一种纺锤型赖氨酸芽孢杆菌及其在雪茄烟叶发酵中的应用的制作方法

本发明属于微生物，具体涉及一种纺锤型赖氨酸芽孢杆菌及其在雪茄烟叶发酵中的应用。

背景技术：

1、雪茄烟叶发酵是改善雪茄烟叶外观颜色、物理性质、香气浓度和香气质量的重要工序，是雪茄烟叶生产的关键步骤。烟叶中微生物群落在改善雪茄烟叶的品质和香韵发挥着重要作用。由于国产雪茄烟叶起步晚，种植和发酵技术不成熟，香气不丰富，无法满足工业使用要求。在雪茄烟叶发酵过程中添加微生物菌剂、酶制剂或其他发酵介质等可改善雪茄烟叶品质，减少杂气，谐调因含氮过高而引起的刺激性，丰富雪茄烟叶的香韵，还可以缩短烟叶发酵时间，提高发酵效率。

技术实现思路

1、本发明针对上述现有技术的不足，提供了一种纺锤型赖氨酸芽孢杆菌及其在雪茄烟叶发酵中的应用。本发明纺锤型赖氨酸芽孢杆菌能够提升雪茄烟叶风味和品质。

2、本发明纺锤型赖氨酸芽孢杆菌a7，分类命名为纺锤型赖氨酸芽孢杆菌lysinibacillus fusiformis，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.31713，保藏日期为2024年8月21日。

3、本发明纺锤型赖氨酸芽孢杆菌在雪茄烟叶发酵中的应用。

4、包括如下步骤：

5、步骤1：平板培养

6、将冷冻保存的甘油悬液接种到平板上，37℃下恒温培养24h。

7、步骤2：摇瓶培养

8、将液体培养基加入摇瓶中，摇瓶装液量为10～20％(v/v)，随后接种步骤1获得的平板培养液，摇瓶培养1～3天。

9、步骤3：将步骤2所得菌体发酵液用超纯水、生理盐水或者其它缓冲液进行稀释，稀释后菌液浓度达到106～1012个菌/ml，将菌液按照烟叶重量的1～5％加入到含水量为20～50％的雪茄烟叶中进行发酵，发酵温度为30～50℃，发酵时间15～30天。

10、步骤1中，平板培养的培养基构成为：蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，ph 7.0。

11、步骤2中，液体培养基构成为：葡萄糖30g，蛋白胨20g，酵母粉15g，k2hpo41.5g，nah2po43 g，加蒸馏水1000ml，调ph值为7.0，高压蒸汽灭菌。

12、步骤2中，步骤1获得的平板培养液的接种量为2～5％(v/v)。

13、步骤2中，培养温度为30～35℃，摇床转速为150～220rpm。

14、本发明的有益效果体现在：

15、采用本发明纺锤型赖氨酸芽孢杆菌来改善国产雪茄烟叶的质量，工艺过程简单，反应条件温和；经过处理后，能明显提高国产雪茄烟叶香气质量和甜感，降低刺激性，减少杂气，烟叶可用性明显提高。该方法具有简单实用，效率高等特点，可望在工业上推广应用。

1.一种纺锤型赖氨酸芽孢杆菌，其特征在于：

2.权利要求1所述纺锤型赖氨酸芽孢杆菌在雪茄烟叶发酵中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：

7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：

8.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：