(2)tat-p58arabv190多肽以剂量依赖的方式显著抑制狂犬病毒感染性，且促进狂犬病毒表面糖蛋白的降解以及抑制复制周期的进入和进入后阶段，提示：tat-p58arabv190多肽的抗病毒活性好、抗病毒作用机制多样，是一个潜在的高效广谱抗病毒活性多肽，具有重要应用价值。

11、(3)tat-p58arabv190多肽促进狂犬病毒表面糖蛋白的降解并抑制狂犬病毒早期进入阶段。

12、(4)tat-p58arabv190多肽具有制备方法简单易行，生物相容性良好，副作用小，可短期内进行大规模生产等优点。tat-p58arabv190多肽作为抗病毒药物具有安全高效的特点，为设计安全、有效的多肽治疗狂犬病打下基础，具有良好的开发和应用前景