一种外泌体纯化装置及其方法与流程

本发明涉及外泌体提取相关，具体为一种外泌体纯化装置及其方法。

背景技术：

1、外泌体是由细胞分泌的一种具有磷脂双分子层结构的囊泡，其尺寸在30-200nm之间，在血浆，尿液，细胞培养液中广泛的存在，其中携带很多重要的蛋白质信息，参与细胞间交流，免疫响应等许多重要的生物学过程，由于其尺寸较小且来源于生物体本身，毒性较低对于生物体无免疫原性，因此具有广泛的前景被应用在药物传递到体内的载体实现疾病的治疗。

2、如专利号为cn114134109b的专利文献公开了一种egf间充质干细胞外泌体的纯化方法，包括如下步骤：步骤1：将含有egf间充质干细胞外泌体的细胞培养液离心，取上清液；步骤2：将步骤1中收集的上清液用切向流超滤系统过滤浓缩，得浓缩液；步骤3：将步骤2中的浓缩液用阴离子交换层析柱分离纯化，收集洗脱峰溶液；步骤4：将步骤3中收集的洗脱峰溶液用肝素亲和层析柱分离纯化，收集洗脱峰溶液，即得egf间充质干细胞外泌体。该方法能够特异性分离提纯egf间充质干细胞外泌体，可有效分离携带egf蛋白和未携带egf蛋白的外泌体，提取的egf间充质干细胞外泌体与传统超速离心方法相比，egf蛋白含量更高，并且可以保持外泌体的完整性和生物学功能。

3、但是，在实际使用过程中，发明人发现目前在对培养液进行离心处理之后需要操作人员逐个将试管取出，再将上清液转移至过滤设备中进行过滤，对操作人员经验依懒性强，收集结果重复性差，回收率低，并且降低了外泌体纯化收集的效率。

技术实现思路

1、为解决现有技术存在的缺陷，本发明提供一种外泌体纯化装置及其方法。

2、为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

3、本发明提供一种外泌体纯化装置，包括：

4、离心机构、过滤机构以及设置在所述离心机构、过滤机构之间的工位切换机构；

5、所述工位切换机构上分别设置有与离心机构、过滤机构对应的第一升降组件、第二升降组件；

6、所述离心机构包括离心桶、设置在所述离心桶内部且用于存放试管单元的试管架、与所述第一升降组件相配合的桶盖以及设置在桶盖内部且用于封堵试管单元中的管口的封堵组件；

7、所述第二升降组件上还设置有取液机构，所述取液机构用于将所述离心机构中试管单元内部上清液吸取并将其转移至过滤机构处。

8、作为本发明的一种优选技术方案，所述试管单元包括管体以及与所述管体相配合且中部开设有通孔的试管塞。

9、作为本发明的一种优选技术方案，所述封堵组件包括：

10、转动盘，通过转动杆与所述桶盖转动设置；

11、封堵杆，固定设置在所述转动盘的下端且与所述通孔一一对应设置；

12、同步杆，设置有若干组且固定设置在所述转动盘的下端，所述试管架的上端对应于所述同步杆的位置处开设有若干个凹槽。

13、作为本发明的一种优选技术方案，所述第一升降组件包括：

14、支架，固定设置在所述工位切换机构上；

15、螺纹杆，转动设置在所述支架上且其中一端与第一驱动单元传动设置；

16、固定板，与所述桶盖固定连接。

17、作为本发明的一种优选技术方案，所述转动盘的上端开设有限位槽，所述支架的下端对应于所述限位槽的位置处通过缓冲弹簧连接有限位杆。

18、作为本发明的一种优选技术方案，所述取液机构包括：

19、第二驱动单元，与所述第二升降组件相连接；

20、支撑板，固定设置在所述第二升降组件的下端且内部放置有若干组与所述试管单元一一对应设置的滴管单元，所述支撑板的上端固定设置有与所述滴管单元中的囊体紧贴设置的围板；

21、转动板，与所述第二驱动单元传动设置且上端开设有若干组滑槽；

22、滑杆，滑动设置在所述滑槽的内部且所述滑杆的下端固定设置有挤压板。

23、作为本发明的一种优选技术方案，所述过滤机构包括：

24、接料桶，其上端设置有漏斗状的承接板；

25、驱动泵单元，其中一端与所述接料桶相连接；

26、过滤组件，其进料管与所述驱动泵单元相连接且出料管与所述接料桶相连接；

27、收集管，设置在所述过滤组件的下端并用于收集富集液。

28、作为本发明的一种优选技术方案，所述过滤组件包括：

29、外壳体，其中一侧面通过连接环固定设置有所述进料管以及出料管；

30、过滤管，并排设置有若干组且放置在所述外壳体的内部，所述过滤管的两端分别与连接环转动设置；

31、u型管，用于连通多组过滤管；

32、传动齿轮，设置在所述过滤管的其中一端且多组所述传动齿轮之间相互传动连接；

33、主动齿轮，与其中一组所述传动齿轮传动连接且与第三驱动单元传动设置。

34、作为本发明的一种优选技术方案，所述工位切换机构包括：

35、支撑台，其上端放置有第四驱动单元；

36、转动单元，与所述第四驱动单元传动设置且上端固定连接有转盘；

37、转动轮，设置在支撑台上且上端与所述转盘相抵接；

38、连接杆，用于与第一升降组件、第二升降组件相互连接。

39、本发明还提供了一种外泌体的纯化方法，包括以下步骤：

40、配置含有外泌体的细胞培养液；

41、使用离心机构对细胞培养液进行离心处理，形成上清液；

42、取液机构将离心机构中的上清液进行吸取；

43、配合工位切换机构将上清液送入至过滤机构的内部进行过滤；

44、收集从过滤机构中获得的富集液。

45、本发明的有益效果是：

46、1.本发明中通过设置工位切换机构配合离心机构以及过滤机构，在离心机构完成离心工作之后，配合工位切换机构可以自动将离心机构中试管单元内部的上清液自动转移至过滤机构的内部，无需人工操作，使得收集结果重复性好，回收率高，并且极大地提高了外泌体纯化收集的效率。

47、2.本发明中通过设置培养液在过滤机构的内部进行切向过滤的同时，还可以使多个过滤管同步转动，更加有利于沉积在过滤管上的一些截流物可以随着液流向前而被冲走，以避免较大的截流物在重力的作用下堆积在过滤管的底部，相较于普通的切向流过滤来说，本发明中过滤管的滤膜更加不容易堵且可以重复使用。

1.一种外泌体纯化装置，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的一种外泌体纯化装置，其特征在于，所述试管单元（12）包括管体（121）以及与所述管体（121）相配合且中部开设有通孔（1221）的试管塞（122）。

3.根据权利要求2所述的一种外泌体纯化装置，其特征在于，所述封堵组件（15）包括：

4.根据权利要求3所述的一种外泌体纯化装置，其特征在于，所述第一升降组件（31）包括：

5.根据权利要求4所述的一种外泌体纯化装置，其特征在于，所述转动盘（151）的上端开设有限位槽（1511），所述支架（311）的下端对应于所述限位槽（1511）的位置处通过缓冲弹簧（315）连接有限位杆（316）。

6.根据权利要求1所述的一种外泌体纯化装置，其特征在于，所述取液机构（4）包括：

7.根据权利要求1所述的一种外泌体纯化装置，其特征在于，所述过滤机构（2）包括：

8.根据权利要求7所述的一种外泌体纯化装置，其特征在于，所述过滤组件（24）包括：

9.根据权利要求1所述的一种外泌体纯化装置，其特征在于，所述工位切换机构（3）包括：

10.一种外泌体的纯化方法，具有如权利要求1-9任一所述的外泌体纯化装置，其特征在于，包括以下步骤：