一种短双歧杆菌及促进骨骼发育的制剂及应用的制作方法

本发明属于微生物，具体涉及一种短双歧杆菌及促进骨骼发育的制剂及应用。

背景技术：

1、双歧杆菌是哺乳动物肠道内的一类有益微生物，有助于消化与吸收，并具有调节免疫功能、抑制肠道病原菌生长等有益健康的功能活性。饮食中适当增加双歧杆菌的摄入量已被证实可以改善肠道健康，增强免疫功能，并促进营养物质的吸收。

2、骨骼发育是复杂的生物学过程，涉及骨骼的形成、生长和重塑。许多用于治疗骨骼相关疾病的药物，如骨质疏松症的药物治疗，可能导致严重的副作用。双膦酸盐类药物（如阿伦膦酸、依替膦酸）通过抑制骨吸收来增加骨密度，但它们可能引起食道炎症、胃肠道不适，乃至罕见的下颌骨坏死和骨折风险增加。选择性雌激素受体调节剂（如雷洛昔芬）能够模仿雌激素在骨骼上的保护作用，但可能会增加血栓和热潮红的风险。相比之下，益生菌作为一种天然生物制品，其在体内的活动更为温和，且部分益生菌具有促进骨骼发育的作用，如文献《human breastmilk-derived bifidobacterium longum subsp. infantisccfm1269 regulates bone formation by the gh/igf axis through pi3k/aktpathway》（gut icrobes,2024,16(1):2290344）报道，一种长双歧杆菌婴儿亚种ccfm1269可促进骨骼发育。因此，益生菌类促骨骼发育产品的需求较旺盛。

3、双歧杆菌具有多种有益健康的效应，但其属于厌氧菌，对氧及溶解氧敏感，实际发酵培养过程中常需要使用昂贵的厌氧发酵设备，且操作过程复杂，效率低下。另外，在厌氧条件下，以阳光菌为代表的有害菌群也可能滋生，对食品安全构成威胁。此外，双歧杆菌在微生态制剂中的存活率也受到了氧气的影响，因其对氧敏感，使得这类制剂的贮存期限以及有效性受到限制。因此，如何有效地提高双歧杆菌对氧的耐受性，从而提高其发酵效率、产品质量和有效性、持久性，成为该领域中急需解决的问题。文献cn112980719a公开了一种动物双歧杆菌的耐氧驯化方法，需要反复多次的过氧化氢处理和反复多次的搅拌、厌氧循环，所需操作复杂，且所述菌株并非短双歧杆菌。

技术实现思路

1、针对上述技术问题，本发明的目的是提供一种短双歧杆菌，并提供含该短双歧杆菌的促进骨骼发育产品和应用。

2、首先，本发明提供一种短双歧杆菌，所述短双歧杆菌命名为短双歧杆菌ybt36，拉丁名为 bifidobacterium breve ybt36。所述短双歧杆菌保藏单位为：中国典型培养物保藏中心；保藏地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号；保藏日期为：2024年07月10日，保藏编号为：cctcc no：m20241534。所述短双歧杆菌的分类学命名为短双歧杆菌ybt36( bifidobacterium breve ybt36)。

3、其次，发明提供一种促进骨骼发育的制剂，含前述短双歧杆菌（即短双歧杆菌ybt36）。

4、优选地，所述促进骨骼发育的制剂为微胶囊制剂。

5、优选地，所述微胶囊制剂的微胶囊壁材为海藻酸、海藻酸钠、海藻酸钙中的任一种。

6、优选地，所述微胶囊制剂的微胶囊壁材为海藻酸钠。

7、优选地，所述微胶囊制剂的制备方法包括如下步骤:

8、s1:取保藏编号为cctcc no：m20241534的耐氧短双歧杆菌的悬浮液，与重量体积浓度3g/100ml的海藻酸钠溶液按体积比1:2.5混合，加入碳酸钙；然后按照水/油体积比1:1加入含体积百分比浓度1%吐温80的大豆油，400xg下均质15min，形成油包水型乳液；

9、s2:向乳液中加入冰醋酸，搅拌，加入cacl2溶液搅拌，收集沉淀，洗涤去除油相，得微胶囊。

10、优选地，所述步骤s2中cacl2溶液的浓度为0.8mol/l。

11、优选地，所述步骤s2中乳液与冰醋酸的体积比为1:1。

12、优选地，所述步骤s2中采用0.85g/100ml的nacl溶液洗涤去除油相。

13、本发明制备的短双歧杆菌ybt36微胶囊制剂能抵抗胃肠黏液的酸性环境，帮助短双歧杆菌定植。

14、再次，本发明提供前述短双歧杆菌（短双歧杆菌ybt36）及促进骨骼发育的制剂在制备促进骨骼发育产品中的应用。

15、本发明具有以下有益效果：

16、(1)本发明获得的短双歧杆菌在有氧条件下具有更好的活性，能够适应大规模工业发酵中未能严格厌氧的条件。

17、(2)本发明获得的短双歧杆菌微胶囊制剂能够帮助短双歧杆菌抵抗胃肠道的恶劣环境，促进短双歧杆菌定植。

18、(3)本发明获得的耐氧短双歧杆菌及微胶囊制剂具有促进骨发育的优势，例如提高生长期大鼠的股骨和胫骨长度、提高骨密度等。

1.一种短双歧杆菌，其特征在于，所述短双歧杆菌保藏单位为中国典型培养物保藏中心；保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号；保藏日期为2024年07月10日，保藏编号为cctcc no：m20241534；所述短双歧杆菌的分类学命名为短双歧杆菌ybt36(bifidobacterium breve ybt36)。

2.一种促进骨骼发育的制剂，其特征在于，所述制剂含有保藏编号为cctcc no：m20241534的短双歧杆菌。

3.根据权利要求2所述的一种促进骨骼发育的制剂，其特征在于，所述制剂为微胶囊制剂。

4.根据权利要求3所述的一种促进骨骼发育的制剂，其特征在于，所述微胶囊制剂的微胶囊壁材为海藻酸、海藻酸钠、海藻酸钙中的任一种。

5.根据权利要求3所述的一种促进骨骼发育的制剂，其特征在于，所述微胶囊制剂的微胶囊壁材为海藻酸钠。

6.根据权利要求5所述的一种促进骨骼发育的制剂，其特征在于，所述微胶囊制剂的制备方法包括如下步骤:

7.根据权利要求6所述的一种促进骨骼发育的制剂，其特征在于，所述步骤s2中cacl2溶液的浓度为0.8 mol/l。

8.根据权利要求6所述的一种促进骨骼发育的制剂，其特征在于，所述步骤s2中乳液与冰醋酸的体积比为1:1。

9.根据权利要求6所述的一种促进骨骼发育的制剂，其特征在于，所述步骤s2中采用0.85g/100ml 的nacl溶液洗涤去除油相。

10.权利要求1所述的短双歧杆菌及权利要求2至9任一项所述的一种促进骨骼发育的制剂在制备促进骨骼发育产品中的应用。